一种适用于受损皮肤细胞修复的类贻贝粘蛋白水凝胶的制备方法技术

本发明专利技术提供一种适用于受损皮肤细胞修复的类贻贝粘蛋白水凝胶的制备方法，包括：(1)取5

A preparation method of mussel like mucin hydrogel suitable for repairing damaged skin cells

【技术实现步骤摘要】
一种适用于受损皮肤细胞修复的类贻贝粘蛋白水凝胶的制备方法


[0001]本专利技术涉及生物护肤材料
，特别涉及一种适用于受损皮肤细胞修复的类贻贝粘蛋白水凝胶的制备方法。

技术介绍

[0002]皮肤创面受损细胞的修复，主要包括止血阶段、炎症阶段、细胞增殖阶段和组织重塑阶段的四个阶段。随着人们对浅表皮肤创面愈合方面的重视，目前出现薄膜类、水凝胶、喷雾类等多种多样的创伤敷料。
[0003]由于在对受损的皮肤细胞修复的过程中，常因换药时将敷料从伤口剥离，而产生创面的二次伤害，而水凝胶具有良好的生物相容性，其作为一种柔性的功能材料，广泛应用于皮肤创面的受损细胞修复中。但现有的复合水凝胶类创伤敷料的粘附性不足，不利于覆盖皮肤创面，而且复合水凝胶的载药缓释性差，局部皮肤受损细胞的抗炎效果低，不利于创面的愈合修复等问题，因此，制备一种具有稳定缓释效果，且对皮肤细胞粘附性好和显著抗炎效果的蛋白水凝胶，有利于促进复合水凝胶在皮肤创面细胞修复敷料中的更广泛应用。

