抗VISTA抗体和片段制造技术

本发明专利技术涉及抗VISTA抗体和片段，这些抗体和片段与T细胞活化的V结构域Ig抑制剂(VISTA)结合，并涉及检测VISTA的方法。并涉及检测VISTA的方法。并涉及检测VISTA的方法。

Anti Vista antibodies and fragments

【技术实现步骤摘要】
抗VISTA抗体和片段
[0001]本申请是分案申请，其原申请的国际申请号是PCT/IB2016/000886，国际申请日是2016年06月23日，中国国家申请号为201680048121.0，进入中国的日期为2018年02月13日，专利技术名称为“抗VISTA抗体和片段”。


[0002]本专利技术涉及抗VISTA抗体和片段，这些抗体和片段与T细胞活化的V结构域Ig抑制剂(VISTA)结合，并涉及检测VISTA的方法。
[0003]相关申请的交叉引用
[0004]本申请要求于2015年6月24日提交的美国临时申请号62/184,108，以及于2015年7月1日提交的美国临时申请号62/187,659的权益。上述申请的全部教示内容通过引用结合在此。
[0005]ASCII文本文件中的材料通过引用结合在此。
[0006]本申请将包含在以下ASCII文本文件中的序列表通过引用结合，该序列表在此同时提交：
[0007]a)文件名：01481142017SEQUENCELISTING.txt；2016年6月22日产生，87KB大小。

技术介绍

[0008]癌细胞或免疫细胞在肿瘤微环境中的负性免疫检查点调节物的表达可抑制宿主对肿瘤的免疫应答。为了有效对抗癌症，需要阻断肿瘤介导的宿主免疫应答抑制。因此，需要对肿瘤微环境中阻抑抗肿瘤免疫应答的负性免疫检查点调节剂进行抑制的新的有效治疗剂。

