一种银屑病动物模型及其构建方法技术

本发明专利技术涉及动物模型技术领域，尤其涉及一种银屑病动物模型及其构建方法，所述方法为通过应用含咪喹莫特试剂来产生银屑病样皮损，所述模型动物在诱导前处于昼夜节律紊乱状态。该模型出现昼夜节律分子钟基因的紊乱，可应用于节律紊乱银屑病的病理机制和药理学研究。节律紊乱银屑病的病理机制和药理学研究。节律紊乱银屑病的病理机制和药理学研究。

【技术实现步骤摘要】
一种银屑病动物模型及其构建方法


[0001]本专利技术涉及动物模型
，尤其涉及一种银屑病动物模型及其构建方法。

技术介绍

[0002]银屑病(psoriasis)是一种免疫介导的慢性炎症性皮肤病，主要表现为鳞屑、红斑和点状出血等，发病机制较为复杂。该病具有反复发作、迁延难愈的特点，环境、季节变化和精神情志等均可成为诱发或加重因素。已有文献报道，银屑病患者存在昼夜节律紊乱状况，夜间瘙痒或疼痛引起的睡眠障碍亦可加重皮损，夜间工作者患银屑病风险增加。
[0003]昼夜节律钟(circadian clock)，也称“生物钟”，是机体适应地球自转的自我调控机制，使生命体大部分生物学功能表现出24小时为周期的昼夜节律。昼夜节律发生紊乱时，机体会出现一系列生理功能障碍。褪黑素(melatonin)是呈现节律性变化的神经内分泌激素，夜间分泌高峰，参与调控昼夜节律和免疫防御反应等。银屑病患者褪黑素分泌水平异常，在凌晨2点明显低于正常对照组，而在早上6点、8点和中午12点时明显高于正常。
[0004]昼夜节律钟的分子机制为高度保守的转录
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翻译反馈环路，如同钟表中齿轮运转一样，在中央和外周振荡器上保持相同的节律。哺乳动物的昼夜节律钟由中央振荡器和外周组织的外周振荡器组成，中央振荡器位于下丘脑视交叉上核，白天由视网膜接收外界光源，通过神经和内分泌途径传导到外周组织。像大多数器官一样，皮肤本身也具有强健的内在生物钟；而且皮肤作为最大的屏障器官，能直接接收外界光源刺激。核心基因昼夜运动输出周期与脑和肌肉组织芳香烃受体核转运蛋白的类似蛋白1是成对的转录激活因子，诱导其自身抑制剂周期和隐花色素的表达，随后Per
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Cry蛋白复合物抑制其自身基因的转录，形成昼夜节律钟的核心环。稳定环是一个辅助反馈环路，在此环路中，BMAL1表达受到核受体亚家族的调节，包括成员REV
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ERBs[REV
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ERBα(NR1D1)，REV
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ERBβ(NR1D2)]和视黄醇类核内受体(retinoic acid receptor
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related orphan receptors，RORs)(RORα,RORβ)，REV
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ERBα/β可抑制BMAL1表达，而RORα/β与REV
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ERBα/β竞争性共享DNA结合位点(ROREs)并促进BMAL1表达。T辅助17(T helper17，Th17)细胞亚群的分化与银屑病的发生密切相关，银屑病患者皮损中IL
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17AmRNA呈高度表达。核受体REV
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ERBα调控Th17细胞分化，是通过直接结合白介素3调控核转录因子(nuclear factor，interleukin3regulated，NFIL3，也称E4BP4)基因位点抑制其转录来实现的；NFIL3直接抑制RORγt转录从而抑制Th17细胞分化。
[0005]近年来，银屑病研究不再局限于局部皮肤，更被认为是一种身心疾病，焦虑或抑郁等情志问题、睡眠障碍、或因工作原因的夜班现象，均可导致机体的昼夜节律紊乱。昼夜节律钟紊乱诱发或加重银屑病的现象不容忽视。因此，针对以上不足，需要提供一种通过调节照明诱导银屑病的复合动物模型。

