基于微孔恒温反应检测肠道RNA病毒核酸的引物组、试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术涉及基于微孔恒温反应检测肠道RNA病毒核酸的引物组、试剂盒及其应用，其中包括包埋在不同微孔里的特异性引物组、包含Bst酶和逆转录酶的反应混合液。可以同时检测诺如病毒GⅠ/GⅡ、甲型肝炎病毒、CA16、EV71这4种肠道RNA病毒核酸。本发明专利技术使用改进的每种靶标仅需要2

Primer set, kit and its application for detecting intestinal RNA virus nucleic acid based on microporous thermostatic reaction

【技术实现步骤摘要】
基于微孔恒温反应检测肠道RNA病毒核酸的引物组、试剂盒及其应用


[0001]本专利技术属于分子生物
，尤其是涉及一种基于微孔恒温反应检测肠道 RNA病毒核酸的引物组、试剂盒及其应用。

技术介绍

[0002]诺如病毒(Norovirus，NV)属于杯状病毒科诺如病毒属，无包膜单股正链的 RNA病毒。感染人的诺如病毒包括GⅠ、GⅡ、GⅣ、G
Ⅷ
及G
Ⅸ
，而最为常见的为GⅠ和GⅡ。诺如病毒是导致儿童急性病毒性腹泻的第2位病原，尚无有效的疫苗。而诺如病毒具有高变异性，对诺如病毒的检测和监测有助于诺如病毒感染的预防和控制。
[0003]甲型肝炎病毒(Hepatitis A virus，HAV)属于小核糖核酸科肝病毒属，基因组由一个7.5千碱基的无包膜单股正链RNA分子组成。甲型肝炎病毒的传播途径为粪口传播，主要通过摄入受污染的食物或水，或直接在人与人之间传播。与甲型肝炎病毒相关的食物包括牡蛎和蛤蜊、草莓等。对食品、环境、粪便等样品中的HAV 检测有助于HAV的预防和控制。
[0004]手足口病是肠本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.用于检测肠道RNA病毒核酸的引物组，其特征在于，选自用于检测诺如病毒GⅠ、诺如病毒GⅡ、甲型肝炎病毒、CA16或EV71的引物组中的一组或几组；其中，用于检测诺如病毒GⅠ的引物组包括检测引物Ft
‑Ⅰ
和Bt
‑Ⅰ
，Ft
‑Ⅰ
的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，Bt
‑Ⅰ
的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；用于检测诺如病毒GⅡ的引物组包括检测引物Ft
‑Ⅱ
和Bt
‑Ⅱ
，Ft
‑Ⅱ
的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，Bt
‑Ⅱ
的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；用于检测甲型肝炎病毒的引物组包括检测引物Ft
‑
h和Bt
‑
h，Ft
‑
h的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示，Bt
‑
h的核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示；用于检测CA16的引物组包括检测引物Ft
‑
c和Bt
‑
c，Ft
‑
c的核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示，Bt
‑
c的核苷酸序列如SEQ ID NO.14所示；用于检测EV71的引物组包括检测引物Ft
‑
e和Bt
‑
e，Ft
‑
e的核苷酸序列如SEQ ID NO.17所示，Bt
‑
e的核苷酸序列如SEQ ID NO.18所示。2.根据权利要求1所述用于检测肠道RNA病毒核酸的引物组，其特征在于，用于检测肠道RNA病毒核酸的引物组，除了包括用于检测诺如病毒GΙ、诺如病毒GΠ、甲型肝炎病毒、CA16或EV71的引物组中的一组或几组作为基本检测引物以外，还包括加速引物，用于检测诺如病毒GⅠ的引物组还包括加速引物为IF
‑Ⅰ
和IB
‑Ⅰ
，IF
‑Ⅰ
的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，IB
‑Ⅰ
的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；用于检测诺如病毒GⅡ的引物组还包括加速引物为IF
‑Ⅱ
和IB
‑Ⅱ
，IF
‑Ⅱ
的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示，IB
‑Ⅱ
的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示；用于检测甲型肝炎病毒的引物组还包括加速引物为IF
‑
h和IB
‑
h，IF
‑
h的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示，IB
‑
h的核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示；用于检测CA16的引物组还包括加速引物为IF
‑
c和IB
‑
c，IF
‑
c的核苷酸序列如SEQ ID NO.15所示，IB
‑
c的核苷酸序列如SEQ ID NO.16所示；用于检测EV71的引物组还包括加速引物为IF
‑
e和IB
‑
e，IF
‑
e的核苷酸序列如SEQ ID NO.19所示，IB
‑
e的核苷酸序列如SEQ ID NO.20所示。3.用于检测肠道RNA病毒核酸的的试剂盒，其特征在于，包括有检测诺如病毒GⅠ、诺如病毒GⅡ、甲型肝炎病毒、CA16或EV71的引物组中的一组或几组；其中，用于检测诺如病毒GΙ的引物组包括检测引物Ft
‑Ⅰ
和Bt
‑Ⅰ
，Ft
‑Ⅰ
的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，Bt
‑Ⅰ
的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；用于检测诺如病毒GⅡ的引物组包括检测引物Ft
‑Ⅱ
和Bt
‑Ⅱ
，Ft
‑Ⅱ
的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，Bt
‑Ⅱ
的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；用于检测甲型肝炎病毒的引物组包括检测引物Ft
‑
h和Bt
‑
h，Ft
‑
h的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示，Bt
‑
h的核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示；用于检测CA16的引物组包括检测引物Ft
‑
c和Bt
‑
c，Ft
‑
c的核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示，Bt
‑
c的核苷酸序列如SEQ ID NO.14所示；用于检测EV71的引物组包括检测引物Ft
‑
e和Bt
‑
e，Ft
‑
e的核苷酸序列如SEQ ID NO.17所示，Bt
‑
e的核苷酸序列如SEQ ID NO.18所示。4.根据权利要求3所述用于检测肠道RNA病毒核酸的的试剂盒，其特征在于，除了包括有检测诺如病毒GⅠ、诺如病毒GⅡ、甲型肝炎病毒、CA16或EV71的引物组中的一组或几组以
外，还包括有检测诺如病毒GⅠ、诺如病毒GⅡ、甲型肝炎病毒、CA16或EV71的加速引物；用于检测诺如病毒GΙ的引物组还包括加速引物为IF
‑Ⅰ
和IB
‑Ⅰ
，IF
‑Ⅰ
的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，IB
‑Ⅰ
的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；用于检测诺如病毒GΠ的引物组还包括加速引物为IF
‑Ⅱ
和IB
‑Ⅱ
，IF
‑Ⅱ
的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示，IB
‑Ⅱ
的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示；用于检测甲型肝炎病毒的引物组还包括加速引物为IF
‑
h和IB
...

【专利技术属性】
技术研发人员：周素娟，梁欣悦，张志一，
申请(专利权)人：复旦大学，
类型：发明
国别省市：