CDK7抑制剂与伊马替尼联合在治疗胃肠间质瘤的应用制造技术

本发明专利技术涉及CDK7抑制剂与伊马替尼联合在治疗胃肠间质瘤的应用，属于生物医药技术领域。本发明专利技术提供一种CDK7抑制剂联合伊马替尼在制备治疗胃肠间质瘤药物中的应用。应用中的CDK7抑制剂为THZ1，应用中CDK7抑制剂联合伊马替尼用于抑制胃肠间质瘤细胞的增殖，并诱导其凋亡。凋亡。凋亡。

【技术实现步骤摘要】
CDK7抑制剂与伊马替尼联合在治疗胃肠间质瘤的应用


[0001]本专利技术涉及CDK7抑制剂与伊马替尼联合在治疗胃肠间质瘤的应用，属于生物医药


技术介绍

[0002]胃肠间质瘤(Gastrointestinal stromal tumor,GIST)作为消化道最常见的间叶来源肿瘤之一，其发病率占胃肠恶性肿瘤的1
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3％，具有间质干细胞多向分化的潜能，被认为是消化道潜在的恶性肿瘤。GIST可发生于消化道的任何地方，其中以胃及小肠居多，分别占60％
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70％及20％
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30％，也可生长于结肠，直肠，食管，腹腔等部位。目前，保证瘤体完整的R0手术切除是治愈GIST的唯一方法。对于已发生复发转移或其他情况而无法手术的患者，因GIST对放疗与化疗均不敏感，晚期GIST预后不容乐观。c
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KIT(v
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kit Hardy
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Zuckerman 4feline sarcoma viral oncogene homolog)或血小板衍生生长因子受体(Platelet
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derived growth factor receptor A,PDGFRA)的激活突变存在于85％的GIST中。甲磺酸伊马替尼(Imatinib Mesylate,IM)作为一种选择性的酪氨酸激酶受体抑制剂(Tyrosine kinase inhibitors，TKI)通过竞争性抑制ATP结合从而对BCR
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ABL,Kit和PDGFR活性产生抑制作用，进而抑制细胞的增殖。2001年H Joensuu等首次将IM用于治疗不可切除的晚期GIST，取得显著疗效。IM对于治疗胃肠GIST的疗效及安全性被发掘，并迅速成为晚期GIST患者的首选治疗方式，大大改善了晚期GIST患者的预后。虽然IM对于GIST有疗效显著，但超过50％的晚期患者在口服IM治疗的2年左右发生继发耐药，导致疾病的进展。为解决GIST继发耐药问题，研发出各种新型多靶点TKI，包括了二线用药舒尼替尼(Sunitinib)及三线用药瑞戈非尼(Regorafenib)，但仅能延长患者无进展生存率(Progression
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free Survival，PFS)约4
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5月。最新的四线用药瑞派替尼(Ripretinib)虽然能延长PFS至6.3个月，但伴随着较多不良反应，包括脱发、乏力、恶心、腹痛等，这些相对严重的不良反应也限制其疗效。因此，寻找新型治疗GIST的手段迫在眉睫。
[0003]细胞周期是细胞增殖的基本过程，其调控细胞从静止期转向细胞分裂增殖期，而细胞周期失控是恶性肿瘤发生进展的重要原因之一。周期蛋白依赖性激酶(cyclin
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dependent kinases,CDK)属于丝氨酸/苏氨酸激酶家族成员之一，为细胞周期调控机制中的核心分子。目前有多项研究表明在多种恶性肿瘤中CDK7表达显著增高，且其与肿瘤恶性分期和不良预后显著相关，如乳腺癌、胰腺癌、膀胱癌等。研究表明CDK7调控多种恶性肿瘤的原癌基因的转录表达。THZ1为人工合成的CDK7抑制剂，其特异性抑制CDK7的激酶活性。同样，在多项不同肿瘤研究发现，THZ1可显著抑制肿瘤细胞活性，并抑制相关致病基因的表达，但是在胃肠间质瘤中尚未见报道。

