蔓荆子的指纹图谱构建方法以及多指标含量检测方法技术

本发明专利技术涉及一种蔓荆子的指纹图谱构建方法及其多指标成分的含量检测方法。所述指纹图谱构建方法包括如下步骤：取原儿茶酸对照品、4

【技术实现步骤摘要】
蔓荆子的指纹图谱构建方法以及多指标含量检测方法


[0001]本专利技术涉及医药
，特别是涉及一种蔓荆子的指纹图谱构建方法以及多指标含量检测方法。

技术介绍

[0002]《中国药典》2020年版记载，蔓荆子为马鞭草科植物单叶蔓荆Vitex trifolia L.var.simplicifolia Cham.或蔓荆Vitex trifolia L.的干燥成熟果实。蔓荆子主要分布于江西、山东、安徽、浙江等省；主产于江西省。据《中国药典》2020年版记载，蔓荆子味辛、苦，微寒，归膀胱、肝、胃经，具有疏散风热、清利头目等功效，常用于风热感冒头痛、齿龈肿痛、目赤多泪、目暗不明、头晕目眩等疾病的治疗，为临床上常用的一味中药。
[0003]研究发现，蔓荆子的化学成分主要包括挥发油类、双萜类、黄酮类、氨基酸、脂肪酸类等。其中挥发油类包括莰烯和蒎烯等；双萜类包括牡荆内酯、前牡荆内酯、蔓荆呋喃和前蔓荆呋喃等；黄酮类包括有异荭草苷(Isoorientin)、蔓荆子黄素(casticin)、黄艾素、7
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去甲基艾黄素、木犀草素等；其他还包括对羟基苯甲酸、香草酸等。其中异荭草苷、蔓荆子黄素是蔓荆子的主要成分。现代药理研究表明，黄酮类成分为蔓荆子的活性成分，因而为了保证蔓荆子的质量，有必要对其黄酮类成分进行研究。
[0004]有方法提供一种炒蔓荆子标准汤剂质量检测方法，以蔓荆子黄素作为对照品，以甲醇
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0.1％磷酸溶液为流动相进行液相色谱仪分析，构建炒蔓荆子的特征图谱。但是该方法耗时较长，且特征图谱包含的特征峰仅为6个，不足以全面地反映炒蔓荆子的质量特征。
[0005]还有方法提供蔓荆子炮制前后HPLC指纹图谱比较研究，以异荭草苷、蔓荆子黄素、香草酸作为对照品，以乙腈
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0.1％磷酸溶液为流动相进行液相色谱仪分析，构建蔓荆子炮制前后HPLC指纹图谱。但是该方法同样耗时较长，且特征峰之间分离度较低，难以准确衡量蔓荆子的质量。

