白及培育方法、白及提取物及其制备和抗氧化性检测方法技术

本发明专利技术属于农业技术和轻工业交叉技术领域，具体涉及一种高抗氧化性白及培育方法、白及提取物及其制备和抗氧化性检测方法。高抗氧化白及培育方法，将白及在温度范围

【技术实现步骤摘要】
白及培育方法、白及提取物及其制备和抗氧化性检测方法


[0001]本专利技术属于农业技术和轻工业交叉
，具体涉及一种高抗氧化性白及培育方法、白及提取物及其制备和抗氧化性检测方法。

技术介绍

[0002]白及(Bletillastriata L.)是兰科(Orchidaceae)白及属宿根草本植物，中医理论认为，白及具有收敛、补血、止血、消肿等功效，外敷能治创伤出血、痈肿，烫伤，疔疮等，具有多种药用价值，白及提取物白及多糖具有广泛的应用场景。白及多糖的主要成分为葡甘露聚糖，是一种由摩尔比为1:1.6
‑
1.7的葡萄糖和甘露糖主要通过1,4糖苷键聚合而成的高分子量的天然植物中性高分子，被证明具有良好的抗衰老、防癌、降低三高效果。目前的白及种植多是自然种植，种植条件各异，白及的产量、有效成分含量及药效参差不齐，影响白及多糖药效的主要因素尚不清除，更无法从栽培或制备工艺上对白及多糖药药效进一步优化。因而迫切需要对白及种植条件白及多糖制备工艺加以改进，急需一种标准化栽培方法和制备方法对白及有效成分和白及多糖药效进行标准化控制并阐述白及多糖药效主要影响因素进而对白及栽培或制备工艺进行优化。

