【技术实现步骤摘要】
C57BL/6小鼠多发性骨髓瘤模型的构建方法及应用
[0001]本专利技术涉及多发性骨髓瘤研究
,具体涉及一种C57BL/6小鼠多发性骨髓瘤模型的构建方法及应用。
技术介绍
[0002]多发性骨髓瘤(Multiple Myeloma, MM)是一种恶性浆细胞瘤,属B淋巴细胞淋巴瘤范畴。正常情况下,浆细胞是由B细胞经过多器官、多阶段、精确调节,及抗原刺激而发育成熟,具有抗体分泌功能的细胞。在该过程中多种原因可能引起基因的异常表达,最终导致MM。MM通常由MGUS(Monoclonal Gammopathy of Undetermined Significance)渐进发展而成的,在血液系统恶性肿瘤中,MM发病率居第二位,占血液系统肿瘤的10%
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13%。多发性骨髓瘤发生过程中涉及基因组的异常和表观遗传学的紊乱,在多发性骨髓瘤发病进展过程中会伴随着基因突变的积累和表达异常,包括NRAS和KRAS的突变,MYC的过表达和P53基因的抑制,随着测序技术的发展,全基因组测序和全外显子测序显示了更多的分子遗传事件 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.C57BL/6小鼠多发性骨髓瘤模型的构建方法,其特征在于:包括以下步骤:步骤S1,对C57BL/6小鼠和Balb/c小鼠脾脏中的浆细胞进行建库测序和生物信息分析筛选出两者的差异基因,并从筛选出的差异基因中确定目标基因;步骤S2,利用确定的目标基因构建逆转录病毒载体,并通过对293T细胞病毒包装获得目标病毒和对照病毒;步骤S3,利用目标病毒逆转录病毒感染C57BL/6小鼠的细胞,并将感染后的细胞移植到C57BL/6小鼠体内诱导C57BL/6小鼠原代细胞转化为多发性骨髓瘤模型。2.根据权利要求1所述的C57BL/6小鼠多发性骨髓瘤模型的构建方法,其特征在于:所述差异基因包括DENND2D、LYN、CD63、PTPRE、RAC1、E2F8、CYLD、CDK4、BTG2和ATXN3;所述目标基因为DENND2D。3.根据权利要求1所述的C57BL/6小鼠多发性骨髓瘤模型的构建方法,其特征在于:所述构建逆转录病毒载体为,在c
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MYC和KRAS12V共表达的基础上,同时再将DENND2D过表达。4.根据权利要求1所述的C57BL/6小鼠多发性骨髓瘤模型的构建方法,其特征在于:所述目标病毒为MSCV
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cMYC
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2a
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GFP
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IRES
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DENND2D
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IRES
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KRAS12V;所述对照病毒为MSCV
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cMYC
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2...
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