YH66_04585蛋白及其相关生物材料在提高精氨酸产量中的应用制造技术

本发明专利技术公开了YH66_04585蛋白及其相关生物材料在提高精氨酸产量中的应用。本发明专利技术公开的YH66_04585突变体是将YH66_04585蛋白质第44位氨基酸残基由甘氨酸突变为天冬氨酸得到的蛋白质。本发明专利技术首先通过对YH66_04585基因进行单点突变得到YH66_04585

YH66_ Application of 04585 protein and its related biomaterials in improving arginine production

【技术实现步骤摘要】
YH66_04585蛋白及其相关生物材料在提高精氨酸产量中的应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及YH66_04585蛋白及其相关生物材料在提高精氨酸产量中的应用。

技术介绍

[0002]L
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精氨酸是人体和动物体内的半必需氨基酸，不仅是机体蛋白质的组成成分，而且是多种生物活性物质的合成前体。L
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精氨酸参与尿素循环，是生物体尿素循环的一种重要中间代谢物；L
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精氨酸还通过一氧化氮途径影响心血管系统、神经系统和免疫系统；L
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精氨酸在调控繁殖机能和基因表达方面也具有重要作用。在饥饿、创伤或应急状态下，L
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精氨酸就成为一种必需氨基酸。随着人们对L
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精氨酸的生物学功能的不断深入研究和了解，L
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精氨酸在医药食品工业上具有越来越广泛的用途，尤其在营养调控和内分泌调节方面显现出了广泛的应用前景。
[0003]L
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精氨酸的生产方法主要有水解法和发酵法。其中，水解法操作费时、收率低，工艺稳定性不好且环境污染严重，不适于大规模生产。但发酵法克服了蛋白质水解提取法所存在的工艺复杂和污染大等缺点，具有广阔的发展前景。
[0004]目前已被报道的精氨酸生产菌株主要有钝齿棒状杆菌、谷氨酸棒状杆菌、大肠杆菌、酿酒酵母、黄色短杆菌等。虽然已被报道的部分精氨酸生产菌株已经具备了较为优良的发酵性能，但是，鉴于精氨酸重要的应用价值和巨大的市场需求，寻求发酵性能更为优良的精氨酸生产菌株仍然是所有研究开发工作的基础，更是各精氨酸生产厂家增加自身市场竞争力的重中之重。