技术实现思路

[0003]为解决以上至少一个问题，进一步提高白及有效成分和白及多糖的药效，本专利技术提供了一种高抗氧化性白及的栽培方法、高抗氧化性白及提取物、高抗氧化性白及提取物的制备方法和白及提取物抗氧化性检测方法，本文优化白及的栽培工艺，优选出最适宜产出高抗氧化性白及生长的温度范围、年光照时间、昼夜温差、湿度范围，较现有技术制得的白及提取物具有更好的抗氧化性效果；同时还进一步发现了白及提取物的平均分子量是影响白及提取物抗氧化性的主要因素。
[0004]进一步地，申请人发现白及提取物抗氧化性可以通过抑制自由基实现。
[0005]申请人提供一种高抗氧化白及培育方法，将白及在温度范围
‑
5～22.5℃、年光照时间1000
‑
1600h、昼夜温差10
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18℃、湿度范围30％
‑
80％的环境下种植。
[0006]同时提供一种高抗氧化白及提取物的制备方法，使用上述培育方法培育的白及作为原料，包括以下步骤：将白及粉碎加水溶解提取后加入乙醇沉淀制得白及提取物。
[0007]优选的，白及粉碎前还包括烘干过程；加水溶解提取时还包括在80
‑
100℃下水浴处理；加入乙醇沉淀前后均包括离心处理过程。
[0008]一种高抗氧化白及提取物，其平均分子量范围为80
‑
100万，由上述的制备方法制备；所述白及提取物羟自由基清除率>30％且DPPH自由基清除率>24％；
[0009]所述白及提取物羟自由基清除率测量所需样品体系为：A体积3％
‑
8％质量分数的白及提取物水溶液、1
‑
1.5倍A体积水、0.4
‑
0.6倍A体积的0.1
‑
20mmol/l的水杨酸溶液、0.4
‑
0.6倍A体积的0.1
‑
20mmol/l的FeSO4溶液和0.8
‑
1.2倍A体积的0.1
‑
20mmol/l的过氧化氢溶液；A取值1
‑
1000ul；
[0010]所述DPPH自由基清除率测量所需样品体系为：B体积3％
‑
8％质量分数的白及提取物水溶液、18
‑
20倍B体积的0.01
‑
10mmol的DPPH溶液；B取值1
‑
1000ul。
[0011]同时提供一种白及提取物的抗氧化性检测方法，包括上述白及提取物的制备步骤并用于检测上述的白及提取物的抗氧化性，包括以下步骤：制备含白及提取物的样品组和不含白及提取物的参照组；向所述参照组和所述样品组加入处理试剂并测定所述参照组和所述样品组的特征量获取抗氧化性数据。本申请中DPPH自由基清除能力用DPPH自由基清除率D％表示；羟自由基清除能力用羟自由基清除率D％表示。
[0012]优选的，所述特征量的测试方法为吸光光度法或滴定法；所述特征量为吸光度或滴定浓度。
[0013]优选的，所述抗氧化性数据为羟自由基清除能力或DPPH自由基清除能力；本文所述DPPH为1,1
‑
二苯基
‑2‑
三硝基苯肼，通常作为稳定的自由基使用。
[0014]优选的，所述羟自由基清除能力的判定方法为：
[0015]样品组包括：A体积3％
‑
8％质量分数的白及提取物水溶液、1
‑
1.5倍A体积水、0.4
‑
0.6倍A体积的试剂一、0.4
‑
0.6倍A体积的试剂二和0.8
‑
1.2倍A体积的试剂三；
[0016]所述参照组包括不含试剂二的空白组和包含试剂二的对照组；
[0017]所述对照组包括：2
‑
3倍A体积水、0.4
‑
0.6倍A体积的试剂一、0.4
‑
0.6倍A体积的试剂二和0.8
‑
1.2倍A体积的试剂三；
[0018]所述空白组包括：2
‑
4倍A体积水、0.4
‑
0.6倍A体积的试剂一和0.8
‑
1.2倍A体积的试剂三；
[0019]将所述样品组、所述对照组和所述空白组在20
‑
45℃保温5
‑
30min后测定分光光度值得出所述羟自由基清除能力；A取值1
‑
1000ul。
[0020]优选的，所述羟自由基清除能力的计算方法为:
[0021]羟自由基清除率D％＝(对照组分光光度值
‑
样品组分光光度值)
÷
(对照组分光光度值
‑
空白组分光光度值)
×
100％；所述分光光度值的测定波长选择510nm；所述试剂一为0.1
‑
20mmol/l的水杨酸溶液；所述试剂二为0.1
‑
20mmol/l的FeSO4溶液；所述试剂三为0.1
‑
20mmol/l的过氧化氢溶液。
[0022]优选的，所述DPPH自由基清除能力的判定方法为：
[0023]样品组包括：B体积3％
‑
8％质量分数的白及提取物水溶液、18
‑
20倍B体积的试剂四；
[0024]所述参照组包括0.75
‑
0.8倍B体积的水、18
‑
21倍B体积的试剂四；
[0025]将所述样品组、所述参照组在20
‑
45℃保温5
‑
30min后测定分光光度值得出所述DPPH自由本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高抗氧化白及培育方法，其特征在于，将白及在温度范围
‑
5～22.5℃、年光照时间1000
‑
1600h、昼夜温差10
‑
18℃、湿度范围30％
‑
80％的环境下种植。2.一种高抗氧化白及提取物的制备方法，其特征在于，使用权利要求1所述培育方法培育的白及作为原料，包括以下步骤：将白及粉碎加水溶解提取后加入乙醇沉淀制得白及提取物。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，白及粉碎前还包括烘干过程；加水溶解提取时还包括在80
‑
100℃下水浴处理；加入乙醇沉淀前后均包括离心处理过程。4.一种高抗氧化白及提取物，其特征在于，其平均分子量范围为80
‑
100万，由权利要求2或3所述的制备方法制备。5.根据权利要求4所述的白及提取物，其特征在于，所述白及提取物羟自由基清除率>30％且DPPH自由基清除率>24％；所述白及提取物羟自由基清除率测量所需样品体系为：A体积3％
‑
8％质量分数的白及提取物水溶液、1
‑
1.5倍A体积水、0.4
‑
0.6倍A体积的0.1
‑
20mmol/l的水杨酸溶液、0.4
‑
0.6倍A体积的0.1
‑
20mmol/l的FeSO4溶液和0.8
‑
1.2倍A体积的0.1
‑
20mmol/l的过氧化氢溶液；A取值1
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1000ul；所述DPPH自由基清除率测量所需样品体系为：B体积3％
‑
8％质量分数的白及提取物水溶液、18
‑
20倍B体积的0.01
‑
10mmol的DPPH溶液；B取值1
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1000ul。6.一种白及提取物的抗氧化性检测方法，其特征在于，包括权利要求2或3所述制备方法的白及提取物步骤并用于检测权利要求4所述的白及提取物的抗氧化性，包括以下步骤：制备含白及提取物的样品组和不含白及提取物的参照组；向所述参照组和所述样品组加入处理试剂并测定所述参照组和所述样品组的特征量获取抗氧化性数据。7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，所述特征量的测试方法为吸光光度法或滴定法；所述特征量为吸光度或滴定浓度。8.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，所述抗氧化性数据为羟自由基清除能力或DPPH自由基清除能力。9.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于，所述羟自由基清除能力的判定方法为：样品组包括：A体积3％
‑
8％质量分数的白及提取物水溶液、1

【专利技术属性】
技术研发人员：吴明开，刘佳微，韩雪，刘海，
申请(专利权)人：贵州省农作物品种资源研究所，
类型：发明
国别省市：