技术实现思路

[0004]鉴于此，本专利技术提出一种适用于受损皮肤细胞修复的类贻贝粘蛋白水凝胶的制备方法。
[0005]本专利技术的技术方案是这样实现的：
[0006]本专利技术提供一种适用于受损皮肤细胞修复的类贻贝粘蛋白水凝胶的制备方法，包括如下步骤：
[0007](1)类贻贝粘蛋白混合前液：
[0008]取类贻贝粘蛋白溶于去离子水中，制得浓度为5
‑
8wt％的类贻贝粘蛋白溶液，加入透明质酸钠碱性溶液，在室温下搅拌均匀，得到类贻贝粘蛋白混合前液；
[0009](2)类贻贝粘蛋白预混物：
[0010]将类贻贝粘蛋白混合前液在30
‑
35℃水浴条件下，滴加海藻酸盐水溶液，恒温搅拌均匀，得到类贻贝粘蛋白预混物；
[0011](3)类贻贝粘蛋白组合物
[0012]将类贻贝粘蛋白预混物，在20
‑
22℃磁性搅拌状态下，加入酶解乌鳢胶原蛋白肽液，并滴加氯化钠水溶液，所述类贻贝粘蛋白预混物、酶解乌鳢胶原蛋白肽液和氯化钠溶液体积比为3:1
‑
2：4
‑
6；氯化钠溶液质量浓度为3
‑
3.5g/L；得到类贻贝粘蛋白组合物；
[0013](4)壳聚糖多糖载体溶液：
[0014]取水溶性壳聚糖溶于去离子水中，制得浓度为10
‑
12wt％的壳聚糖水溶液；并在5
‑
8℃下，将壳聚糖水溶液与仙草多糖，混合搅拌均匀，得到壳聚糖多糖组合液；
[0015](5)将壳聚糖多糖组合液在35
‑
45℃水浴条件下，加入类贻贝粘蛋白组合物、三乙
醇胺和卡波姆搅拌均匀，得到类贻贝粘蛋白水凝胶。
[0016]进一步说明，所述海藻酸盐水溶液的滴加速度为5
‑
10mL/min。
[0017]进一步说明，所述透明质酸钠碱性溶液是由透明质酸钠粉末溶于NaOH碱性水溶液中，得到pH＝10
‑
11，浓度为3
‑
6w％的透明质酸钠碱溶液。
[0018]进一步说明，所述透明质酸钠碱溶液与类贻贝粘蛋白溶液的体积比为：8
‑
10:1
‑
2。
[0019]进一步说明，所述仙草多糖水为仙草80
‑
100℃热水浸提液，过滤浓缩烘干而得；所述壳聚糖与仙草多糖的质量比为2
‑
4：0.3。
[0020]进一步说明，所述海藻酸盐水溶液是由海藻酸钠加水溶解得到20
‑
22wt％的海藻酸盐水溶液；所述类贻贝粘蛋白混合前液与海藻酸盐水溶液的体积比为：1:8
‑
10。
[0021]进一步说明，所述酶解乌鳢胶原蛋白肽液是由乌鳢胶原蛋白，加入蛋白酶进行酶解处理，灭菌，得到分子量＜1kDa乌鳢胶原蛋白肽液。
[0022]进一步说明，所述酶解乌鳢胶原蛋白肽液的制备方法为：将乌鳢胶原蛋白，加入浓度为0.05
‑
0.1mol/L乙酸中，料液比为1：30
‑
40mg/ml；添加0.3
‑
0.6wt％胃蛋白酶和0.2
‑
0.4wt％菠萝蛋白酶，在10℃
‑
12℃下酶解2
‑
3h后，升温至75℃，保温静置20
‑
25min灭酶，离心，通过分子量＜1kDa的超滤膜，分离得到胶原蛋白肽液。
[0023]进一步说明，所述壳聚糖多糖组合液、类贻贝粘蛋白组合物、三乙醇胺和卡波姆的质量比为：(35
‑
45):(6
‑
8):(0.3
‑
0.5):(0.05
‑
0.1)。
[0024]一种根据上述的制备方法制得的用于受损皮肤细胞修复的类贻贝粘蛋白水凝胶。
[0025]与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：
[0026](1)本专利技术将类贻贝粘蛋白应用至水凝胶制剂中，通过采用透明质酸钠碱性溶液、海藻酸盐水溶液与类贻贝粘蛋白的组合，得到类贻贝粘蛋白预混物的基础上，在低温的磁性搅拌作用下，将类贻贝粘蛋白预混物、酶解乌鳢胶原蛋白肽液与氯化钠溶液组合，得到具有良好的稳定性和高黏附性的类贻贝粘蛋白组合物。
[0027](2)本专利技术通过首先利用透明质酸钠碱性溶液与类贻贝粘蛋白的预混后，再采用由壳聚糖水溶液与仙草多糖混合的壳聚糖多糖组合液，与含有酶解乌鳢胶原蛋白肽的类贻贝粘蛋白组合物，进行水浴混合，使得到类贻贝粘蛋白水凝胶，不仅具有良好的粘附性，充分覆盖皮肤创面的受损细胞，促进创面的愈合修复，而且有利于提高蛋白水凝胶的缓释效果，释药稳定，用于受损的皮肤屏障修复，使得护理周期更久，效果更佳。
具体实施方式
[0028]为了更好理解本专利技术
技术实现思路
，下面提供具体实施例，对本专利技术做进一步的说明。
[0029]本专利技术实施例所用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
[0030]本专利技术实施例所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0031]实施例1
[0032]适用于受损皮肤细胞修复的类贻贝粘蛋白水凝胶，按照重量份数比，包括：壳聚糖多糖组合液35份、类贻贝粘蛋白组合物6份、三乙醇胺0.3份和卡波姆0.05份。
[0033]其制备方法，包括如下步骤：
[0034](1)类贻贝粘蛋白混合前液：
[0035]取类贻贝粘蛋白溶于去离子水中，制得浓度为5wt％的类贻贝粘蛋白溶液，加入pH
＝10
‑
11，浓度为3w％的透明质酸钠碱性溶液，在室温下搅拌均匀，透明质酸钠碱溶液与类贻贝粘蛋白溶液的体积比为：8:1；得到类贻贝粘蛋白混合前液；其中，类贻贝粘蛋白是贻贝粘蛋白的基因片段进行重组后，利用生物发酵技术制备而得的类贻贝粘蛋白。
[0036](本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种适用于受损皮肤细胞修复的类贻贝粘蛋白水凝胶的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)类贻贝粘蛋白混合前液：取类贻贝粘蛋白溶于去离子水中，制得浓度为5
‑
8wt％的类贻贝粘蛋白溶液，加入透明质酸钠碱性溶液，在室温下搅拌均匀，得到类贻贝粘蛋白混合前液；(2)类贻贝粘蛋白预混物：将类贻贝粘蛋白混合前液在30
‑
35℃水浴条件下，滴加海藻酸盐水溶液，恒温搅拌均匀，得到类贻贝粘蛋白预混物；(3)类贻贝粘蛋白组合物将类贻贝粘蛋白预混物，在20
‑
22℃磁性搅拌状态下，加入酶解乌鳢胶原蛋白肽液，并滴加氯化钠水溶液，所述类贻贝粘蛋白预混物、酶解乌鳢胶原蛋白肽液和氯化钠溶液体积比为3:1
‑
2：4
‑
6；氯化钠溶液质量浓度为3
‑
3.5g/L；得到类贻贝粘蛋白组合物；(4)壳聚糖多糖载体溶液：取水溶性壳聚糖溶于去离子水中，制得浓度为10
‑
12wt％的壳聚糖水溶液；并在5
‑
8℃下，将壳聚糖水溶液与仙草多糖，混合搅拌均匀，得到壳聚糖多糖组合液；(5)将壳聚糖多糖组合液在35
‑
45℃水浴条件下，加入类贻贝粘蛋白组合物、三乙醇胺和卡波姆搅拌均匀，得到类贻贝粘蛋白水凝胶。2.如权利要求1所述的一种适用于受损皮肤细胞修复的类贻贝粘蛋白水凝胶的制备方法，其特征在于：所述海藻酸盐水溶液的滴加速度为5
‑
10mL/min。3.如权利要求1所述的一种适用于受损皮肤细胞修复的类贻贝粘蛋白水凝胶的制备方法，其特征在于：所述透明质酸钠碱性溶液是由透明质酸钠粉末溶于NaOH碱性水溶液中，得到pH＝10
‑
11，浓度为3
‑
6w％的透明质酸钠碱溶液。4.如权利要求3所述的一种适用于受损皮肤细胞修复的类贻贝粘蛋白水凝胶的制备方法，其特征在于：所述透明质酸钠碱溶液与类贻贝粘蛋白溶液的体积比为：8
‑
10:1
‑
2。...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨鹭，
申请(专利权)人：海南德诺海思生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：