哈茨木霉施用方式对烟草生长和诱导抗性的应用制造技术

本发明专利技术涉及哈茨木霉施用方式对烟草生长和诱导抗性的应用，该应用的具体操作步骤如下：S1、试验材料：供试培养基和菌液制备；S2、试验处理：S2.1对照处理、S2.2浸种处理、S2.3灌根处理和S2.4叶面接种处理；S3、试验测定指标及方法：S3.1生物学性状测定、S3.2生理生化指标测定和S3.3抗病性及诱导抗性指标测定；S4、数据处理；进行数据差异显著性检验；木霉不同施用方式均能促进烟株生长，降低黑胫病发生，其中移栽期灌根处理效果最佳。中移栽期灌根处理效果最佳。中移栽期灌根处理效果最佳。

【技术实现步骤摘要】
哈茨木霉施用方式对烟草生长和诱导抗性的应用


[0001]本专利技术涉及烟草生长
，尤其涉及哈茨木霉施用方式对烟草生长和诱导抗性的应用。

技术介绍

[0002]烟草是我国重要的经济作物，由于长期连作及过量化肥、农药施用，烟区土壤质量下降、病害发生日益严重、烟叶品质降低，同时对生态环境产生一系列负面影响，烟草黑胫病是由烟草疫霉菌引起的一种土传真菌病害，在我国各烟区普遍发生，病害严重地块烟草黑胫病发病率高达75％以上，是危害烟叶生产的主要病害之一，严重影响了烟叶生产的可持续发展。

