检测方法技术

本发明专利技术涉及一种检测方法，其具有：将靶核酸以每1孔为1分子以下的方式导入器件的孔内的工序，所述孔阵列具有大量的孔；以靶核酸不会在大量的孔间移动的方式封闭孔的工序，在孔内放大来自靶核酸的信号的工序，以及检测从孔发出的信号的工序；靶核酸含有第一核酸、作为第一核酸的互补链的第二核酸、以及第一核酸与第二核酸互补地结合而成的双链核酸；在进行封闭的工序中，双链核酸以双链的状态封闭在孔内；在放大信号的工序中，第一特异性结合物质与第一核酸结合而发出第一信号，第二特异性结合物质与第二核酸结合而发出第二信号；第一信号与第二信号不同。号与第二信号不同。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】检测方法


[0001]本专利技术涉及检测方法。
[0002]本申请主张2019年12月9日在日本申请的日本特愿2019
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222153号的优先权，其内容援引于此。

技术介绍

[0003]通过定量地检测生物试样中的靶分子，进行疾病的早期发现和给药效果的预测。DNA、RNA等核酸的定量通过实时PCR法等进行。
[0004]近年来，出于更早期发现疾病等的目的，更高精度地检测靶分子的需求提高。作为高精度地检测靶分子的方法，例如在非专利文献1中记载了在大量微小分区内进行酶反应来检测荧光信号的技术。该方法被称为数字测量。
[0005]在数字测量中，将试样溶液分割成极大量的微小溶液。然后，将来自各微小溶液的信号2值化，仅判别是否存在靶分子来测量靶分子数。根据数字测量，与以往的实时PCR法等相比，能够显著提高检测灵敏度和定量性。
[0006]在作为数字测量的1种的数字PCR中，按照存在于微小分区内的1个微小液滴中的作为模板的核酸为0个至1个的方式将PCR反应试剂与核酸的混合物稀释。在数字PCR中，为了提高核酸扩本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种检测方法，其具有：使含有靶核酸的液体与具有孔阵列的器件接触，所述孔阵列具有大量的孔，将所述靶核酸以每1孔为1分子以下的方式导入所述孔内的工序，以所述靶核酸不会在大量的所述孔间移动的方式封闭所述孔的工序，在所述孔内放大来自所述靶核酸的信号的工序，以及检测从所述孔发出的所述信号的工序；所述靶核酸含有第一核酸、作为所述第一核酸的互补链的第二核酸、以及所述第一核酸与所述第二核酸互补地结合而成的双链核酸，在所述进行封闭的工序中，所述双链核酸以双链的状态封闭在所述孔内，在所述放大信号的工序中，第一特异性结合物质与所述第一核酸结合而发出第一信号，第二特异性结合物质与所述第二核酸结合而发出第二信号，所述第一信号与所述第二信号不同。2.根据权利要求1所述的检测方法，其中，所述第一信号和所述第二信号为发光信号，所述第一信号的波长与所述第二信号的波长不同。3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其中，所述放大信号的工序通过侵入裂解反应进行。4.根据权利要求1～3中任一项所述的检测方法，其中，在所述进行检测的工序中，对于仅检测到所述第一信号的所述孔，判定为仅存在单链状的所述第一核酸，对于仅检测到所述第二信号的所述孔，判定为仅存在单链状的所述第二核酸，对于同时检测到所述第一信号和所述第二信号的所述孔，判定为存在所述双链核酸。5.根据权利要求1～4中任一项所述的检测方法，其还具有：对在所述进行检测的工序中检...

【专利技术属性】
技术研发人员：牧野洋一，堀内阳介，
申请(专利权)人：凸版印刷株式会社，
类型：发明
国别省市：