一种新型冠状病毒T细胞抗原表位肽及其在制备疫苗中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种新型冠状病毒T细胞抗原表位肽及其在制备疫苗中的应用，所述新型冠状病毒T细胞抗原表位肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1～9任一所示。并利用其制备得到了pMHC复合物单聚体，进一步制备得到pMHC复合物多聚体，其可以用于新型冠状病毒疫苗接种者和感染康复者外周血内抗原特异性T细胞的检测，并用于体外的T细胞活化实验，这些新型冠状病毒T细胞抗原表位肽可以用于制备针对各种新型冠状病毒突变株的通用疫苗、新型冠状病毒相关的免疫检测以及广谱治疗性药物研发中，值得深入研究和大力推广。究和大力推广。究和大力推广。

【技术实现步骤摘要】
一种新型冠状病毒T细胞抗原表位肽及其在制备疫苗中的应用


[0001]本专利技术涉及生物
，具体地，涉及一种新型冠状病毒T细胞表位多肽及其在制备疫苗中的应用。

技术介绍

[0002]目前来说，疫苗接种仍然是我们最好、也是目前唯一的工具来控制疫情的蔓延。然而，随着新冠肺炎疫情在全球广泛扩散，诸如英国变异株、南非变异株、德尔塔变异株及奥密克戎变异株等新冠肺炎病毒变体不断出现。其中，不少新冠肺炎病毒变体可以通过免疫逃逸进而继续感染已经接种过新冠疫苗人群，这对当前新冠防控提出了巨大挑战。通过疫苗免疫建立有效的群体免疫屏障是我国乃至全世界防控新冠疫情的核心手段。
[0004]鉴于当前新冠变体及其免疫逃逸株的不断出现，为将来开发通用型新冠疫苗和广谱治疗药物提供了契机。通用疫苗是一类选择即使病毒抗原发生变异后仍能有效保护免疫人群特性的广谱疫苗。因此，开发出在新冠肺炎病毒发生各类变异后，依旧能够给疫苗免疫人群提供有效免疫保护的通用疫苗以及广谱治疗性药物迫在眉睫。
[0005]根据对新型冠状病毒同源性较高的SARS等冠状病毒的研究显示，T细胞免疫应答在病毒感染后机体抗病毒防御以及机体免疫病理损伤过程中发挥了重要的作用，尤其是 CD8
+ T细胞，其抗原特异性免疫活性11年后依然存在，说明了CD8
+ T细胞免疫应答在抗冠状病毒免疫防御中的重要作用及其在疫苗研发中的重要地位。CD8
+ T细胞免疫应答的第一步就是T细胞通过其表面的抗原识别受体特异性识别被病毒感染的细胞所递呈的抗原表位肽。因此，抗原表位肽是T细胞特异性识别病毒、发挥免疫保护作用的重要关键分子，是免疫检测、免疫治疗和疫苗研发的关键靶向分子。
[0006]CD8
+ T细胞通过T细胞受体(TCR)识别pMHC活化，杀灭病毒感染细胞、清除病毒，从而发挥抗病毒的细胞免疫作用。因此，鉴定可以有效活化T细胞抗原表位肽，在病毒抗原发生变异后仍能诱导有效T细胞免疫保护，是开发新冠通用型疫苗和广谱治疗性药物的关键之一。
[0007]免疫逃逸是免疫抑制病原体通过其结构和非结构产物，拮抗、阻断和抑制机体的免疫应答。新型冠状病毒因为经常地持续性地发生突变，产生了大量的变异株，严重的威胁了疫苗的免疫屏障效果。

