一种NG-2免疫组织化学抗体制造技术

技术编号:34492114 阅读:47 留言:0更新日期:2022-08-10 09:11
本发明专利技术涉及一种NG

【技术实现步骤摘要】
一种NG

2免疫组织化学抗体


[0001]本专利技术涉及一种NG

2免疫组织化学抗体,属于生物医药


技术介绍

[0002]免疫组织化学是利用抗原与抗体间特异性结合原理和特殊的标记技术,对组织和细胞内的特定抗原或抗体进行定位、定性或定量检测的技术。免疫组织化学技术具有特异性强、敏感性高、定位准确、形态与功能相结合等特点,有利于在病理学领域的深入研究,在现代病理诊断中起重要作用。
[0003]病理科日常工作使用的免疫组织化学抗体品种达数百种,对人类疾病的诊断和治疗发挥着重要的作用。随着人类对疾病认识的不断提高,病理科应用的抗体种类也逐渐增加。在近十年来,随着人类基因组计划完成和蛋白质谱计划的推进,越来越多的抗体的潜在价值待被发掘,并不断扩展和添加到病理科抗体应用的目录中。
[0004]免疫组织化学中所使用的抗体,又称为一抗(Primary Antibody),根据其制备方式可分为单克隆抗体和多克隆抗体。单克隆抗体因其特异性高广受免疫组化使用者的青睐,在病理科使用的抗体中占绝大多数。但本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种NG

2抗体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1:选择编码NG

2的核苷酸序列片段,构建质粒,在原核细胞中表达,并进行NG

2蛋白表达和制备;步骤2:采用NG

2蛋白抗原免疫小鼠,进行抗原性分析:抗原乳化、免疫Balb/c小鼠;对免疫小鼠采血,检测免疫效果并进行ELISA血清滴度分析,融合前加强免疫,骨髓瘤细胞株的复苏、驯化,进行融合前准备;步骤3:进行96孔细胞培养板的细胞融合;对细胞融合率进行检测;对母克隆培养上清进行ELISA检测,挑选阳性母克隆并进行免疫组化筛选,挑选免疫组化特异性好的进行上清检测;步骤4:选择两个阳性亚克隆进行腹水生产准备;提供2个阳性亚克隆细胞株并进行腹水生产和抗体纯化;获得NG

2抗体。2.根据权利要求1所述的一种NG

2抗体的制备方法获得的一种NG

2免疫组织化学抗体,其特征在于,所述抗体包括重链可变区和轻链可变区,重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。3.根据权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员:侯英勇蒋冬先徐晨宋琦陈伶俐罗荣奎张磊黄雯王慧美刘玉凤黄洁沈立承徐磊刘佳宿杰阿克苏
申请(专利权)人:复旦大学附属中山医院
类型:发明
国别省市:

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