一种非鳞状上皮细胞模拟物的制备方法技术

本发明专利技术涉及分析检测技术领域，具体涉及一种非鳞状上皮细胞模拟物的制备方法；获取动物血液制取红细胞；将所述红细胞投入含有固定剂的固定缓冲液中进行固化，得到半固化细胞，并将所述半固化细胞进行离心，得到沉淀物；将将所述沉淀物在25℃条件下使用核突显试剂预处理，得到二次沉淀物，并将所述二次沉淀物洗涤去除固定剂，得到上皮细胞模拟物，上述方法利用两栖类动物红细胞模拟非鳞状上皮细胞，优选固定剂和核突显试剂浓度处理细胞后可准确模拟非鳞状上皮细胞，明显与其他类型细胞区分开来，可以用来模拟非鳞状上皮细胞，对非鳞状上皮细胞的分析测定进行准确的质量控制。皮细胞的分析测定进行准确的质量控制。皮细胞的分析测定进行准确的质量控制。

【技术实现步骤摘要】
一种非鳞状上皮细胞模拟物的制备方法


[0001]本专利技术涉及分析检测
，尤其涉及一种非鳞状上皮细胞模拟物的制备方法。

技术介绍

[0002]在现有的尿液有形成分分析检测领域，仪器和所用试剂的质量控制是保证检测结果的准确性、可靠性的重要方式，其中，尿有形成分分析仪用质控物的质量控制尤为重要。
[0003]目前，市面上的尿液有形成分分析固定剂质控物根据其产品成分分为阴性质控物和阳性质控物的单项质控液，阳性质控物中一般宣称包含红细胞、白细胞、上皮细胞等多种有形成分。上皮细胞与人体内肾脏健康息息相关，特别的是非鳞状上皮细胞具有非常重要的临床意义。然而，非鳞状上皮细胞几乎不可见，其测试灵敏度较差，稳定性差，无法满足非鳞状上皮细胞的质量控制需求。因此，现有技术仍需改进。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种非鳞状上皮细胞模拟物的制备方法，旨在解决现有质控物中非鳞状上皮细胞测试稳定性差的问题。
[0005]为实现上述目的，本专利技术提供了一种非鳞状上皮细胞模拟物的制备方法，包括以下步骤：
[0006]获取动物血液制取红细胞；
[0007]将所述红细胞投入含有固定剂的固定缓冲液中进行固化，得到半固化细胞，并将所述半固化细胞进行离心，得到沉淀物；
[0008]将所述沉淀物在25℃条件下使用核突显试剂预处理，得到二次沉淀物，并将所述二次沉淀物洗涤去除固定剂，得到上皮细胞模拟物。其中，所述获取动物血液制取红细胞的具体方式为：
[0009]获取两栖动物血液，并对所述血液离心分层，得到分层液；
[0010]去除所述分层液的上清液和白细胞层，得到红细胞层；
[0011]使用生理盐水离心洗涤所述红细胞层，得到所述红细胞。
[0012]其中，将所述红细胞投入含有固定剂的固定缓冲液中进行固化，得到半固化细胞，并将所述半固化细胞进行离心，得到沉淀物的具体方式为：
[0013]取所述固定剂投入200～3000mOsm/kgH2O渗透压条件下的固定缓冲液中；
[0014]将所述红细胞中投入所述固定缓冲液，室温下固化所述红细胞，得到半固化细胞；
[0015]将所述半固化细胞离心分层过滤，得到所述沉淀物。
[0016]其中，所述固定剂为醛类固定剂，所述核突显试剂为酸类试剂。
[0017]其中，所述固定缓冲液为0.2g/LNaCl、0.34g/LNa2HPO4和0.24g/LKH2PO4中的一种或多种。
[0018]本专利技术的一种非鳞状上皮细胞模拟物的制备方法，获取动物血液制取红细胞；将
所述红细胞投入固定缓冲液中，用固定剂进行固定随后过滤处理，得到沉淀物；将所述沉淀物在25℃条件下使用核突显试剂处理，并去除所述固定剂，得到上皮细胞模拟物，上述方法利用两栖类动物红细胞模拟非鳞状上皮细胞，优选所述固定剂和所述核突显试剂浓度处理细胞后，可准确模拟非鳞状上皮细胞，明显与其他类型细胞区分开来，可以用来模拟非鳞状上皮细胞，改变细胞的复杂程度，使之适用于模拟非鳞状上皮细胞，具备模拟尿液中非鳞状上皮细胞的形态特征，对非鳞状上皮细胞的分析测定进行准确的质量控制，解决了现有质控物中非鳞状上皮细胞测试稳定性差的问题。
附图说明
[0019]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0020]图1是本专利技术提供的一种非鳞状上皮细胞模拟物的制备方法流程图。