技术实现思路

[0008]本专利技术的目的是为了克服现有技术目前在新型冠状病毒领域尚没有开发一种用于新型冠状病毒通用疫苗的T细胞抗原表位肽及其应用相关的不足，提供一种新型冠状病毒T 细胞抗原表位肽及其在制备疫苗中的应用，本专利技术的T细胞抗原表位肽，得到的变异株抗原表位肽相对于原始病毒株抗原表位肽活化CD8T的细胞能力并不会减弱，甚至更强；其可以和HLA
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A2重链和HLA
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A2轻链β2m蛋白组装成pMHC复合物；或直接负荷到抗原递呈细胞，
能活化T细胞，有效诱导T细胞免疫，避免突变株的免疫逃逸，并在新冠疫苗接种者和康复者中均可检测到特异性的CD8+T细胞，可用于新型冠状病毒通用疫苗研发、制备和药物研发、临床治疗。
[0009]本专利技术的第一个目的是提供一种新型冠状病毒T细胞抗原表位肽。
[0010]本专利技术的第二个目的是提供一种新型冠状病毒T细胞抗原表位肽的编码基因。
[0011]本专利技术的第三个目的是提供一种新型冠状病毒T细胞抗原表位肽组合物。
[0012]本专利技术的第四个目的是提供一种pMHC复合物。
[0013]本专利技术的第五个目的是提供一种抗原肽
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抗原递呈细胞复合物。
[0014]本专利技术的第六个目的是提供所述的抗原表位肽、新型冠状病毒T细胞抗原表位肽的编码基因、所述的新型冠状病毒T细胞抗原表位肽组合物、所述的pMHC复合物、和所述的抗原肽
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抗原递呈细胞复合物中的一种或几种在制备新型冠状病毒疫苗中的应用。
[0015]本专利技术的第七个目的是提供所述的抗原表位肽、新型冠状病毒T细胞抗原表位肽的编码基因、所述的新型冠状病毒T细胞抗原表位肽组合物、所述的pMHC复合物、和所述的抗原肽
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抗原递呈细胞复合物中的一种或几种在制备新型冠状病毒药物中的应用。
[0016]为了实现上述目的，本专利技术是通过以下方案予以实现的：
[0017]T2
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A2是一种通过重组基因工程技术表达人MHC
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I类分子HLA
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A2的抗原递呈细胞系。只有有效的抗原表位肽才能被其递呈，从而在其细胞表面形成稳定的pMHC复合物，因此可以作为刺激T细胞的人工抗原递呈细胞。
[0018]T细胞抗原表位肽单独无法工作，必须以pMHC复合物或抗原肽
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抗原递呈细胞复合物的方式进行T细胞活化。本专利技术利用MHC的单体和鉴定出的新型冠状病毒T细胞表位进行联合复性，制备了pMHC复合物。将鉴定出的新型冠状病毒T细胞抗原表位肽负荷在抗原递呈细胞表面(T2
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A2细胞)，制备了抗原肽
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抗原递呈细胞复合物，然后用制备好的pMHC复合物去标记T细胞，发现其抗原表位肽可以有效活化健康人外周血中T细胞，并且相对于原始病毒株的抗原表位肽，变异株能增加T细胞的活化能力，也可以有效杀伤携带新型冠状病毒抗原的靶细胞。该T细胞抗原表位肽组装成的带有PE荧光通道的pMHC复合物，可以在新冠疫苗接种者和康复者中均可检测到。证明新发现的新型冠状病毒T细胞抗原表位肽能有效诱导T细胞免疫，避免突变株的免疫逃逸，可以作为通用型疫苗或应用于免疫治疗等。
[0019]因此本专利技术要求一种新型冠状病毒T细胞抗原表位肽，其氨基酸序列如SEQ IDNO:1～9任一所示。
[0020]SEQ ID NO:1：VTWFHAIHV，
[0021]SEQ ID NO:2：VTWFHAISG，
[0022]SEQ ID NO:3：FKLKDCVMYA，
[0023]SEQ ID NO:4：FKLKECVMYA，
[0024]SEQ ID NO:5：YHDVRVVLDFI，
[0025]SEQ ID NO:6：YHDVRVVLI，
[0026]SEQ ID NO:7：ASLPFGWLI，
[0027]SEQ ID NO:8：ASLLFGWLI，
[0028]SEQ ID NO:9：VTWFHVIHV。
[0029]一种新型冠状病毒T细胞抗原表位肽的编码基因，所述编码基因编码所述的新型
冠状病毒T细胞抗原表位肽。
[0030]一种新型冠状病毒T细胞抗原表位肽组合物，含有氨基酸序列如SEQ ID NO：1～9 所示的新型冠状病毒T细胞抗原表位肽中的任意几条。
[0031]一种pMHC复合物，含有所述的新型冠状病毒T细胞抗原表位肽或所述的新型冠状病毒T细胞抗原表位肽组合物。
[0032]优选地，所述pMHC复合物的制备方法为HLA
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A2重链、HLA<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种新型冠状病毒T细胞抗原表位肽，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1～9任一所示。2.一种新型冠状病毒T细胞抗原表位肽的编码基因，其特征在于，所述编码基因编码权利要求1所述的新型冠状病毒T细胞抗原表位肽。3.一种新型冠状病毒T细胞抗原表位肽组合物，其特征在于，含有氨基酸序列如SEQ ID NO：1～9所示的新型冠状病毒T细胞抗原表位肽中的任意几条。4.一种pMHC复合物，其特征在于，含有权利要求1所述的新型冠状病毒T细胞抗原表位肽中或权利要求3所述的新型冠状病毒T细胞抗原表位肽组合物。5.根据权利要求4所述的pMHC复合物，其特征在于，所述pMHC复合物的制备方法为HLA
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A2重链、HLA
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A2轻链β2m和权利要求1所述新型冠状病毒T细胞抗原表位肽复性得到。6.一种抗原肽
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抗原递呈细胞复合物，其特征在于，表面有权利要求1所述的新型冠状病毒T细胞抗原表位肽或权利要求3所述的新型冠状病毒T细胞抗原表位肽组合物的抗原递呈细胞。7.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈国兵，肖潺潺，罗钧洪，王鹏程，高利娟，
申请(专利权)人：暨南大学，
类型：发明
国别省市：