一种快速检测DNA甲基化的试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种快速检测DNA甲基化的试剂盒，包括：甲基化转化液、结合缓冲液、脱磺化缓冲液、清洗缓冲液以及洗脱液。本发明专利技术通过提高甲基化转化液中亚硫酸氢钠的浓度，再结合甲酰胺变性剂，可确保在较低的反应温度下使DNA保持解链状态，并使转化能够在较短的时间内高效完成，同时可明显的降低在极端的反应条件下对目标片段的降解，提高转化率和比对率。提高转化率和比对率。

【技术实现步骤摘要】
一种快速检测DNA甲基化的试剂盒及其应用


[0001]本专利技术属于生物检测
，涉及一种快速检测DNA甲基化的试剂盒及其应用。

技术介绍

[0002]DNA化学修饰为DNA序列编码基因的表达增加了一层调控机制。这些化学修饰中，研究地最透彻的是DNA甲基化修饰。在肿瘤的研究中，许多肿瘤关键基因的表达异常并非是由基因突变或缺失导致，而是与DNA的甲基化状态相关。癌症基因的去甲基化及抑癌基因的高甲基化，可导致致癌基因激活、抑癌基因失活，从而导致癌症的发生与发展。
[0003]DNA甲基化是指在DNA甲基化转移酶(DNMT)的作用下，以S
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腺苷甲硫氨酸为甲基供体，将甲基添加到胞嘧啶上形成5
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甲基胞嘧啶(5mC)的过程。由于5mC与非5mC的碱基特征相同，因此无法通过直接测序的方法进行区分，而且DNA模板如果直接进行PCR扩增，在后续分析中会导致5mC信息的丢失。
[0004]在甲基化修饰情况检测中，常用的方法有两种，即甲基化敏感性限制性内切酶法(methylationr/>‑
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种快速检测DNA甲基化的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含：甲基化转化液、结合缓冲液、脱磺化缓冲液、清洗缓冲液以及洗脱液。2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述甲基化转化液包含：亚硫酸氢钠2
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5M、氢氧化钠0.1
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0.5M、甲酰胺1
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5M、亚硫酸氢铵5
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10M、亚硫酸铵水合物0.1
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2M。3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述甲基化转化液包含：亚硫酸氢钠2.8
‑
3.2M、氢氧化钠0.171
‑
0.257M、甲酰胺1.786
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3.572M、亚硫酸氢铵7
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8M、亚硫酸铵水合物0.644
‑
0.736M。4.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述甲基化转化液包含：亚硫酸氢钠2.8
‑
3.2M、氢氧化钠0.171
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0.257M、甲酰胺1.786
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3.572M、亚硫酸氢铵7
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8M、亚硫酸铵一水合物0.644
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0.736M。5.如权利要求1所述的试剂盒...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭纯，王博，胡学文，樊隆，黄昊，李竑，
申请(专利权)人：南京金斯瑞生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：