一种清半夏中草酸钙针晶显微特征常数的测量方法技术

本发明专利技术公开了一种清半夏中草酸钙针晶显微特征常数的测量方法，步骤包括：(1)将清半夏炮制品粉碎过筛后，配制成均匀的混悬液，移取适量混悬液于载玻片上，加热透化，再滴入适量甘油乙醇试液，盖上盖玻片；(2)在显微镜下观察，计取盖玻片内草酸钙针晶束的数量，通过公式计算草酸钙针晶显微特征常数：P＝(X

【技术实现步骤摘要】
一种清半夏中草酸钙针晶显微特征常数的测量方法


[0001]本专利技术属于中药领域，具体涉及一种清半夏中草酸钙针晶显微特征常数的测量方法。

技术介绍

[0002]清半夏为天南星科半夏属植物半夏Pinellia ternata(Thunb.)Breit的常见炮制品之一，具有燥湿化痰的作用。半夏具有多种毒性，其中以黏膜刺激性表现最为显著，故黏膜刺激性常用于评价半夏炮制工艺的优劣，一般通过兔眼刺激性反应评价半夏及其炮制品黏膜刺激性。草酸钙针晶，为半夏及其炮制品黏膜刺激性的主要来源，其长20
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144μm，数量众多，为半夏及其炮制品中较为明显且稳定的显微特征，在偏光显微镜下呈亮黄色或多彩色。目前还没有半夏中草酸钙针晶含量测定的标准方法。

