一种具有防治扩展青霉及展青霉素的马克斯克鲁维酵母菌制造技术

本发明专利技术涉及一种具有防治扩展青霉及展青霉素的马克斯克鲁维酵母菌，该菌株已于2022年1月5日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M 2022014。将马克斯克鲁维酵母菌活化培养后离心获得菌体，离心后的菌体经洗涤、离心得到马克斯克鲁维酵母菌生物制剂。将菌体再用保护剂重悬达到浓度10

A kind of Saccharomyces cerevisiae with the ability to control Penicillium expansum and patulin

【技术实现步骤摘要】
一种具有防治扩展青霉及展青霉素的马克斯克鲁维酵母菌


[0001]本专利技术涉及一种具有防治扩展青霉及展青霉素的马克斯克鲁维酵母菌，属于微生物


技术介绍

[0002]扩展青霉能产生大量的分生孢子，病害可以迅速传播，产生巨大的经济损失。而扩展青霉的次生代谢产物展青霉素，它对人及动物具有广泛而强烈的毒性作用。展青霉素的急性中毒症状包括肌肉战栗、痉挛、对刺激敏感、肠胃溃疡等。慢性症状为神经毒性、免疫毒性等，人体若长期摄入也会具有致癌性健康。
[0003]扩展青霉污染广泛存在于苹果贮藏期间，是世界范围内苹果贮藏需要面对的一个问题。扩展青霉在侵染苹果时会产生大量展青霉素，而且展青霉素会扩散到苹果健康组织。一些去掉腐烂组织的健康果肉常被用作生产果汁。为避免展青霉素毒素中毒，许多的相关机构对食品中的展青霉素限量出台了相关标准。世界卫生组织推荐的苹果汁中的展青霉素最高限量为50 μg/kg。而根据我国相关标准规定，苹果、山楂半成品中的展青霉素最大限量为100 μg/kg，果汁、果酱、果酒、果脯和罐头的限量标准为50 μg/kg。在水果贮藏上，是苹果及其制品的贮藏，展青霉素的污染是必须要解决的问题。
[0004]目前控制扩展青霉的方法是化学法和物理法，但这两种方法都存在一定的弊端。如冷藏，耗时耗财；化学杀菌剂，会导致扩展青霉产生抗药性，增加农残量，不仅有损于人类健康，还会造成环境污染。为此采用安全、高效、绿色的生物方法来防治扩展青霉已成为学术界的研究热点。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的就是针对上述存在的问题，提供一种具有防治扩展青霉及展青霉素的马克斯克鲁维酵母菌。
[0006]本专利技术的目的是这样实现的，一种具有防治扩展青霉及展青霉素的马克斯克鲁维酵母菌（Kluyveromyces marxianus XZ1），该菌株已于2022年1月 5 日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉武汉大学，保藏编号为CCTCC NO：M 2022014。
[0007]一种应用马克斯克鲁维酵母菌制备用于清除展青霉素的生物制剂的方法，将马克斯克鲁维酵母菌活化培养后离心获得菌体，离心后的菌体经洗涤、离心得到马克斯克鲁维酵母菌生物制剂。
[0008]进一步的，将菌体再用保护剂重悬达到浓度10
10
CUF/mL，然后将悬浮液培养后冷冻干燥得到马克斯克鲁维酵母菌菌粉生物制剂。
[0009]所述的保护剂为海藻糖、L
‑
半胱氨酸、山梨醇、乙酸钠或脱脂奶粉。
[0010]一种含有马克斯克鲁维酵母菌的生物制剂。所述生物制剂的应用。
[0011]所述马克斯克鲁维酵母菌在防治苹果上扩展青霉及展青霉素的应用。
[0012]通过本专利技术，要解决的第一个技术问题是提供一种马克斯克鲁维酵母菌
（Kluyveromyces marxianus XZ1），该菌株已于2022年1 月 5 日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M 2022014。
[0013]所述马克斯克鲁维酵母（Kluyveromyces marxianus XZ1）具有以下特性：（1）菌落特征：在NYDA培养基上生长良好，菌落大小均匀，表面凸起，颜色为微白色，表面湿润，边缘整齐，菌落呈圆形，比细菌的菌落大而厚，符合酵母菌属菌落形态特征。
[0014]（2）在当马克斯克鲁维酵母浓度为10
9 cells/mL时，在PDA培养基中扩展青霉菌落直径最小，为2.93 cm，而此时只接种扩展青霉组中菌落直径达到4.17 cm。