技术实现思路

[0004]本专利技术要解决的技术问题之一是如何获得一种有效治疗胃肠间质瘤的技术方案的技术问题。
[0005]为达到解决上述问题的目的，本专利技术所采取的技术方案是提供一种CDK7抑制剂联合伊马替尼在制备治疗胃肠间质瘤药物中的应用。
[0006]优选地，所述CDK7抑制剂为THZ1。
[0007]优选地，所述CDK7抑制剂联合伊马替尼用于抑制胃肠间质瘤细胞的增殖，并诱导其凋亡。
[0008]优选地，所述胃肠间质瘤细胞为GIST
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T1和GIST
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882细胞。
[0009]优选地，所述制备治疗胃肠间质瘤药物的剂型包括片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液、针剂或缓释剂。
[0010]相比现有技术，本专利技术具有如下有益效果：
[0011]本专利技术提供了一种CDK7抑制剂THZ1与伊马替尼联合在制备治疗胃肠间质瘤药物中的应用；THZ1联合伊马替尼治疗是治疗胃肠间质瘤的更有效方法。
附图说明
[0012]图1为不同浓度梯度的THZ1和伊马替尼联合处理胃肠间质瘤细胞T1和882的细胞增殖活性热图；
[0013]图2为THZ1和伊马替尼联合应用显著抑制细胞增殖活性图；
[0014]图3为应用CompuSyn软件定量计算药物组合指数(combination index，CI)，评估THZ1和伊马替尼对胃肠间质瘤细胞的作用效应。
[0015]图4为THZ1和伊马替尼联用可显著促进细胞凋亡图；
[0016]图5为THZ1与伊马替尼处理后Western blot实验结果图；
[0017]图6为THZ1与伊马替尼联合用药显著抑制裸鼠GIST肿瘤的生长结果图；
[0018]图7为各治疗组间小鼠体重变化图；
具体实施方式
[0019]为使本专利技术更明显易懂，兹以优选实施例作详细说明如下：
[0020]本专利技术提供了一种CDK7抑制剂联合伊马替尼在制备治疗胃肠间质瘤药物中的应用。
[0021]应用中，CDK7抑制剂为THZ1。
[0022]应用中，CDK7抑制剂联合伊马替尼用于抑制胃肠间质瘤细胞的增殖，并诱导其凋亡。
[0023]应用中的胃肠间质瘤细胞为GIST
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T1和GIST
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882细胞。
[0024]应用中制备治疗胃肠间质瘤药物的剂型包括片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液、针剂或缓释剂等。
[0025]实施例
[0026]1.THZ1和伊马替尼联合处理胃肠间质瘤细胞，绘制增殖热图；
[0027]将处于对数生长期的GIST
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T1和GIST
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882细胞消化离心重悬后，使用细胞计数仪计数，按每孔5000个细胞加入96孔板中，补充培养基至100ul，放置于恒温培养箱中过夜。对照组为含0.01％浓度DMSO的培养基。THZ1用DMSO溶解，将伊马替尼用PBS溶解，按0.01，0.02，0.05，0.1umol/L的各种不同浓度组合配置成工作液。吸去旧培养基，按浓度梯度，每
孔加入150ul等量工作液或对照培养基。置于恒温培养箱中培养72h。吸去旧培养基，每孔中分别加入培养基及CCK
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8试剂(Cell Counting Kit
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8细胞计数试剂)100ul和10ul。避光置于恒温培养箱中避光孵育2小时。于450nm波长下检测吸光度。按细胞活性＝(n浓度下吸光度
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空白孔吸光度)/(对照DM本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种CDK7抑制剂联合伊马替尼在制备治疗胃肠间质瘤药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述CDK7抑制剂为THZ1。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述CDK7抑制剂联合伊马替尼用于抑制胃肠间质瘤细胞的增殖，并诱导其凋亡。4.根据权利要求1所述的应...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈坤堂，孙建益，高晓东，张强，
申请(专利权)人：复旦大学附属中山医院，
类型：发明
国别省市：