葛花提取物在制备防治炎症性肠病药物方面的应用制造技术

本发明专利技术公开了葛花提取物在制备防治和缓解炎症性肠病及保护肠道屏障及稳定肠道形态药物方面的应用，提供一种可靠的抗炎剂来帮助维持肠道环境的平衡，对治疗炎症性肠病疗效好、价格低廉且无明显副作用。本发明专利技术发现并验证了葛花提取物对于炎症性肠病的疗效显著且价格低廉副作用低，可通过改善机体健康水平，降低肠道通透性，延长肠道长度等几方面宏观改善肠道炎症状态。葛花提取物可通过负调控结肠炎发病机制的重要因素—JAK

Application of Pueraria lobata extract in the preparation of drugs for the prevention and treatment of inflammatory bowel disease

【技术实现步骤摘要】
葛花提取物在制备防治炎症性肠病药物方面的应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及葛花提取物在制备防治炎症性肠病药物方面的应用。

技术介绍

[0002]炎症性肠病（IBD）是一组病因不明、影响胃肠道的免疫性疾病的总称。IBD患者有许多胃肠道疾病的特征性症状，如不适、腹泻、血便等，多数患者还伴有肠外并发症，如关节炎、皮炎、视力下降等。目前，还没有治疗IBD的特效药，几乎所有的药物都只能缓解症状。由于复发率高，治疗费用高，不仅严重影响患者的生活质量，而且增加了患者的精神和经济负担。因此，寻找安全有效的药物具有重要的理论和实践意义。在所有的动物中，肠道上皮形成了一个物理屏障，可以选择性地吸收营养物质，防止病原体入侵和免疫反应。然而，在炎症状态下，会发生组织损伤，机体必须通过提高增殖和分化的速度来促进组织修复。其中，JAK
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STAT和Nrf2
‑
Keap1信号通路已被证明通过促进肠道干细胞的分裂和分化参与了IBD的先天和适应性免疫反应过程。一些有毒化合物，如十二烷基硫酸钠（Sodium dodecyl sulfate，SDS）、过氧化氢（H2O2）和氯化钠（NaCl），通过诱导应激反应影响肠道平衡，可引起上皮细胞损伤和凋亡。然而，肠道上皮细胞的过度更新会对机体造成不可修复的损伤，甚至加速死亡。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的之一是提供葛花提取物（Flowers Puerariae extract，FPE）在制备防治炎症性肠病药物方面的应用，提供一种可靠的抗炎剂来帮助维持肠道环境的平衡，对治疗炎症性肠病疗效好、价格低廉且无明显副作用。
[0004]上述目的所针对的炎症性肠病包括肠道炎症状态引起的肠道形态改变、肠粘膜通透性改变和/或肠道长度受损。
[0005]上述的肠道炎症状态包括溃疡性结肠炎和/或克罗恩病。
[0006]本专利技术的目的之二是提供葛花提取物在制备缓解炎症性肠病药物方面的应用。
[0007]上述目的所针对的缓解炎症性肠病为：缓解由外源性促炎因子导致的前体细胞过度增殖分化。
[0008]上述的缓解由外源性促炎因子导致的前体细胞过度增殖分化为：通过负调控JAK
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STAT信号通路缓解炎症性肠病。
[0009]本专利技术的目的之三是提供葛花提取物在制备保护肠道屏障及稳定肠道形态药物方面的应用。
[0010]为了证实上述目的，本专利技术采用动物实验进行阐明：1、以模式生物果蝇为研究对象，经促炎物质SDS处理后造炎症性肠病模型，观察其生存率、肠道通透性、肠道长度等是否发生改变，证明葛花对炎症性肠病的治疗作用。
[0011]2、在日常标准饮食中加入葛花提取物对果蝇的摄食量、体重及发育都无明显影
响，证明葛花提取物的使用安全性。
[0012]3、利用绿色荧光报告蛋白靶向标记JAK
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STAT信号通路上关键基因构建的转基因果蝇，结合分子水平验证证明葛花保护上皮细胞损伤的分子机制，是通过调控上述信号通路实现的。
[0013]本专利技术相较于现有技术的有益效果为：本专利技术中葛花提取物的原植物葛花，是一种多年生的豆科草本植物，广泛分布在中国、韩国、日本和印度的温带地区。在传统的中医理论和临床实践中，它们被发现具有广泛的生物和药理活性，包括抗炎、抗氧化、治疗酒精中毒和其他疾病。现代药理研究发现，葛花积累了丰富的黄酮类化合物，包括葛根素、大豆苷、大豆苷元等，具有潜在治疗炎症性肠病的药理作用。
[0014]本专利技术发现并验证了葛花提取物具有治疗炎症性肠病的新功效，可通过帮助抵抗促炎症试剂造成的感染提高炎症状态下果蝇的生存率，改善肠道的屏障功能和形态，负调控JAK
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STAT信号通路维持肠道环境的平衡。该提取物对于炎症性肠病的疗效显著且价格低廉副作用低，可通过改善机体健康水平，降低肠道通透性，延长肠道长度等几方面宏观改善肠道炎症状态。葛花提取物可通过负调控结肠炎发病机制的重要因素—JAK