技术实现思路

[0005]本专利技术的一个目的是提供一种YH66_04585突变体。
[0006]本专利技术提供的YH66_04585突变体是将YH66_04585蛋白质第44位氨基酸残基由甘氨酸突变为其他氨基酸残基得到的蛋白质；
[0007]所述YH66_04585蛋白质为如下A1)
‑
A3)中的任一种：
[0008]A1)SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；
[0009]A2)将A1)所示的氨基酸序列经过除第44位氨基酸残基以外的一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与细菌产精氨酸相关的蛋白质；
[0010]A3)来源于细菌且与A1)或A2)具有95％以上同一性且与细菌产精氨酸相关的蛋白质。
[0011]上述A2)所述的蛋白质中，所述一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加为不超过10个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加。
[0012]上述A3)所述的蛋白质中，这里使用的术语“同一性”指与天然氨基酸序列的序列相似性。“同一性”包括与本专利技术的SEQ ID No.2所示的氨基酸序列具有95％或更高，或96％
或更高，或 97％或更高，或98％或更高，或99％或更高同一性的氨基酸序列。同一性可以用肉眼或计算机软件进行评价。使用计算机软件，两个或多个序列之间的同一性可以用百分比(％)表示，其可以用来评价相关序列之间的同一性。
[0013]上述A1)或A2)或A3)所述的蛋白质可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。
[0014]进一步的，所述YH66_04585突变体是将YH66_04585蛋白质第44位氨基酸残基由甘氨酸突变为天冬氨酸得到的蛋白质(对应本专利技术实施例中的YH66_04585
G131A
蛋白质)。
[0015]更进一步的，所述YH66_04585突变体(YH66_04585
G131A
蛋白质)是SEQ ID No.4所示的氨基酸序列组成的蛋白质。
[0016]本专利技术的另一个目的是提供与YH66_04585突变体相关的生物材料。
[0017]本专利技术提供的与YH66_04585突变体相关的生物材料为如下B1)至B4)中的任一种：
[0018]B1)编码上述YH66_04585突变体的核酸分子；
[0019]B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒；
[0020]B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体、或含有B2)所述表达盒的重组载体；
[0021]B4)含有B1)所述核酸分子的重组微生物、或含有B2)所述表达盒的重组微生物、或含有B3)所述重组载体的重组微生物。
[0022]本专利技术还有一个目的是提供上述YH66_04585蛋白质或与上述YH66_04585蛋白质相关的生物材料或上述YH66_04585突变体或与上述YH66_04585突变体相关的生物材料的新用途。
[0023]本专利技术提供了上述YH66_04585蛋白质或与上述YH66_04585蛋白质相关的生物材料或上述YH66_04585突变体或与上述YH66_04585突变体相关的生物材料在如下X1)至X4) 中任一种中的应用：
[0024]X1)调控细菌精氨酸产量；
[0025]X2)构建产精氨酸工程菌；
[0026]X3)制备精氨酸；
[0027]与YH66_04585蛋白质相关的生物材料为如下D1)至D4)中的任一种：
[0028]D1)编码所述YH66_04585蛋白质的核酸分子；
[0029]D2)含有D1)所述核酸分子的表达盒；
[0030]D3)含有D1)所述核酸分子的重组载体、或含有D2)所述表达盒的重组载体；
[0031]D4)含有D1)所述核酸分子的重组微生物、或含有D2)所述表达盒的重组微生物、或含有D3)所述重组载体的重组微生物。
[0032]上述生物材料或应用中，B1)所述编码YH66_04585突变体的核酸分子为如下C1)或 C2)中的任一种：
[0033]C1)核苷酸序列为SEQ ID No.3的DNA分子；
[0034]C2)将SEQ ID No.3所示的核苷酸序列经过修饰和/或一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加得到的与C1)所示的DNA分子具有90％以上的同一性，且具有相同功能的DNA 分子。
[0035]D1)所述编码YH66_04585蛋白质的核酸分子为如下E1)或E2)中的任一种：
[0036]E1)核苷酸序列为SEQ ID No.1的DNA分子；
[0037]E2)将SEQ ID No.1所示的核苷酸序列经过修饰和/或一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加得到的与E1)所示的DNA分子具有90％以上的同一性，且具有相同功能的DNA分子。
[0038]其中，SEQ ID No.1所示的DNA分子为谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum) CGMCC No.20516中的YH66_04585基因，其编码的YH66_04585蛋白质的氨基酸序列如SEQID No.2所示。在本专利技术中通过引入点突变，得到SEQ ID No.3所示的YH66本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种YH66_04585突变体，是将YH66_04585蛋白质第44位氨基酸残基由甘氨酸突变为其他氨基酸残基得到的蛋白质；所述YH66_04585蛋白质为如下A1)
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A3)中的任一种：A1)SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；A2)将A1)所示的氨基酸序列经过除第44位氨基酸残基以外的一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与细菌产精氨酸相关的蛋白质；A3)来源于细菌且与A1)或A2)具有95％以上同一性且与细菌产精氨酸相关的蛋白质。2.根据权利要求1所述的YH66_04585突变体，其特征在于：所述YH66_04585突变体是将YH66_04585蛋白质第44位氨基酸残基由甘氨酸突变为天冬氨酸得到的蛋白质。3.与权利要求1所述YH66_04585突变体相关的生物材料，所述生物材料为如下B1)至B4)中的任一种：B1)编码权利要求1或2所述YH66_04585突变体的核酸分子；B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒；B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体、或含有B2)所述表达盒的重组载体；B4)含有B1)所述核酸分子的重组微生物、或含有B2)所述表达盒的重组微生物、或含有B3)所述重组载体的重组微生物。4.根据权利要求3所述的生物材料，其特征在于：所述核酸分子为如下C1)或C2)中的任一种：C1)核苷酸序列为SEQ ID No.3的DNA分子；C2)将SEQ ID No.3所示的核苷酸序列经过修饰和/或一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加得到的与C1)所示的DNA分子具有90％以上的同一性，且具有相同功能的DNA分子。5.YH66_04585蛋白质或与YH66_04585蛋白质相关的生物材料或权利要求1所述的YH66_04585突变体或权利要求2所述的生物材料在如下X1)至X4)中任一种中的应用：X1)调控细菌精氨酸产量；X2)构建产精氨酸工程菌；X3)制备精氨酸；所述YH66_04585蛋白质为权利要求1中所述YH66_04585蛋白质；与YH66_04585蛋白质相关的生物材料为如下D1)至D4)中的任一种：D1)编码所述YH66_04585蛋白质的核酸分子；D2)含有D1)所述核酸分子的表达盒；D3)含有D1)所述核酸分子的重组载体、或含有D2)所述表达盒的重组载体；D4)含有D1)所述核酸分子的重组微生物、或含有D2)所述表达盒的重组微生物、或含有D3)所述重组载体的重组微生物。6.提高YH66_04585蛋白质或YH66_04585突变体含量...

【专利技术属性】
技术研发人员：付丽霞，孟刚，赵春光，魏爱英，田斌，贾慧萍，
申请(专利权)人：宁夏伊品生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：