技术实现思路

[0006]基于此，本专利技术提供一种检测耗时短、特征峰多，特别是黄酮类成分的特征峰多，能够快速、全面反映蔓荆子质量的蔓荆子的指纹图谱构建方法以及多指标含量检测方法。同时方法适用于蔓荆子药材、蔓荆子饮片、蔓荆子标准汤剂、蔓荆子中药配方颗粒的相关检测，涉及范围较广。
[0007]本专利技术的第一方面，提供一种蔓荆子的指纹图谱构建方法，包括如下步骤：
[0008]取原儿茶酸对照品、4
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羟基苯甲酸对照品、香草酸对照品、异荭草苷对照品、蔓荆子黄素对照品、穗花牡荆苷对照品和绿原酸对照品，以溶剂溶解，制备对照品溶液；
[0009]取蔓荆子对照药材，加入提取溶剂进行提取，提取液滤过，制备对照药材溶液；
[0010]取蔓荆子样品，加入提取溶剂进行提取，提取液滤过，制备供试品溶液；
[0011]将所述对照品溶液、对照药材溶液和供试品溶液分别进行高效液相色谱检测，构建蔓荆子的指纹图谱；
[0012]其中所述高效液相色谱检测的条件包括：
[0013]色谱柱的固定相为十八烷基硅烷键合硅胶；
[0014]流动相A为乙腈，流动相B为体积浓度为0.05％～0.15％的磷酸水溶液；
[0015]梯度洗脱程序包括：
[0016]0min～5min，所述流动相A的体积百分比由5％上升至17％；
[0017]5min～14min，所述流动相A的体积百分比由17％上升至25％；
[0018]14min～23min，所述流动相A的体积百分比由25％上升至65％；
[0019]23min～30min，所述流动相A的体积百分比由65％上升至90％；
[0020]30min～32min，所述流动相A的体积百分比保持为90％。
[0021]在其中一个实施例中，所述高效液相色谱检测的条件还包括：流速为0.28mL/min～0.32mL/min；和/或，柱温为33℃～37℃；和/或，波长为205nm～215nm。
[0022]在其中一个实施例中，所述对照药材溶液和/或所述供试品溶液的制备过程中，所述提取溶剂为体积浓度为60％～80％的甲醇水溶液。
[0023]在其中一个实施例中，所述对照药材溶液和/或所述供试品溶液的制备过程中，提取的方法为加热至回流提取或超声提取，所述超声提取的功率为240W～260W，频率为30KHz～50KHz；和/或，
[0024]提取的时间为20min～60min。
[0025]在其中一个实施例中，所述蔓荆子样品为蔓荆子药材、蔓荆子饮片、蔓荆子标准汤剂或蔓荆子中药配方颗粒。
[0026]在其中一个实施例中，所述蔓荆子的指纹图谱包含20个特征峰，其中，峰1为原儿茶酸、峰2为4
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羟基苯甲酸、峰3为绿原酸、峰4为香草酸、峰7为异荭草苷、峰9为穗花牡荆苷、峰17为蔓荆子黄素。
[0027]本专利技术的第二方面，提供一种蔓荆子的多指标成分的含量检测方法，包括如下步骤：
[0028]取指标成分的对照品，以溶剂溶解，制备不同浓度的对照品溶液；所述指标成分为原儿茶酸、4
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羟基苯甲酸、香草酸、异荭草苷、蔓荆子黄素、穗花牡荆苷和绿原酸中的一种或多种；
[0029]将不同浓度的对照品溶液进行高效液相色谱检测，根据检测获得的峰面积以及浓度构建指标成分的标准曲线；
[0030]取待测样品，加入提取溶剂进行提取，提取液滤过，制备待测样品溶液；
[0031]将所述待测样品溶液进行高效液相色谱检测，然后将检测获得的峰面积代入构建所述指标成分的标准曲线，计算所述待测样品中指标成分的含量；
[0032]其中所述高效液相色谱检测的条件包括：
[0033]色谱柱的固定相为十八烷基硅烷键合硅胶；
[0034]流动相A为乙腈，流动相B为体积浓度为0.05％～0.15％的磷酸水溶液；
[0035]梯度洗脱程序包括：
[0036]0min～5min，所述流动相A的体积百分比由5％上升至17％；
[0037]5min～14min，所述流动相A的体积百分比由17％上升至25％；
[0038]14min～23min，所述流动相A的体积百分比由25％上升至65％；
[0039]23min～30min，所述流动相A的体积百分比由65％上升至90％；
[0040]30min～32min，所述流动相A的体积百分比保持为90％。
[0041]在其中一个实施例中，所述高效液相色谱检测的条件还包括：流速为0.28mL/min～0.32mL/min；或/和，柱温为33℃～37℃；或/和，波长为343nm～353nm。
[0042]在其中一个实施例中，所述待测样品溶液的制备过程中，所述提取溶剂为体积浓度为60％～80％的甲醇水溶液。
[0043]在其中一个实施例中，所述待测样品溶液的制备过程中，提取的方法为加热本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种蔓荆子的指纹图谱构建方法，其特征在于，包括如下步骤：取原儿茶酸对照品、4
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羟基苯甲酸对照品、香草酸对照品、异荭草苷对照品、蔓荆子黄素对照品、穗花牡荆苷对照品和绿原酸对照品，以溶剂溶解，制备对照品溶液；取蔓荆子对照药材，加入提取溶剂进行提取，提取液滤过，制备对照药材溶液；取蔓荆子样品，加入提取溶剂进行提取，提取液滤过，制备供试品溶液；将所述对照品溶液、对照药材溶液和供试品溶液分别进行高效液相色谱检测，构建蔓荆子的指纹图谱；其中所述高效液相色谱检测的条件包括：色谱柱的固定相为十八烷基硅烷键合硅胶；流动相A为乙腈，流动相B为体积浓度为0.05％～0.15％的磷酸水溶液；梯度洗脱程序包括：0min～5min，所述流动相A的体积百分比由5％上升至17％；5min～14min，所述流动相A的体积百分比由17％上升至25％；14min～23min，所述流动相A的体积百分比由25％上升至65％；23min～30min，所述流动相A的体积百分比由65％上升至90％；30min～32min，所述流动相A的体积百分比保持为90％。2.根据权利要求1所述的蔓荆子的指纹图谱构建方法，其特征在于，所述高效液相色谱检测的条件还包括：流速为0.28mL/min～0.32mL/min；和/或，柱温为33℃～37℃；和/或，波长为205nm～215nm。3.根据权利要求1所述的蔓荆子的指纹图谱构建方法，其特征在于，所述对照药材溶液和/或所述供试品溶液的制备过程中，所述提取溶剂为体积浓度为60％～80％的甲醇水溶液。4.根据权利要求1所述的蔓荆子的指纹图谱构建方法，其特征在于，所述对照药材溶液和/或所述供试品溶液的制备过程中，提取的方法为加热至回流提取或超声提取，所述超声提取的功率为240W～260W，频率为30KHz～50KHz；和/或，提取的时间为20min～60min。5.根据权利要求1所述的蔓荆子的指纹图谱构建方法，其特征在于，所述蔓荆子样品为蔓荆子药材、蔓荆子饮片、蔓荆子标准汤剂或蔓荆子中药配方颗粒。6.根据权利要求1～5任一项所述的蔓荆子的指纹图谱构建方法，其特征在于，所述蔓荆子的指纹图谱包含20个特征峰，其中，峰1为原儿茶酸、峰2为4
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羟基苯甲酸、峰3为绿原酸、峰4为香草酸、峰7为异荭草苷、峰9为穗花牡荆苷、峰17为蔓荆子黄素。7.一种蔓荆子的多指标成分的含量检测方法，其特征在于，包括如下步骤：取指标成分的对照品，以溶剂溶解，制备不同浓度的对照品...

【专利技术属性】
技术研发人员：何民友，段志文，邓淙友，官永河，李振雨，刘晓霞，陈向东，李国卫，潘礼业，
申请(专利权)人：广东一方制药有限公司，
类型：发明
国别省市：