[0021]图2是本专利技术提供的所述获取动物血液制取红细胞的具体方式流程图。
[0022]图3是本专利技术提供的所述将所述红细胞投入固定缓冲液中，用固定剂进行固定随后过滤处理，得到沉淀物的具体方式流程图。
[0023]图4是非鳞状上皮细胞的形貌特征图。
[0024]图5是类似细胞进行模拟图。
[0025]图6是实施例一制备的模拟物分析结果图。
[0026]图7是实施例二制备的模拟物分析结果图。
[0027]图8是实施例三制备的模拟物分析结果图。
[0028]图9是实施例四制备的模拟物分析结果图。
[0029]图10是实施例五制备的模拟物分析结果图。
[0030]图11是实施例六制备的模拟物分析结果图。
具体实施方式
[0031]下面详细描述本专利技术的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本专利技术，而不能理解为对本专利技术的限制。
[0032]请参阅图1至图11，本专利技术提供一种非鳞状上皮细胞模拟物的制备方法，包括以下步骤：。
[0033]S1获取动物血液制取红细胞；
[0034]具体的，动物血液选用两栖动物血液，如蛙类和龟类。
[0035]具体方式：
[0036]S11获取两栖动物血液，并对所述血液离心分层，得到分层液；
[0037]S12去除所述分层液的上清液和白细胞层，得到红细胞层；
[0038]S13使用生理盐水离心洗涤所述红细胞层，得到所述红细胞。
[0039]S2将所述红细胞投入含有固定剂的固定缓冲液中进行固化，得到半固化细胞，并
将所述半固化细胞进行离心，得到沉淀物；
[0040]具体的，所述固定剂为固定剂为醛类固定剂，选自甲醛、乙醛及戊二醛。所述醛类固定剂的浓度优选为0.01％～5％(W/V)，所述浓度为质量体积百分比浓度，固定剂的作用时间根据具体的固定剂以及浓度而变化，通常为5h～24h，所述固定缓冲液为0.2g/LNaCl、0.34g/LNa2HPO4和0.24g/L KH2PO4中的一种或多种，所述固定缓冲液使用时，先用盐酸或NaOH调节pH到7.2
±
0.2，再用NaCl调节渗透压至300
±
20mOsm/kgH2O。
[0041]具体方式：
[0042]S21取所述红细胞投入200～3000mOsm/kgH2O渗透压条件下的固定缓冲液中；
[0043]S22将所述红细胞投入含有固定剂的固定缓冲液中进行固化，室温下固化所述红细胞，得到半固化细胞；
[0044]S23将所述半固化细胞离心分层过滤，得到所述沉淀物。
[0045]S3将所述沉淀物在25℃条件下使用核突显试剂预处理，得到二次沉淀物，并将所述二次沉淀物洗涤去除固定剂，得到上皮细胞模拟物。
[0046]具体的，所述核突显试剂为酸类试剂，所述的核突显试剂为酸类试剂，选自乙酸、盐酸。所述酸类试剂的浓度优选为0.5％～5％(W/V)，所述浓度为质量体积百分比浓度，所述核突显试剂的作用时间随浓度而变化，通常为12h～24h，所述沉淀物在使用所本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种非鳞状上皮细胞模拟物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：获取动物血液制取红细胞；将所述红细胞投入含有固定剂的固定缓冲液中进行固化，得到半固化细胞，并将所述半固化细胞进行离心，得到沉淀物；将所述沉淀物在25℃条件下使用核突显试剂预处理，得到二次沉淀物，并将所述二次沉淀物洗涤去除固定剂，得到上皮细胞模拟物。2.如权利要求1所述的一种非鳞状上皮细胞模拟物的制备方法，其特征在于，所述获取动物血液制取红细胞的具体方式为：获取两栖动物血液，并对所述血液离心分层，得到分层液；去除所述分层液的上清液和白细胞层，得到红细胞层；使用生理盐水离心洗涤所述红细胞层，得到所述红细胞。3.如权利要求1所述的一种非鳞状上皮细胞模拟物的制备方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：周永杨，祝毅，江丽萍，
申请(专利权)人：桂林优利特医疗电子有限公司，
类型：发明
国别省市：