一种磷脂酶及其应用制造技术

一种磷脂酶及其应用。本发明专利技术属于酶的基因工程技术领域，本发明专利技术属于酶的基因工程技术领域，具体涉及通过易错PCR技术及重叠PCR技术体外定向进化获得比酶活提高的磷脂酶D突变体，然后将高活力的磷脂酶D基因分别在枯草芽孢杆菌表达系统、解淀粉芽孢杆菌表达系统和地衣芽孢杆菌表达系统中进行表达，表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D最高可提高500％。将高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、地衣芽孢杆菌表达系统、解淀粉芽孢杆菌表达系统内发酵，并且利用高活力磷脂酶D有效地制备磷脂酸、磷酯酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺，磷脂酰甘油和磷脂酰肌醇。脂酰甘油和磷脂酰肌醇。脂酰甘油和磷脂酰肌醇。

【技术实现步骤摘要】
一种磷脂酶及其应用
[0001]本申请为专利技术专利申请201911149105.2的分案申请，201911149105.2的申请日为2019年11月21日，申请号为201911149105.2，专利技术名称为：一种新型磷脂酶D及其制备功能性磷脂的方法。

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[0002]本专利技术属于酶的基因工程
，具体涉及通过易错PCR技术及重叠PCR技术体外定向进化获得比酶活提高的磷脂酶D突变体，并提供由高活力磷脂酶D催化制备功能性磷脂的方法。

技术介绍
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[0003]磷脂酶D(phospholipase D，PLD)来源广泛，主要分布在动物、植物及微生物中。PLD可催化发生两种反应：其一，水解磷脂生成磷脂酸和羟基化合物；其二，当有另一种含羟基的化合物存在时，可催化其结合到磷脂的碱基上，形成新的磷脂，此为PLD的转磷酯化反应或碱基交换反应。两种反应中尤为重要的是PLD的转磷酯化作用，它可以将自然界大量存在的磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine，PC)催化合成为其他的稀有磷脂，如磷脂酸(phosphatidic acid，PA)、磷本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种磷脂酶D突变体，其特征在于，基于SEQ ID No.2所示的磷脂酶D氨基酸序列，发生如下突变中的一种获得：P316W、P316W/A452F。2.权利要求1所述磷脂酶D突变体的编码基因。3.权利要求1所述磷脂酶D突变体或权利要求2所述的基因的用途，其特征在于，用于磷脂酸、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰甘油和磷脂酰肌醇的制备。4.一种包含权利要求2所述的基因的重组载体或重组菌。5.如权利要求4所述的重组载体或重组菌，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘逸寒，路福平，
申请(专利权)人：天津科技大学，
类型：发明
国别省市：