技术实现思路

[0003]针对现有技术存在的上述不足，本专利技术的目的是提供一种清半夏中草酸钙针晶显微特征常数的测量方法。
[0004]为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0005]一种清半夏中草酸钙针晶显微特征常数的测量方法，步骤如下：
[0006](1)将清半夏炮制品粉碎过筛后，配制成均匀的混悬液，移取适量混悬液于载玻片上，加热透化，再滴入适量甘油乙醇试液，盖上盖玻片；
[0007](2)在显微镜下观察，计取盖玻片内草酸钙针晶束的数量，通过下式计算草酸钙针晶显微特征常数：P＝(X
×
V)/(V1
×
W)，
[0008]其中，P为显微特征常数，单位为个/mg；X为盖玻片内草酸钙针晶束的个数；V为混悬液体积；V1为载玻片上加入的混悬液体积；W为混悬液中清半夏炮制品的质量。
[0009]其中，甘油乙醇试液为甘油、乙醇各1体积份混合得到。
[0010]优选地，所述步骤(2)中盖玻片内草酸钙针晶束的数量计取方法为：以黏液细胞内草酸钙针晶束的最小面积S为标准，面积不小于S的草酸钙针晶束为一个计数单位，面积不小于1/2S的草酸钙针晶束也计为一个计数单位，其它情况下的草酸钙针晶束忽略不计。
[0011]优选地，步骤(1)中配制的混悬液浓度为5～15mg/mL。
[0012]优选地，步骤(1)中配制的混悬液浓度为10mg/mL。
[0013]优选地，步骤(1)中移取至载玻片上的混悬液与滴入的甘油乙醇试液的体积比为1:0～100。其中，混悬液与滴入的甘油乙醇试液的体积比可为1:1、1:10、1:20、1:25、1:50等。实验中可以根据需要滴入1滴、2滴等不同量的甘油乙醇试液。
[0014]优选地，清半夏炮制品粉碎过筛后的粒度为50～100目。
[0015]优选地，步骤(1)中所述混悬液平行制备5～15片载玻片试样，计算盖玻片内草酸钙针晶束个数的平均值。
[0016]优选地，步骤(1)中使用水合氯醛配制混悬液。
[0017]本专利技术还提供了上述测量方法在评价清半夏黏膜刺激性中的应用。
[0018]优选地，应用方法为：以兔眼刺激性评分分值为因变量，以草酸钙针晶显微特征常数为自变量，建立兔眼刺激性评分分值与草酸钙针晶显微特征常数的线性回归方程，利用所述的线性回归方程，通过测定草酸钙针晶显微特征常数，可计算得到兔眼刺激性评分分值，根据评分分值即可评价清半夏的黏膜刺激性。
[0019]其中线性回归方程如下：
[0020]I＝
‑
0.370+0.099T(r＝0.910，F＝43.447，P＝0.000)
[0021]I表示兔眼刺激性评分分值，T表示草酸钙针晶显微特征常数(个/mg)
[0022]P为0.000，小于0.05，表明草酸钙针晶显微特征常数与兔眼刺激性具有显著相关性，且随着显微特征常数增加，兔眼刺激性增大，表明黏膜刺激性增强。
[0023]相比现有技术，本专利技术具有如下有益效果：本专利技术通过测定清半夏炮制品中草酸钙针晶显微特征常数及其兔眼刺激性，分析两组数据的相关性，从植物组织学角度评价清半夏的黏膜刺激性，建立了清半夏草酸钙针晶束与其黏膜刺激性间的定量关系。
附图说明
[0024]图1是清半夏中草酸钙针晶束显微特征值测定
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线性考察。
具体实施方式
[0025]下面结合具体实施例对本专利技术作进一步详细说明。
[0026]本专利技术实施例中选用的清半夏炮制品分别由白矾溶液浸泡法、白矾溶液煮制法、清水浸泡后白矾溶液浸泡法、汤洗法四种炮制工艺制得，四种炮制工艺分别如下：
[0027]白矾溶液浸泡法：将半夏药材放入润药箱中，加入8％白矾溶液进行浸泡(至内无干心，口尝微有麻舌感)，取出用流水冲洗，切片，干燥，过筛，即得清半夏饮片。
[0028]白矾溶液煮制法：将半夏药材放入锅中，加入8％白矾溶液进行煮制(武火煮沸、文火煎煮)，煮至内无干心，口尝微有麻舌感，取出用流水冲洗，切片，干燥，过筛，即得清半夏饮片。
[0029]清水浸泡后白矾溶液浸泡法：将半夏药材放入润药箱中，加入清水浸泡(至内无干心后)，换成8％白矾溶液进行浸泡(至内无干心，口尝微有麻舌感)，取出用流水冲洗，切片，干燥，过筛，即得清半夏饮片。
[0030]汤洗法：将半夏药材放入润药箱中，用沸水进行淘洗，再用手反复搓洗半夏表面，水温降至约40℃则更换沸水进行下一次洗制，如此反复至淘洗液清澈，洗至表面无滑腻感，内无干心，口尝微有麻舌感，取出用流水冲洗，切片，干燥，过筛，即得清半夏饮片。
[0031]本专利技术选用的不同炮制工艺制得的清半夏炮制品，其含水量如表1所示，含水量均不超过13.0％，符合《中国药典》2020年版的规定。
[0032]表1清半夏不同炮制品及其含水量
[0033]No.炮制方法大小等级*含水量％1白矾溶液浸泡法大档8.372白矾溶液浸泡法小档10.293白矾溶液煮制法大档11.00
4白矾溶液煮制法小档12.505清水浸泡后白矾溶液浸泡法大档10.856清水浸泡后白矾溶液浸泡法小档10.667汤洗法大档11.528汤洗法小档9.229白矾溶液煮制法大、小档混合12.9210白矾溶液煮制法大、小档混合9.4711白矾溶液煮制法大、小档混合10.31
[0034]*参考《中药材产销》
[84]和《中药材商品规格等级半夏》，将本试验中半夏药材大小分档标准定为：直径不小于13.0mm，为大档；直径小于13.0mm，为小档。
[0035]黏液细胞内草酸钙针晶束最小面积S的确定
[0036]取清半夏不同炮制品，分别粉碎过筛(100目)后，精密称取50mg，置5mL量瓶中，加入水合氯醛试液均匀混悬并定容，用移液枪精密移取0.020mL混悬液置载玻片上，加热透化，滴入1滴甘油乙醇试液，盖上盖玻片。每份溶液平行制片30张，计数粘液细胞内草酸钙针晶束的面积，数据见表2。由表2可知，黏液细胞内草酸钙针晶束的最小面积S(μm2)为4051.5。
[0037]表2清半夏不同炮制品的草酸钙针晶束的最小面积统计表...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种清半夏中草酸钙针晶显微特征常数的测量方法，其特征在于，步骤包括：(1)将清半夏炮制品粉碎过筛后，配制成均匀的混悬液，移取适量混悬液于载玻片上，加热透化，再滴入适量甘油乙醇试液，盖上盖玻片；(2)在显微镜下观察，计取盖玻片内草酸钙针晶束的数量，通过下式计算草酸钙针晶显微特征常数：P＝(X
×
V)/(V1×
W)，其中，P为显微特征常数，单位为个/mg；X为盖玻片内草酸钙针晶束的个数；V为混悬液体积；V1为载玻片上加入的混悬液体积；W为混悬液中清半夏炮制品的质量。2.根据权利要求1所述的清半夏中草酸钙针晶显微特征常数的测量方法，其特征在于，所述步骤(2)中盖玻片内草酸钙针晶束的数量计取方法为：以黏液细胞内草酸钙针晶束的最小面积S为标准，面积不小于S的草酸钙针晶束为一个计数单位，面积不小于1/2S的草酸钙针晶束也计为一个计数单位，其它情况下的草酸钙针晶束忽略不计。3.根据权利要求1所述的清半夏中草酸钙针晶显微特征常数的测量方法，其特征在于，步骤(1)中配制的混悬液浓度为5～15mg/mL。4.根据权利要求3所述的清半夏中草酸钙针晶显微特征常数的测量方法，其特征在于，步骤(1...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗辉，叶慧敏，张湘东，潘文杰，邓秋婷，方勇兵，陈俊辉，
申请(专利权)人：广东经典名方科技有限公司，
类型：发明
国别省市：