基于量子点荧光淬灭原理的化学发光试剂、其制备方法及检测方法技术

本发明专利技术公开了一种基于量子点荧光淬灭原理的化学发光试剂、其制备方法及检测方法，该化学发光试剂包括：第一抗体、生物素第二抗体结合物、链酶亲和素过氧化物酶结合物、双氧水溶液以及量子点；其中，所述第一抗体和第二抗体能与相同的抗原结合，所述量子点为半导体型量子点或碳量子点。本发明专利技术充分利用了量子点优异的光学特性，避免了将量子点直接用于生物标记，在试剂储存过程中，量子点被单独保存于避光容器中，因此本发明专利技术制备的试剂相对于目前市售的发光试剂具有更长的货架期；本发明专利技术通过使用生物素——链霉亲和素、过氧化物酶——过氧化氢以及高发光效率、高“特异性”淬灭的量子点多重放大体系，能够实现极高灵敏度的检测。能够实现极高灵敏度的检测。能够实现极高灵敏度的检测。

【技术实现步骤摘要】
基于量子点荧光淬灭原理的化学发光试剂、其制备方法及检测方法


[0001]本专利技术涉及体外诊断试剂领域，特别涉及一种基于量子点荧光淬灭原理的化学发光试剂、其制备方法及检测方法。

技术介绍

[0002]化学发光免疫分析法兼具化学发光的高灵敏度和免疫分析的高选择性具有检测稳定迅速、适应项目多等优点，广泛应用于临床检验各领域。化学发光剂在化学发光免疫分析法中起着关键的作用，其中常见的有吖啶酯、鲁米诺及其衍生物、AMPPD等几种。在目前应用最为广泛的化学发光标记物中，吖啶酯194357
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7或吖啶磺酰胺类化合物属于直接发光化学剂，在H2O2的稀碱性溶液中即能发光，无需催化剂、增强剂，因此具有具有发光效率高、发光强度强、反应迅速、背景发光低、信噪比高的优点，被广泛应用于多种类型疾病的灵敏检测和诊断，以及蛋白质、核酸、肽等含有氨基化合物的分离检测。然而吖啶酯在缓冲液中不稳定，易水解，因而所制备试剂具有较短的货架期，再者，其发出的430nm的光存在激发样本中杂质发光的可能性，而且样本中物质被激发后所发出的光波长在4本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于量子点荧光淬灭原理的化学发光试剂，其特征在于，包括：第一抗体、生物素第二抗体结合物、链酶亲和素过氧化物酶结合物、双氧水溶液以及量子点；其中，所述第一抗体和第二抗体能与相同的抗原结合，所述量子点为半导体型量子点或碳量子点。2.根据权利要求1所述的基于量子点荧光淬灭原理的化学发光试剂，其特征在于，其制备方法包括以下步骤：1)将第一抗体固定孔板的深孔中并使用封闭液封闭；2)采用生物素和第二抗体制备生物素第二抗体结合物；3)提供链酶亲和素过氧化物酶结合物；4)配制双氧水溶液；5)采用水相法合成量子点。3.根据权利要求2所述的基于量子点荧光淬灭原理的化学发光试剂，其特征在于，所述步骤1)中，固定在深孔中的第一抗体浓度为1～5μg/mL，固定时间为8～24小时。4.根据权利要求2所述的基于量子点荧光淬灭原理的化学发光试剂，其特征在于，所述步骤2)中的生物素第二抗体结合物的制备方法为：2
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1)使用干燥处理后的DMSO配制Biotin
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NHS储备液备用；2
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2)使用含有BSA的PBS溶液配制第二抗体溶液；2
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3)将Biotin
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NHS加入到第二抗体溶液中，在室温下置于暗室中反应；2
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4)向步骤2
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3)得到的产物中加入乙醇胺封闭，然后使用一次性柱过滤纯化，得到生物素第二抗体结合物。5.根据权利要求2所述的基于量子点荧光淬灭原理的化学发光试剂，其特征在于，所述步骤3)中，使用含有吐温20、脱脂乳粉的Tris缓冲盐溶液将链酶亲和素过氧化物结合物稀释后使用。6.根据权利要求2所述的基于量子点荧光淬灭原理的化学发光试剂，其特征在于，其中，量子点的激发波长为365～800nm，发射波长为535～1400n...

【专利技术属性】
技术研发人员：自强，王超，程文播，赵婷，
申请(专利权)人：中国科学院苏州生物医学工程技术研究所天津国科医工科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：