一种接合菌ZH-1及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种接合菌ZH

A conjugating bacterium ZH-1 and its application

【技术实现步骤摘要】
一种接合菌ZH
‑
1及其应用


[0001]本专利技术涉及植物真菌病害防治领域，特别涉及一种接合菌ZH
‑
1及其应用。

技术介绍

[0002]稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae syn. Pyricularia oryzae)引起的水稻稻瘟病是世界性的真菌病害，也是最严重的水稻病害之一，由于稻瘟病菌具有突发性强、易于流行和分布广泛等特点，每年在全世界种植区造成约10
‑
30%的产量损失。在一些发展中国家如肯尼亚，孟加拉国以及非洲部分国家，近年来由于稻瘟病的大面积爆发使得水稻几乎绝产，这意味着当地的农民几乎没有收入，甚至整个国家将面临由饥饿而造成的恐慌。此外，即使造成的产量损失只有10%，这些损失足可以养活约6000万人口，经济价值超过7000亿美元。然而，由于稻瘟病菌具有强大的环境适应性和不断的变异，目前传统育种方法和传统的化学防治技术无法有效遏制稻瘟病菌的蔓延。在我国，水稻是第一大粮食作物，种植面积位居世界第二，我国稻瘟病每年的发病情况及造成的产量损失一直居高不下。到目前为止，用于防治稻瘟病的药剂主要以化学农药为主且单一的稻瘟病防治药物常年使用很容易导致稻瘟病菌产生抗药型。一旦出现抗性菌株，稻瘟病的防治将变得更加棘手。
[0003]生物防治是利用其他微生物或微生物代谢产物来抑制病原菌的生长繁殖或调节植物生长的措施。我国近年来在生物防治技术方面研究比较多，并取得了很好的效果。目前，用于防治稻瘟病菌的主要有微生物源农药如真菌类，放线菌类和细菌类；植物源农药如皂荚、无患子、棒树、油茶等提取物；植物保护素类化合物如黄丽类化合物樱花素、萜类化合物稻壳酮Ａ和稻壳酮Ｂ等。由于生物防治具有安全、绿色、高效、环保能有点，成为植物病害防治的热点。
[0004]接合孢菌（Zygosporium）属于炭角菌目粪壳菌纲真菌，是一种常见的寄生菌，分布在各种被子植物和一些裸子植物上，分布范围从温带到热带都有分布。大多数接合孢真菌为植物寄生菌，严重危害寄主植物的健康。利用接合菌防治稻瘟病方面目前尚无报道。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种接合菌ZH
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1及其应用，能有效抑制稻瘟病菌，为水稻稻瘟病的绿色安全防治提供了新的途径。
[0006]本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：一种接合菌ZH
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1，该菌株命名为Zygosporium masonii ZH
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1，已于2022年2月24日保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO：M 2022148。
[0007]接合菌ZH
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1作为防治水稻稻瘟病的生物制剂的应用。
[0008]一种防治水稻稻瘟病的微生物源农药，所述微生物源农药的微生物源为接合菌ZH
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1。
[0009]一种防治水稻稻瘟病的方法，将接合菌ZH
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1接种至液体培养基中培养，扩大培养后，过滤，水稻种子浸泡滤液后播种或将滤液喷洒于水稻植株表面。
[0010]本专利技术的有益效果是：该菌能够显著抑制稻瘟病菌、炭疽病菌等植物病原真菌的生长以及分生孢子的萌发，其液体培养状态下的滤液具有高效抑制稻瘟病菌的活性，能够实现对稻瘟病的防治。
附图说明
[0011]图1为接合菌ZH
‑
1菌落形态。
[0012]图2为接合菌ZH
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1菌丝（标尺为10
ꢀµ
m）和分生孢子形态（标尺为2
ꢀµ
m）。
[0013]图3为接合菌ZH
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1对稻瘟病菌和炭疽菌菌落的抑制情况。
[0014]图4为接合菌ZH
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1培养滤液对稻瘟病菌孢子萌发的抑制情况（标尺为50
ꢀµ
m）。
[0015]图5为接合菌ZH
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1培养滤液处理后稻瘟病菌侵染大麦叶片情况。
[0016]图6为接合菌ZH
‑
1培养滤液浸种水稻种子抑菌情况。
具体实施方式
[0017]下面通过具体实施例，对本专利技术的技术方案作进一步的具体说明。
[0018]本专利技术中，若非特指，所采用的原料和设备等均可从市场购得或是本领域常用的。下述实施例中的方法，如无特别说明，均为本领域的常规方法。
[0019]实施例1 接合菌ZH
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1菌株的分离与鉴定一、ZH
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1菌株的获得、分离与纯化在实验室（浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所真菌与植物研究室）环境下将稻瘟病菌接种于CM固体培养基（生工生物）中25℃培养7天，发现培养基中出现一个粉红色单菌落，该菌落可以明显抑制稻瘟病菌的生长，为了鉴定该菌株，将该菌株转接于新的CM固体培养基中25℃，16/8 h光照/黑暗交替培养。在培养15天后，向培养基中加入2 mL无菌水，将菌丝轻轻刮下，用三层滤纸过滤收集孢子，并将孢子稀释到103/mL，取100 μL 孢子液均匀涂于CM固体培养基中，25℃培养5天，挑取单菌落转接到新鲜的CM固体培养基中继续培养，编号为ZH
‑
1。
[0020]二、菌株鉴定（1）形态学鉴定：在25℃ ，CM培养基中生长7天后菌落直径为1.2 cm；菌落扩展能力缓慢，基部隆起气生菌丝稀疏（图1）。显微镜下观察菌丝有隔膜，分生孢子梗不分支。孢子单胞无色，椭圆形，7
‑
10
×
3.5
‑7ꢀµ
m（图2）。
[0021]（2）分子鉴定：将ZH
‑
1在25℃ ，CM固体培养基中生长7天后取1平方厘米菌丝块用振荡器震碎，转入CM液体培养基（生工生物）中25℃ 150 rpm/min 培养5天，过滤后收集1 g菌丝,经液氮研磨后提取基因组DNA并进行ITS测序，将测序所得ITS核苷酸序列（SEQ ID.No.1）采用NCBI数据库进行BLASt比对，该系列与登录号为MH860771.1和MZ568332.1的接合菌属（Zygosporium sp）曼氏接合菌（Zygosporium masonii）序列覆盖度分别为98%，相似度为99.81%，经上述分子鉴定与形态学分析表明，ZH
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1为一种新的曼氏接合菌。
[0022]实施例2 ZH
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1菌株对稻瘟病菌的防效（1）ZH
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1对稻瘟病菌和炭疽病菌菌落抑制实验采用对峙培养方法，将ZH
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1菌株和稻瘟病菌以及炭疽病菌分别接种于CM固体培养基上，25℃ 16/8 h光照/黑暗交替培养7天。发现ZH
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1对稻瘟病菌生长抑制率为37.3%，对炭
疽菌生长抑制率为41.7%（图3）。
[0023]（2）ZH
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1菌株抑制稻瘟病菌孢子萌发将ZH
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1在25℃ CM固体培养基中生长7天本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种接合菌ZH
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1，其特征在于，该菌株命名为Zygosporium masonii ZH
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1，已于2022年2月24日保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO：M 2022148。2.接合菌ZH
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1作为防治水稻稻瘟病的生...

【专利技术属性】
技术研发人员：林福呈，朱学明，黄昌丽，
申请(专利权)人：浙江省农业科学院，
类型：发明
国别省市：