[0015]（3）在当马克斯克鲁维酵母浓度为10
9 cells/mL时，在NYDA培养基中扩展青霉菌落直径最小，为1.07cm，而此时只接种扩展青霉组中菌落直径达到5.13cm。
[0016]（4）马克斯克鲁维酵母与扩展青霉接种到PDB培养基中，随着时间的增长，只接种扩展青霉的对照组中展青霉素的浓度不断增长，第7天时，展青霉素积累量为20.37 μg/ml。而接种马克斯克鲁维酵母组展青霉素的含量一直处于较低水平，到第7天时，展青霉素反而下降到0.08 μg/ml。
[0017]在本专利技术中，所述马克斯克鲁维酵母菌具有以下用途：（1）可直接用Kluyveromyces marxianus XZ1制成的菌剂抑制苹果中的扩展青霉及苹果发病率；（2）可直接用Kluyveromyces marxianus XZ1制成的菌剂抑制苹果中的展青霉素。
[0018]本专利技术的马克斯克鲁维酵母菌具有耐酸性，对扩展青霉及展青霉素有良好的耐受能力。并且对展青霉素有较强的清除作用，能够显著降低培养基、苹果中展青霉素的含量。所述的马克斯克鲁维酵母菌用于去除食品中的展青霉素，具有非常广泛的应用前景。
[0019]综上，本专利技术所提供的马克斯克鲁维酵母（Kluyveromyces marxianus XZ1）具有耐酸性，能够抑制培养基中的扩展青霉及展青霉素，同时马克斯克鲁维酵母菌Kluyveromyces marxianus XZ1可显著抑制苹果中的扩展青霉及展青霉素，用于抑制食品中的扩展青霉及展青霉素，具有非常广泛的应用前景。
附图说明
[0020]图1为在PDA中不同浓度马克斯克鲁维酵母对扩展青霉的抑制作用图。
[0021]图2为在NYDA中不同浓度马克斯克鲁维酵母对扩展青霉的抑制作用图。
[0022]图3为马克斯克鲁维酵母菌在PDB中对扩展青霉产展青霉素的抑制作用图。
[0023]图4为马克斯克鲁维酵母菌抑制扩展青霉侵染苹果的能力中对青霉病腐烂直径的影响图。
[0024]图5为马克斯克鲁维酵母菌抑制扩展青霉侵染苹果的能力中对青霉病腐烂率的影响图。
[0025]图6为马克斯克鲁维酵母菌在苹果中对扩展青霉产展青霉素的抑制作用图。
具体实施方式
[0026]下面结合具体实施例对本专利技术做进一步的说明。下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和生物材料如无特殊说明，均可从商业途径获得。
[0027]实施例1：在PDA中不同浓度马克斯克鲁维酵母CCTCC M 2022014XZ1对扩展青霉的抑制作用图的绘制。
[0028]用无菌镊子夹取无菌牛津杯放置在18个培养皿中央，分别加入15 mL PDA培养基，待凝固后，用镊子左右微旋取出牛津杯。依次加入活化的30 μL浓度为105、106、107、108、10
9 cells/mL的Kluyveromyces marxianus XZ1，对照组加30 μL生理盐水。2 h后再分别加入30 μL 10
5 spores/mL的扩展青霉，用自封袋包起来，于25℃培养箱中培养6天，测抑菌直径，平行3次，实验重复两次。
[0029]实施例2：在NYDA中不同浓度马克斯克鲁维酵母CCTCC M 2022014XZ1对扩展青霉的抑制作用图的绘制。
[0030]用无菌镊子本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1. 一种具有防治扩展青霉及展青霉素的马克斯克鲁维酵母菌（Kluyveromyces marxianus XZ1），该菌株已于2022年1月5日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO: M 2022014。2.一种应用权利要求1所述马克斯克鲁维酵母菌制备用于清除展青霉素的生物制剂的方法，其特征在于，将马克斯克鲁维酵母菌活化培养后离心获得菌体，离心后的菌体经洗涤、离心得到马克斯克鲁维酵母菌生物制剂。3. 根据权利要求2所述的方法，其特征在于，将菌体再用保护剂重悬达到浓度10

【专利技术属性】
技术研发人员：郑香峰，郑凌利，夏芳平，李江，魏皖宁，高璐，饶胜其，杨振泉，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：