黑风藤中异喹啉生物碱埋罕碱甲的分离方法及抗阿尔茨海默病药物的应用技术

本发明专利技术公开了埋罕碱甲及分离方法及应用，埋罕碱甲是具有式(I)的结构：本发明专利技术的埋罕碱甲为新化合物，能有效地抑制乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶活性，抗氧化作用明显，提示本发明专利技术化合物可作为抗阿尔茨海默病的药物。化合物可作为抗阿尔茨海默病的药物。

【技术实现步骤摘要】
黑风藤中异喹啉生物碱埋罕碱甲的分离方法及抗阿尔茨海默病药物的应用


[0001]本专利技术涉及制药行业中中药提取制备领域，特别是黑风藤中一种异喹啉生物碱的分离方法及作为治疗阿尔兹海默病药物的应用。

技术介绍

[0002]傣医药是我国四大民族医药(藏、蒙、维、傣)之一，具有2000多年的悠久历史，是傣族人民长期在与疾病的斗争中，不断认识、积累、总结出来的，具有鲜明的地方和民族特色的传统医学。它以“四塔”、“五蕴”理论为核心，具有完整的理论体系。在疾病类型方面，傣药大多治疗胃肠道疾病，其次是上呼吸道感染、创伤和风湿性疾病、泌尿系统感染、妇科疾病、肝病、产褥期发热和中毒引起疾病。多年来傣医药为傣族人民和云南边疆各族人民的防病治病、繁衍生息作出了巨大贡献。
[0003]傣药资源中绝大多数是野生品种，傣药资源物种在分布上与热带、亚热带的植被分布特点相对应，存在明显的地域性，傣药品种约有70％～80％产自云南南部和西部，集中分布在西双版纳、德宏2个自治州及一些自治县。这些地区地质古老，多属于热带、亚热带气候，雨量充沛、高温、湿润，造就了独特的生物多样性，形成了丰富的傣药资源。傣药材品种众多，有228科，372属，1300多品种，其中珍稀濒危物种有300多种，临床常用1000余种，有“天然药物宝库”和“傣药王国”美誉。从植物生命形式的角度来看，它们是主要的草本或灌木植物。当用作药用部分时，植物的根和根茎占最大比例，其次是整株植物和叶子。在科属结构上，种类大于20个物种的科有豆科、菊科、大戟科、百合科、姜科、茜草科、夹竹桃科等。傣药材资源属于量少类多这一类型，随着资源不断的减少，傣药面临着规范化种植和傣药的二次开发等迫切问题。
[0004]阿尔茨海默症(Alzheimer
’
s Disease，AD)是一种神经退行性疾病，多发于60岁以上的老年人群，是一种高发疾病，但至今未能确定有关AD的发病机制。目前AD的发病机制主要有以下几种假说：胆碱能假说、tau蛋白过度磷酸化、Aβ淀粉样沉积、氧化应激反应等。胆碱能通路受损是公认的AD发病机制之一，由于乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase，AChE)广泛分布于人脑中的神经组织，它可以降解突触间隙的神经递质乙酰胆碱，因而通过抑制AChE活性，可维持乙酰胆碱在突触间隙的正常水平，使胆碱能神经信号传递正常，恢复AD患者的认知障碍。迄今AChE抑制药是临床主要使用的抗AD药物，这包括选择性AChE抑制剂多奈哌齐、加兰他敏和石杉碱甲。在寻找多靶向抗AD的药物中，多位学者对AChE的同工酶
‑
丁酰胆碱酯酶(butyrylcholinesterase，BChE)进行了研究。结果显示：BChE在大脑中有分布且也降解神经传递基质乙酰胆碱；当AChE生成不足或者活性被抑制的时候，BChE的活性就可以对之进行补偿。事实上，在AD患者大脑中，随着疾病的发展，AChE活性在大脑皮层和海马区可比正常值降低45％，而BChE活性增加约一倍，且有持续增高的趋势，这是AD患者对AChE抑制剂产生耐药性的主要原因。
[0005]另外氧化应激反应在AD发病机制中也起着重要作用，被认为是衰老和各种神经疾
病的调节元件。分子氧对细胞的正常功能和所有生物体的生命来说都是必不可少的。尽管氧对生命至关重要，并参与信号转导、基因转录和其他细胞活动，但同时，它也会以自由基和活性氧(ROS)的形式存在于生物分子中。另一个最重要的物质是一氧化氮(NO)，它具有调节血管平滑肌细胞、血小板聚集、血栓形成、血管张力和血流动力学等调节功能。但一氧化氮(NO)的自由形式对生物分子是有害的，称之为活性氮(RNS)。氧化应激的主要特点就是ROS与RNS的含量显著升高。高浓度的ROS会对DNA、脂质和蛋白质等细胞大分子造成损伤，最终导致细胞坏死和凋亡。研究表明，AD早期时β淀粉样蛋白(Aβ)进入线粒体增加自由基的生成，可诱发氧化应激，引发级联反应，最终导致神经元死亡。证据显示AD患者大脑中的ROS和RNS都有不同程度的升高，还观察到脑内抗氧化物质水平的降低，而抗氧化剂能够抵消氧化应激的影响，降低相关疾病的风险。因此，寻找天然抗氧化剂有效地抵抗自由基诱导的机体损伤，为治疗和预防由氧化应激引起的AD等疾病开辟新的道路，将具有重要的现实和社会意义。
[0006]黑风藤(Fissisfigma polyanthum)是一种傣族常用药，傣药名“埋罕”，是番荔枝科(Annonaceae)瓜馥木属(Fissistigma)的藤本植物，多分布于我国广东、广西、云南、贵州和西藏等地，常生于山谷和路旁林下，根黑色，撕裂有强烈香气。黑风藤具有很高的药用价值，早在《云南思茅中草药选》中就有记载，其根和藤茎具有通经络、强筋骨、祛风湿、健脾等作用，主治跌打损伤、风湿性关节炎、小儿麻痹后遗症等，其叶可治哮喘和疮疥，具有非常广阔的应用前景。近年来，国内外学者对瓜馥木属植物的化学成分进行了大量的研究工作，发现瓜馥木属植物中多含有异喹啉生物碱、黄酮、有机酸等类型化合物，而异喹啉生物碱以阿朴菲类生物碱为主。但目前只从黑风藤中分离得到了九个化合物，即黑风藤苷、3，4，5
‑
三甲氧基苯酚
‑1‑
O
‑
β
‑
D
‑
葡萄糖苷、丁香酸葡萄糖苷、肌醇、β
‑
谷甾醇、胡萝卜苷、romucosine、红果山胡椒查耳酮、teutenone A，其中只有romucosine为生物碱类成分(廖永红，等.黑风藤的化学成分.药学学报，1999，34：207
‑
209.；杨涓.川白芷和黑风藤的化学成分研究.四川大学硕士论文，2002.；Fan，H.，et al.Chemical constituents with free
‑
radical
‑
scavenging activities from the stem of Fissistigma polyanthum.Pharmacognosy Magazine，2012，8：98
‑
102.)，这限制了对黑风藤药材及其制剂的深入开发和质量控制。
[0007]一直以来，天然产物在中枢神经系统药物或先导化合物的开发过程中占据着非常重要的角色，而在抗AD药物研究方面尤为活跃。天然产物是胆碱酯酶和抗氧化剂的重要来源。从植物中寻找结构新颖、活性强的胆碱酯酶和抗氧化剂是治疗AD创新药物的研发热点之一。文献调研中发现一些异喹啉生物碱具有显著的胆碱酯酶抑制活性或(和)抗氧化活性。但瓜馥木属植物黑风藤中异喹啉类生物碱的活性迄今未见相关报道。

