【技术实现步骤摘要】
改造的小鹅瘟病毒Cap蛋白及其制备方法和应用
[0001]本专利技术涉及生物工程
，具体涉及一种改造的小鹅瘟病毒Cap蛋白及其制备方法和应用。
技术介绍
[0002]小鹅瘟是由小鹅瘟病毒引起的雏鹅急性败血性传染病。病雏鹅的临诊特点是精神委顿，食欲废绝，严重下痢，有时出现神经症状，死亡率高。因此，小鹅瘟病毒作为一种重要的病原微生物，对我国养鹅业造成巨大危害，亟需开发安全、有效的疫苗、卵黄抗体等预防、治疗制剂。
[0003]疫苗、卵黄抗体等生物制剂的产业化开发，需要有合适的免疫原，以及建立其快速、 用新鲜制备的鹅血PBMC细胞成功实现了小鹅瘟病毒的体外分离，病毒滴度达8
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107.0拷贝/ml。小鹅瘟病毒分离、培养技术的不成熟严重限制了其生物制剂的开发进度。
[0004]小鹅瘟病毒ORFC1基因编码的衣壳蛋白(Cap蛋白)，是病毒唯一的结构蛋白，具有良好的免疫原性 ，常作为基因工程疫苗开发的靶蛋白利用杆状病毒表达系统实现了小鹅瘟病毒Cap蛋白的表达，且表达的蛋白可形成病毒样颗粒，显示了良好...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种改造的小鹅瘟病毒Cap蛋白，其特征在于，包括编码蛋白，所述编码蛋白的核苷酸序列为SEQ No.2。2.一种如权利要求1所述改造的小鹅瘟病毒Cap蛋白的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、将小鹅瘟病毒 Cap蛋白N 端富含精氨酸的21
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36位肽段用可促进细胞免疫的一种T细胞表位肽段替换，得到改造的小鹅瘟病毒Cap蛋白，同时在小鹅瘟病毒 Cap蛋白的C端增加6个组氨酸，改造的小鹅瘟病毒Cap蛋白的氨基酸序列为SEQ No.1；步骤2、利用在线生物软件DNAWorks，将步骤1中改造的小鹅瘟病毒Cap蛋白进行密码子优化，并获得的核苷酸序列为SEQ No.2的改造的小鹅瘟病毒Cap蛋白；步骤3、将步骤2中的核苷酸序列SEQ No.2通过全基因合成、载体构建、HEK293细胞悬浮培养、镍柱纯化方法制备，得到病毒样颗粒的改造的小鹅瘟病毒Cap蛋白。3.根据权利要求2所述的所述改造的小鹅瘟病毒Cap蛋白的制备方法，其特征在于，所述步骤3包括以下步骤：步骤3.1、将步骤2中的小鹅瘟病毒Cap蛋白核苷酸序列SEQ No.2的两端分别加上 Nco I和Hind III酶切位点后进行全基因合成；步骤3.2、将步骤3.1...
【专利技术属性】
技术研发人员：王善普，张丽明，耿玉静，张斐洋，
申请(专利权)人：洛阳沃普森生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：
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