技术实现思路

[0009]在一个实施例中，本专利技术提供包含与哺乳动物T细胞活化蛋白质的V结构域Ig抑制剂(VISTA)结合的抗原结合区域的分离的抗体(例如，嵌合抗体)、或其抗原结合片段。该抗体包含抗体VH结构域，该抗体VH结构域包含具有SEQ ID NO:31的氨基酸序列的VH CDR1、具有SEQ ID NO:32的氨基酸序列的VH CDR2、和具有SEQ ID NO:33的氨基酸序列的VH CDR3。该抗体进一步包含抗体VL结构域，该抗体VL结构域包含具有SEQ ID NO:34的氨基酸序列的VL CDR1、具有SEQ ID NO:35的氨基酸序列的VL CDR2、和具有SEQ ID NO:36的氨基酸序列的VL CDR3。此外，该抗体包含非人类抗体重链恒定区和非人类抗体轻链恒定区。
[0010]在一个实施例中，抗体VH结构域包含SEQ ID NO:64。在另一个实施例中，抗体VL结构域包含SEQ ID NO:45。
[0011]在一些实施例中，该抗体包含作为鼠抗体重链恒定区的非人类抗体重链恒定区。在特定的实施例中，该鼠抗体重链恒定区是鼠IgG1重链恒定区。在具体的实施例中，该鼠IgG1重链恒定区包含SEQ ID NO:76中的重链恒定区。在另一个实施例中，该鼠抗体重链恒定区是鼠IgG2a重链恒定区。
[0012]在其他实施例中，该抗体包含作为鼠抗体轻链恒定区的非人类抗体轻链恒定区。在特定的实施例中，该鼠抗体轻链恒定区是鼠IgG1轻链恒定区。在具体的实施例中，该鼠IgG1轻链恒定区包含SEQ ID NO:77中的轻链恒定区。在另一个实施例中，该鼠抗体轻链恒定区是鼠IgG2a轻链恒定区。
[0013]在某些实施例中，该抗体或抗原结合片段与人类VISTA蛋白质结合。在特定的实施例中，该抗体或抗原结合片段与存在于具有以下显示的氨基酸序列的人类VISTA蛋白质中的表位结合：
[0014]MGVPTALEAGSWRWGSLLFALFLAASLGPVAAFKVATPYSLYVCPEGQNVTLTCRLLGPVDKGHDVTFYKTWYRSSRGEVQTCSERRPIRNLTFQDLHLHHGGHQAANTSHDLAQRHGLESASDHHGNFSITMRNLTLLDSGLYCCLVVEIRHHHSEHRVHGAMELQVQTGKDAPSNCVVYPSSSQESENITAAALATGACIVGILCLPLILLLVYKQRQAASNRRAQELVRMDSNIQGIENPGFEASPPAQGIPEAKVRHPLSYVAQRQPSESGRHLLSEPSTPLSPPGPGDVF(SEQ ID NO:46)。
[0015]在一个实施例中，该抗体或抗原结合片段是完整抗体。
[0016]在另一个实施例中，本专利技术提供包含抗体重链(包含SEQ ID NO:77)和抗体轻链(包含SEQ ID NO:68)的分离的抗体、或其抗原结合片段。
[0017]在还另一个实施例中，本专利技术提供包含本专利技术的抗体或抗原结合片段的组合物。
[0018]在另外的实施例中，本专利技术提供用于检测样品中哺乳动物VISTA蛋白质的方法。该方法包括在本专利技术的抗体或抗原结合片段与样品中的VISTA蛋白质结合的条件下，使样品与该抗体或抗原结合片段接触，并且检测与样品中的VISTA蛋白质结合的抗体或抗原结合片段。
[0019]在一个实施例中，该样品包含细胞。这些细胞除了其他之外可以包括免疫细胞(例如，髓样细胞)、基质细胞(例如，成纤维细胞、内皮细胞)、和/或癌症(例如，恶性的)细胞，如肺癌细胞、前列腺癌细胞、急性髓性白血病(AML)细胞、黑色素瘤细胞、卵巢癌细胞或结肠癌细胞，或其任何组合。在特定的实施例中，该样品包含组织或生物学流体。
[0020]在一个实施例中，在本方法中使用的该抗体或抗原结合片段包含可检测标记。
[0021]在某些实施例中，该方法包括免疫组织化学(IHC)染色测定。在另一个实施例中，该方法包括流式细胞术测定。
[0022]本专利技术提供用于检测生物学材料中的一种或多种VISTA蛋白质的改进的试剂和方法。此类试剂和方法典型地具有增强的敏感性和/或特异性。
附图说明
[0023]图1A
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1C：图表，显示了在TF
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1AML细胞系中通过流式细胞术在VISTA蛋白质的TF1 AML细胞表达方面的VISTA表达。
[0024]图2A
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2E：图表，显示了用于鉴定人类骨髓和淋巴子集的染色和门控策略。
[0025]图3A
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3G：图表，显示了在来自一个健康正常供体的人类骨髓和淋巴子集上的VISTA表达。
[0026]图4：图表，显示了在多个健康正常供体中的人类骨髓和淋巴子集上的VISTA表达。
[0027]图5A
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5B：图表，显示了用于鉴定在人类单核细胞和巨噬细胞上的VISTA表达的染色和门控策略。
[0028]图6A
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6C：图表，显示了在人类单核细胞和巨噬细胞上的VISTA表达。
[0029]图7A
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7E：图表，显示了用于鉴定人类T细胞和NK细胞子集上的VISTA表达的染色和门控策略。
[0030]图8A
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8G：图表，显示了在来自一个健康正常供体的人类T细胞和NK细胞子集上的VISTA表达。
[0031]图9：图表，显示了多个健康正常供体中的人类T细胞和NK本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种组合物，该组合物包含(i)至少一种源自患有或疑似患有癌症的人受试者的生物样品和(ii)分离的抗体或其抗原结合片段，该分离的抗体或抗原结合片段包含抗原结合区域，该抗原结合区域与人T细胞活化的V结构域Ig抑制剂(VISTA)蛋白质结合，其中所述抗体包含：a)抗体V
H
结构域，该抗体V
H
结构域包含具有SEQ ID NO:31的氨基酸序列的V
H CDR1、具有SEQ ID NO:32的氨基酸序列的V
H CDR2和具有SEQ IDNO:33的氨基酸序列的V
H CDR3；b)抗体V
L
结构域，该抗体V
L
结构域包含具有SEQ ID NO:34的氨基酸序列的V
L CDR1、具有SEQ ID NO:35的氨基酸序列的V
L CDR2和具有SEQ IDNO:36的氨基酸序列的V
L CDR3；c)非人抗体重链恒定区；和d)非人抗体轻链恒定区。2.如权利要求1所述的组合物，其中，所述抗体或抗原结合片段包含以下中的至少一种：(i)包含SEQ ID NO:64的抗体V
H
结构域；(ii)包含SEQ ID NO:45的抗体V
L
结构域；(iii)包含鼠抗体重链恒定区的非人抗体重链恒定区；(iv)包含鼠IgG1重链恒定区的非人抗体重链恒定区；(v)包含SEQ ID NO:76中的鼠IgG1重链恒定区的非人抗体重链恒定区；(vi)包含鼠IgG2a重链恒定区的非人抗体重链恒定区；(vii)非人抗体轻链恒定区，该非人抗体轻链恒定区是鼠抗体轻链恒定区；(viii)非人抗体轻链恒定区，该非人抗体轻链恒定区是鼠IgG1轻链恒定区；(ix)包含SEQ ID NO:77中的鼠IgG1轻链恒定区的非人抗体轻链恒定区；或(x)包含鼠IgG2a轻链恒定区的非人抗体轻链恒定区。3.如权利要求1或2所述的组合物，其中，所述抗体或抗原结合片段与SEQ ID NO:46中的表位结合，并且所述抗体包括完整抗体或抗体...

【专利技术属性】
技术研发人员：L，
申请(专利权)人：詹森药业有限公司，
类型：发明
国别省市：