一株皇簇菇菌株制造技术

本发明专利技术公开了一株皇簇菇菌株，所述皇簇菇菌株已进行保藏，保藏单位是中国典型培养物保藏中心；地址位于中国武汉的武汉大学；保藏日期：2021年6月18日；保藏编号为CCTCC NO：M2021715；用本发明专利技术所述皇簇菇菌株培养得到的皇簇菇（Agrocybe smithii ZOZO

A strain of Pleurotus ostreatus

【技术实现步骤摘要】
一株皇簇菇菌株


[0001]本专利技术涉及微生物
，具体是一株皇簇菇菌株。

技术介绍

[0002]田头菇别名春生田头菇或早生田头菇，在我国华南、华北广泛分布，在北美、欧洲各地亦较为常见。田头菇是一个由至少5种以上的生物学类型组成的种群，包括草腐型、针叶木腐型、阔叶木腐型和城市生境型等。我国田头菇属菌类资源丰富，具有独特的口感风味，以及丰富的营养成分，较高的药用价值和商品价值。优良的菌种能提高田头菇的质量，大大提高其营养价值，但是现在市面销售的田头菇中基本检测不到维生素D的存在，同时无法进一步提高田头菇中氨基酸的含量。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的在于克服现有技术的不足，提供一株皇簇菇菌株，以至少达到提高其维生素D、钙含量及氨基酸含量，进一步提高其营养价值。
[0004]本专利技术的目的是通过以下技术方案来实现的：本专利技术从任意一种田头菇属的组织分离获得，对其进行鉴定，该菌株命名为田头菇属ZOZO
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B皇簇菇(Agrocybe smithiiZOZO
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B皇簇菇)，属于粪锈伞科(Bolbitiacea)，田头菇属(Agrocybe)；于2021年6月 11日，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M2021715。
[0005]所述皇簇菇菌株由田头菇经过试管培养基斜面培养得到，具体的培养方法包括以下步骤：
[0006]A1：选取一株七成熟的田头菇属菌株，其后用无菌水冲洗3次后备用；
[0007]A2：将步骤A1中清洗后的菌株用75％的酒精浸泡7S；
[0008]A3：用无菌纱布擦干步骤A2中浸泡后的菌株表面的酒精及水分；
[0009]A4：将步骤A3中擦干后的菌株通过烟雾灭菌剂灭菌15min；
[0010]A5：取出步骤A4中灭菌后的菌株置于超净工作台上，用解剖刀剖开菌株，在菌柄与菌盖的交界处挑出0.1mm的菌块；
[0011]A61：选取新鲜土豆去皮洗净后切片，向切好的200g土豆片中加入50g任意一种或多种蘑菇，同时加入500g桑树枝，将所述土豆片、蘑菇和桑树枝加入容器中；
[0012]A62：向步骤A61中所述的容器中加纯净水直至淹没所述土豆片、蘑菇和桑树枝，其后进行加热，煮沸后继续保持煮沸状态0.5h；
[0013]A63：将步骤A62最终得到的产物过滤，取1L滤液备用；
[0014]A64：向步骤A63中所述滤液中加入20g琼脂、20g蜂蜜、10g葡萄糖、1个鸡蛋黄、0.5g 磷酸二氢钾和0.5g硫酸镁；
[0015]A65：将步骤A64中得到的最终产物装入试管中，灭菌后得到试管培养基；
[0016]A7：将步骤A5中挑出的菌块在步骤A65中得到的试管培养基中进行培养，其后选取无污染的培养后得到的菌株连续纯化3次，得到皇簇菇菌株。
[0017]本专利技术的有益效果是：用该菌株培养得到的皇簇菇(Agrocybe smithii ZOZO
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B皇簇菇)营养价值高，含有丰富的维生素、氨基酸及微量元素，尤其是维生素D及钙含量特别高，维生素D含量达44.1μg/100g，钙含量高达78.5mg/kg；且重金属含量符合GB 3762
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2017食品安全国家标准食品中污染物限量。
具体实施方式
[0018]下面进一步详细描述本专利技术的技术方案，但本专利技术的保护范围不局限于以下所述。
[0019]实施例
[0020]本专利技术从任意一种田头菇属的组织分离获得，该菌株命名为田头菇属ZOZO
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B皇簇菇(Agrocybe smithii ZOZO
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B皇簇菇)，属于粪锈伞科(Bolbitiacea)，田头菇属(Agrocybe)；于2021年6月18日，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M2021715；所述皇簇菇菌株由田头菇经过试管培养基斜面培养得到，具体的培养方法包括以下步骤：
[0021]A1：选取一株七成熟的田头菇属菌株，其后用无菌水冲洗3次后备用；
[0022]A2：将步骤A1中清洗后的菌株用75％的酒精浸泡7S；
[0023]A3：用无菌纱布擦干步骤A2中浸泡后的菌株表面的酒精及水分；
[0024]A4：将步骤A3中擦干后的菌株通过烟雾灭菌剂灭菌15min；
[0025]A5：取出步骤A4中灭菌后的菌株置于超净工作台上，用解剖刀剖开菌株，在菌柄与菌盖的交界处挑出0.1mm的菌块；
[0026]A61：选取新鲜土豆去皮洗净后切片，向切好的200g土豆片中加入50g任意一种或多种蘑菇，同时加入500g桑树枝，将所述土豆片、蘑菇和桑树枝加入容器中；
[0027]A62：向步骤A61中所述的容器中加纯净水直至淹没所述土豆片、蘑菇和桑树枝，其后进行加热，煮沸后继续保持煮沸状态0.5h；
[0028]A63：将步骤A62最终得到的产物过滤，取1L滤液备用；
[0029]A64：向步骤A63中所述滤液中加入20g琼脂、20g蜂蜜、10g葡萄糖、1个鸡蛋黄、0.5g 磷酸二氢钾和0.5g硫酸镁；
[0030]A65：将步骤A64中得到的最终产物装入试管中，灭菌后得到试管培养基；
[0031]A7：将步骤A5中挑出的菌块在步骤A65中得到的试管培养基中进行培养，其后选取无污染的培养后得到的菌株连续纯化3次，得到皇簇菇菌株。
[0032]对本专利技术涉及的皇簇菇菌株进行鉴定，鉴定步骤如下：
[0033]1、皇簇菇DNA的提取
[0034]S1：从平板上刮取样品置于2ml离心管，加入200μl缓冲液GA，振荡至菌体彻底悬浮；
[0035]S2：向管中加入20μl Proteinase K溶液，混匀；
[0036]S3：加入220μl缓冲液GB,振荡15sec，70℃放置10min至溶液变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠；
[0037]S4：加220μl无水乙醇，充分振荡混匀15sec，此时可能会出现絮状沉淀，简短离心以去除管盖内壁的水珠；
[0038]S5：将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中(吸附柱放入收集管中)， 12,000rpm(～13,400
×
g)离心30sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中；
[0039]S6：向吸附柱CB3中加入500μl缓冲液GD(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)， 12,000rpm(～13,400
×
g)离心30sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中；
[0040]S7：向吸附柱CB3中加入600μl漂洗液PW(使用前先检查是否已加入无水乙醇)， 12,000rpm(～13,400...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株皇簇菇菌株，其特征在于：所述皇簇菇（Agrocybe smithii ZOZO
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XW
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B皇簇菇）菌株已...

【专利技术属性】
技术研发人员：林礼，
申请(专利权)人：林礼，
类型：发明
国别省市：