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STAT信号通路，缓解由外源性促炎因子导致的前体细胞过度增殖分化，维持肠道细胞稳态，达到治疗炎症性肠病的作用。
附图说明
[0015]图1为标准品和葛花提取物LC
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MS离子流色谱图：其中，A图为标准品离子流色谱图，B图为葛花提取物离子流色谱图；图2为喂食葛花提取物后炎症状态下果蝇的生存率和生存期影响：其中，A图为各实验组中雌性果蝇暴露于SDS5天内的存活情况，B图为各实验组中雌性果蝇的中位数生存率，C图为为各实验组中雄性果蝇暴露于SDS5天内的存活情况，D图为为各实验组中雄性果蝇的中位数生存率；图3为日常摄入葛花提取物的安全性评价：其中，A图为喂食食用蓝色染料后果蝇腹部出现蓝染的情况，按相应打分判断果蝇的食物摄入量，A0图为果蝇未观察到含染料的食物，计分为0分，A1图为果蝇摄食含染料的食物后腹部带有淡淡的蓝色染料或蓝色染料占腹部体积不到三分之一，计分为1分，A2图为果蝇摄食后腹部蓝染大约占腹部的一半，计分为2分，A3图果蝇摄食后腹部蓝染超过腹部的一半，计分为3分，计分越高表明摄食量越多；B图为日常喂食不同浓度葛花提取物后，检测葛花提取物是否影响果蝇的摄食量，C图喂食不同浓度葛花提取物后果蝇的体重变化；D图为喂食不同浓度葛花提取物后果蝇幼虫成功孵化为蛹的孵化率；E图为喂食不同浓度葛花提取物后果蝇幼虫发育为蛹的周期变化；F图为喂食不同浓度葛花提取物后果蝇幼虫半数发育为蛹的时间变化；图4为葛花提取物缓解炎症状态下肠道通透性受损及形态改变：其中，A图的左图为对照组，右图为出现“蓝精灵”现象果蝇的模型组，表明肠道通透性受损；
B图为对照组、模型组和喂食浓度为5mg/ml葛花提取物后果蝇“蓝精灵”的出现率；C图为对照组、模型组和喂食浓度为5mg/ml葛花提取物后果蝇肠道长度对比；D图的上图为对照组肠道情况，下图为模型组肠道情况；E图为对照组、模型组和喂食浓度为5mg/ml葛花提取物后果蝇肠道出现黑色素瘤样物质的百分比；图5为葛花提取物对SDS诱导的干细胞增殖分化的影响：其中，A图为实验所用的果蝇中肠的位置示意图；B
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B
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图为对照组果蝇肠道干细胞的数量和形态，其中B
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和B
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为B的局部放大图，B
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仅示出GFP阳性细胞；C
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C
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图为应激后模型组果蝇肠道干细胞的数量和形态，其中C
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和C
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为C的局部放大图，C
’
仅示出GFP阳性细胞；D
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D
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图为应激后喂食浓度为5mg/ml葛花提取物组果蝇肠道干细胞的数量和形态，其中D
’
和D
’’
为D的局部放大图，D
’
仅示出GFP阳性细胞；E
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E
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图为对照组果蝇肠道本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.葛花提取物在制备防治炎症性肠病药物方面的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述炎症性肠病包括肠道炎症状态引起的肠道形态改变、肠粘膜通透性改变和/或肠道长度受损。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于：所述肠道炎症状态包括溃疡性结肠炎和/或克罗恩病。4.葛花提取物在制备缓解炎症性肠病药物方面的应用。5.如权利要求4所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：和建政，修明慧，刘永琦，杨世培，李旭，
申请(专利权)人：甘肃中医药大学，
类型：发明
国别省市：