技术实现思路

[0008]本专利技术的目的是针对上述技术分析，提供了一种黑风藤中异喹啉类生物碱作为治疗阿尔兹海默病药物的制备及应用。该制备方法为从黑风藤中分离并鉴定出化合物埋罕碱甲，经过药理学筛选，发现埋罕碱甲能有效地抑制乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶活性，抗氧化作用明显。
[0009]本专利技术的技术方案本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.埋罕碱甲，其特征是具有式(I)的结构：2.权利要求1所述埋罕碱甲的分离方法，其特征在于包括如下步骤：(1)以黑风藤的干燥根为原料，加入原料8
‑
10质量倍的体积分数为90％的乙醇水溶液或甲醇水溶液，回流提取2
‑
3次，每次提取2
‑
3小时，依次过滤得到其提取液。然后加入原料6
‑
10质量倍的体积分数为60％的乙醇水溶液或甲醇水溶液，回流提取2
‑
3次，每次提取2
‑
3小时，依次过滤得到其提取液。合并所有提取液，减压回收溶剂，浓缩后得到总浸膏，即为黑风藤提取物；(2)将上述总浸膏合并与硅胶拌样，然后以硅胶柱进行梯度柱层析分离，具体作法是依次以体积比为1∶0的二氯甲烷
‑
甲醇混合液、体积比为20∶1的二氯甲烷
‑
甲醇混合液、体积比为10∶1的二氯甲烷
‑
甲醇混合液、体积比为5∶1的二氯甲烷
‑
甲醇混合液、体积比为2∶1...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘玉明，刘晓，蒋坤，
申请(专利权)人：天津理工大学，
类型：发明
国别省市：