技术实现思路

[0003]本专利技术解决的问题在于提供哈茨木霉施用方式对烟草生长和诱导抗性的应用，哈茨木霉不同施用方式均能促进烟株生长，降低黑胫病发生，其中移栽期灌根处理效果最佳。
[0004]为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：
[0005]哈茨木霉施用方式对烟草生长和诱导抗性的应用，该应用的具体操作步骤如下：
[0006]S1、试验材料：
[0007]S1.1供试培养基：
[0008]PDA：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂15～20g和蒸馏水1000mL，pH自然；
[0009]燕麦琼脂培养基OA：60g燕麦仁、20g蔗糖、8g琼脂和蒸馏水1000mL，pH自然；
[0010]S1.2菌液制备：
[0011]将哈茨木霉CGMCC23294接入PDA平板于27
±
1℃，培养5～7d后，用无菌水冲洗下孢子，制成1
×r/>107cfu/mL哈茨木霉孢子悬浮液备用，将烟草疫霉接入燕麦琼脂OA培养基26
±
1℃，培养6～7d后，用无菌水冲洗下孢子，并调节为1
×
105cfu/mL疫霉孢子悬浮液备用；
[0012]S2、试验处理：
[0013]温室大棚内进行，盆栽土壤采用大田耕层土壤，除去杂草和石子后过1
×
1cm筛网，按1.83g/kg添加复合肥m(N)：m(P2O5)：m(K2O)＝1：1.5：3，充分混匀，装入内口径20.5cm，高度13.5cm的花盆，每盆装土3kg；
[0014]S2.1对照处理：
[0015]将烟草种子表面消毒后，播种于装有已灭菌基质的漂浮育苗盘中培育，总计50株；
[0016]S2.2浸种处理：
[0017]将烟草种子表面消毒后，用哈茨木霉CGMCC23294悬浮液浸种48h，无菌水漂洗干净，播种于装有已灭菌基质的漂浮育苗盘中，待烟苗到达成苗期装盆移栽至温室；
[0018]S2.3灌根处理：
[0019]消毒后的烟草种子，采用常规漂浮育苗，待烟苗到达成苗期装盆移栽，利用哈茨木霉孢子悬浮液进行灌根处理，每株烟接种20mL，总计50株；
[0020]S2.4叶面接种处理：
[0021]烟苗长至成苗期后移栽，移栽当天，将哈茨木霉孢子悬浮液均匀喷施在烟苗叶片上直至叶表面布满一层细微水珠而不滴落为止，每株烟均匀喷施20mL，总计50株；
[0022]S3、试验测定指标及方法：
[0023]S3.1生物学性状测定：
[0024]移栽后28d进行生长量指标测定，各处理选取5株，测量株高、茎围、叶片长度和宽度，自上而下第5片叶，计算叶面积，其中叶面积＝0.6345
×
叶长
×
叶宽；将盆内土壤倒出，轻轻抖落根部土壤，用清水反复冲洗干净，吸水纸吸干水分称量地上部和地下部鲜重，通过EPSON根系扫描仪将根系完整扫描的图像存入计算机，利用WinRHIZO分析总根长、根表面积、平均根直径、根体积及分枝数，扫描后的根部同地上部在105℃烘箱杀青15min后，70℃烘干测干重及根冠比；
[0025]S3.2生理生化指标测定：
[0026]移栽后7、14、21、28d，各处理采样，自上而下第4片叶，避开叶脉取0.5g，采用丙酮乙醇提取比色法，测定叶绿素含量，采用TTC法测根系活力，采用活体分光光度法测根系硝酸还原酶活性，每个处理3次重复；
[0027]S3.3抗病性及诱导抗性指标测定：
[0028]各处理烟苗在移栽后28d，采用灌根接种法，将配制好的烟草疫霉孢子悬浮液1
×
105cfu/mL均匀接种20mL在烟株根部土壤14d后调查发病率，计算病情指数及防治效果，
[0029]取各处理烟株根部测定过氧化物酶POD、多酚氧化酶PPO、苯丙氨酸解氨酶PAL活性和过氧化氢酶CAT活性，各处理3次重复；
[0030]S4、数据处理：
[0031]进行数据差异显著性检验。
[0032]优选的，所述表面消毒通过75％酒精的消毒1min，然后通过30％双氧水消毒5min。
[0033]优选的，所述哈茨木霉孢子悬浮液灌根与叶面喷施处理时间相同，各处理烟株同一时间移栽，且移栽方式与后续管理措施保持一致。
[0034]本专利技术的有益效果是：木霉CGMCC23294菌株对烟草地上部和地下部生物学性状及生物量积累均具有显著促进作用，对叶面积的促进效果优于株高和茎围，整体表现为灌根>浸种>叶面喷施，灌根处理烟苗移栽后28d地上部和地下部鲜重较对照分别增加了84.16％和82.12％，移栽后28d内，3种施用方式处理的烟草根系硝酸还原酶活性、根系活力、叶片叶绿素含量均显著高于对照，灌根处理效果优于浸种和叶面喷施，灌根处理烟草黑胫病发病率和病情指数均显著低于对照和其它处理方式，提高了烟草根系细胞防御性酶PPO、PAL和CAT活性；
[0035]木霉不同施用方式均能促进烟株生长，降低黑胫病发生，其中移栽期灌根处理效果最佳。
附图说明
[0036]图1为本专利技术哈茨木霉不同施用方式烟株地上部生物学性状图；
[0037]图2为本专利技术哈茨木霉不同施用方式烟株地下部生物学性状图；
[0038]图3为本专利技术哈茨木霉不同施用方式烟株生物量积累图；
[0039]图4为本专利技术哈茨木霉不同施用方式烟草硝酸还原酶活性和叶绿素含量折线图；
[0040]图5为本专利技术哈茨木霉不同施用方式烟草根系活力柱状图；
[0041]图6为本专利技术哈茨木霉不同施用方式烟草黑胫病拮抗效果图；
[0042]图7为本专利技术哈茨木霉施用方式对烟草诱导抗性的影响图。
具体实施方式
[0043]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0044]下面给出具体实施例。
[0045]参见图1～图7，哈茨木霉施用方式对烟草生长和诱导抗性的应用，该应用的具体操作步骤如下：
[0046]S1、试验材料：
[0047]S本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.哈茨木霉施用方式对烟草生长和诱导抗性的应用，其特征在于，该应用的具体操作步骤如下：S1、试验材料：S1.1供试培养基：PDA：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂15～20g和蒸馏水1000mL，pH自然；燕麦琼脂培养基OA：60g燕麦仁、20g蔗糖、8g琼脂和蒸馏水1000mL，pH自然；S1.2菌液制备：将哈茨木霉CGMCC23294接入PDA平板于27
±
1℃，培养5～7d后，用无菌水冲洗下孢子，制成1
×
107cfu/mL哈茨木霉孢子悬浮液备用，将烟草疫霉接入燕麦琼脂OA培养基26
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1℃，培养6～7d后，用无菌水冲洗下孢子，并调节为1
×
105cfu/mL疫霉孢子悬浮液备用；S2、试验处理：温室大棚内进行，盆栽土壤采用大田耕层土壤，除去杂草和石子后过1
×
1cm筛网，按1.83g/kg添加复合肥m(N)：m(P2O5)：m(K2O)＝1：1.5：3，充分混匀，装入内口径20.5cm，高度13.5cm的花盆，每盆装土3kg；S2.1对照处理：将烟草种子表面消毒后，播种于装有已灭菌基质的漂浮育苗盘中培育，总计50株；S2.2浸种处理：将烟草种子表面消毒后，用哈茨木霉CGMCC23294悬浮液浸种48h，无菌水漂洗干净，播种于装有已灭菌基质的漂浮育苗盘中，待烟苗到达成苗期装盆移栽至温室；S2.3灌根处理：消毒后的烟草种子，采用常规漂浮育苗，待烟苗到达成苗期装盆移栽，利用哈茨木霉孢子悬浮液进行灌根处理，每株烟接种20mL，总计50株；S2.4叶面接种处理：烟苗长至成苗期后移栽，移栽当天，将哈茨木霉孢子悬浮液均匀喷施在烟苗叶片上直至叶表面布满一层细微水珠而不滴落为止，每株烟均匀喷施20...

【专利技术属性】
技术研发人员：殷全玉，匡志豪，王新发，刘国顺，
申请(专利权)人：河南农业大学，
类型：发明
国别省市：