【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】纯化的肠道病毒的组合物和使用谷胱甘肽亲和色谱的纯化方法
专利
[0001]本专利技术涉及纯化的肠道病毒的组合物和用于纯化肠道病毒的谷胱甘肽亲和色谱方法。
[0002]电子提交的序列表的引用
[0003]本申请的序列表经由EFS
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Web作为ASCII格式的序列表以电子方式提交，文件名为24943WOPCT
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SEQLIST
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17NOV2020.txt，创建日期为2020年11月17日，大小为17.6kb。经由EFS
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Web提交的该序列表是说明书的一部分，并且通过引用整体并入本文。
[0004]专利技术背景
[0005]小核糖核酸病毒科的肠道病毒属是小型、无包膜、单链正义RNA病毒，其含有几种人类病原体，包括脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒、埃可病毒、编号肠道病毒和鼻病毒[1]。除了充分研究的脊髓灰质炎病毒之外，已经涌现针对非脊髓灰质炎肠道病毒引起的疾病的疫苗和治疗剂的开发研究，所述非脊髓灰质炎肠道病毒例如EV
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A71(手足...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种组合物，其包含纯化的柯萨奇病毒A 21(CVA21)，所述柯萨奇病毒A 21包含VP0、VP1、VP2、VP3、VP4和CVA21 RNA，其中VP0与VP2的比率小于约0.01。2.权利要求1的组合物，其中VP0与VP2的比率为约0.0005
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0.005。3.权利要求1的组合物，其中VP0与VP2的比率为约0.001
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0.003。4.一种包含纯化的CVA21的组合物，其中基因组与感染性的比率小于约5000基因组/pfu。5.权利要求4的组合物，其中所述基因组与感染性的比率为约200
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2000基因组/pfu。6.权利要求4的组合物，其中所述基因组与感染性的比率为约200
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800基因组/pfu。7.一种包含纯化的CVA21的组合物，其中颗粒与感染性的比率小于约5000颗粒/pfu。8.权利要求7的组合物，其中所述颗粒与感染性的比率为约200
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2000颗粒/pfu。9.权利要求7的组合物，其中所述颗粒与感染性的比率为约200
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600颗粒/pfu。10.权利要求1
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9中任一项的组合物，其中总VP1+VP2+VP3+VP4峰面积/总峰面积为至少95％。11.权利要求1
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10中任一项的组合物，其中所述组合物中宿主细胞DNA的量小于约10,000pg/剂量，每个剂量具有约5E7 pfu CVA21。12.权利要求1
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10中任一项的组合物，其中所述组合物中宿主细胞DNA的量为约0.05
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10pg/剂量，每个剂量具有约5E7 pfu CVA21。13.权利要求1
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12中任一项的组合物，其中所述组合物中牛血清白蛋白的量小于约50,000pg/剂量，每个剂量具有约5E7 pfu CVA21。14.权利要求1
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12中任一项的组合物，其中所述组合物中牛血清白蛋白的量为约50
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150pg/剂量，每个剂量具有约5E7 pfu CVA21。15.权利要求1
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14中任一项的组合物，其中所述CVA21包含SEQ ID NO：1中的核苷酸序列。16.权利要求1
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15中任一项的组合物，其中所述组合物具有1E5至1E12 TCID
50
/ml或pfu/ml的效力。17.一种药物组合物，其包含权利要求1
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16中任一项的组合物和可药用赋形剂。18.权利要求17的药物组合物，其用于治疗患者的癌症，其中将所述药物组合物以每次治疗多至约3E8 TCID
50
或5E7 pfu的剂量肿瘤内施用于所述患者。19.权利要求18的药物组合物，其中所述剂量为每次治疗约3E7至约3E8 TCID
50
或约5E6至约5E7 pfu的所述药物组合物。20.权利要求17的药物组合物，其用于治疗患者的癌症，其中将所述药物组合物的剂量为每次治疗约1E9 TCID
50
或1.5E8 pfu。21.一种纯化肠道病毒的方法，所述方法包括以下步骤：(a)使用加载溶液将肠道病毒与固定相结合，其中谷胱甘肽固定在所述固定相上；(b)用洗脱溶液从所述固定相洗脱所述肠道病毒。22.权利要求21的方法，其中在步骤(a)之前，用平衡溶液平衡所述固定相。23.权利要求21或22的方法，还包括在步骤(a)之后且在步骤(b)之前用一种或多种洗涤溶液洗涤所述固定相的步骤(i)。24.权利要求23的方法，其中步骤(i)包括使用洗涤溶液的第一洗涤步骤，所述洗涤溶
液的电导率高于平衡溶液或加载溶液。25.权利要求24的方法，其中步骤(i)包括使用洗涤溶液的第二洗涤步骤，所述洗涤溶液的电导率低于第一洗涤步骤中的洗涤溶液。26.权利要求25的方法，其中洗脱溶液的电导率与所述第二洗涤步骤中的洗涤溶液相同。27.权利要求21
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26中任一...
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