技术实现思路

[0006]本专利技术要解决的技术问题在于如何构建昼夜节律紊乱的小鼠模型，针对现有技术中的缺陷，提供一种通过调节照明诱导银屑病的复合动物模型，该模型出现昼夜节律分子
钟基因的紊乱，可应用于节律紊乱银屑病的病理机制和药理学研究。
[0007]为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种银屑病动物模型的构建方法，通过对模型动物施用含咪喹莫特试剂来诱导产生银屑病样皮损，所述模型动物在诱导前处于昼夜节律紊乱状态。
[0008]银屑病是受免疫、遗传、环境、情志等多因素影响的慢性炎症性皮肤病，一直以来均作为皮肤科疾病中的难点问题。现代生活方式使人体内部固有昼夜节律钟紊乱，使得银屑病的病理机制更为复杂。由此，我们提出通过改变照明紊乱复合银屑病的动物模型，为银屑病的病理机制和药物治疗研究提供有力的工具。
[0009]在一些实施方式中，产生所述昼夜节律紊乱状态的方法为改变照明时间。
[0010]在一些实施方式中，所述改变照明时间的方法为用缩短昼夜交替照明时间刺激已适应昼夜交替正常照明的模型动物。
[0011]在一些实施方式中，所述昼夜交替正常照明的时间为11
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16小时；更优选为白天照明开始时间为5
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8时，晚上开始时间为17
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20时。
[0012]在具体的实施例中，所述昼夜交替正常照明为白天7时
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19时/夜间19时
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7时。
[0013]在一些实施方式中，所述昼夜交替正常照明的周期大于7天；进一步优选为7
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8天。
[0014]在一些实施方式中，所述缩短昼夜交替照明时间为小于10小时，进一步优选为5
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7小时。
[0015]在一些实施方式中，所述刺激的时间为13
‑
18d。所述刺激的时间还可以为14d(范围内结果基本一致)。
[0016]在一些实施方式中，咪喹莫特诱导的方法包括：施用含咪喹莫特试剂进行诱导的方法包括：以20
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35mg/cm2的涂抹量在刺激后的模型动物的背部皮肤上涂抹含咪喹莫特试剂。
[0017]本专利技术对含咪喹莫特试剂的剂型没有特别的限制。所述含咪喹莫特试剂例如可以为乳膏形式，如包含作为活性成分的咪喹莫特和溶剂或赋形剂。
[0018]另外，本专利技术对含咪喹莫特试剂的浓度没有特别的限制。但是在一些实施方式中，所述含咪喹莫特试剂的浓度为4
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6％，进一步优选为4.5
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5.5％。
[0019]在一些实施方式中，施用含咪喹莫特试剂进行诱导的时间为模型采用缩短昼夜交替照明时间刺激后的7
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12天，优选为8
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11天。
[0020]在一些实施方式中，施用含咪喹莫特进行诱导的时间为大于3天，优选为3
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8天。
[0021]在一些实施方式中，在施用含咪喹莫特试剂进行诱导的同时，进行所述缩短昼夜照明时间刺激以保持所述昼夜节律紊乱状态。
[0022]在一些实施方式中，所述模型动物包括大鼠或小鼠，优选为小鼠。
[0023]另一方面，本专利技术提供了一种银屑病动物模型，其通过第一方面所述的构建方法构建得到的动物模型。
[0024]在一些实施方式中，所述动物模型为大鼠或小鼠，优选为小鼠。
[0025]在一些实施方式中，使用本专利技术的方法构建的银屑病动物模型用于银屑病的研究和药物对银屑病的治疗作用评价。
[0026]实施本专利技术的，具有以下有益效果：
[0027]银屑病患本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种银屑病动物模型的构建方法，其特征在于：通过对模型动物施用含咪喹莫特试剂来诱导产生银屑病样皮损，所述模型动物在诱导前处于昼夜节律紊乱状态。2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于：产生所述昼夜节律紊乱状态的方法为改变照明时间。3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于：所述改变照明时间的方法为用缩短昼夜交替照明时间刺激已适应昼夜交替正常照明的模型动物；优选地，所述昼夜交替正常照明的时间为11
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16小时；更优选为白天照明开始时间为5
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8时，晚上开始时间为17
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20时；优选地，所述昼夜交替正常照明的周期大于7天；进一步优选为7
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8天。4.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于：所述缩短昼夜交替照明时间为小于10小时，进一步优选为5
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7小时；优选地，所述刺激的时间为13
‑
18d。5.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于：施用含咪喹莫特试剂进行...

【专利技术属性】
技术研发人员：解欣然，李萍，张蕾，林燕，刘欣，李雪，
申请(专利权)人：北京市中医药研究所，
类型：发明
国别省市：