通过序列优化生产稳定性增加的生物治疗药物的方法技术

本发明专利技术涉及以增强的稳定性优化抗体的方法，该方法包括用种系氨基酸残基使体细胞超突变发生突变，并因此提供增强的热稳定性、改善的生物物理特性和保质期，同时保持对抗原的亲和力。和力。和力。

Method of producing biotherapeutic drugs with increased stability through sequence optimization

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】通过序列优化生产稳定性增加的生物治疗药物的方法


[0001]本专利技术涉及优化单克隆抗体的序列以增强其生物物理特性的方法，该生物物理特性包括针对优化的制造的热力学稳定性、体内行为和更长的保质期。

技术介绍

[0002]抗体是由免疫系统产生的保护性应答，通常在暴露于抗原后触发。尽管在抗原暴露后的初级应答中产生的抗体具有较低的亲和力，但已知亲和力可通过称为体细胞免疫球蛋白(Ig)超突变的过程得到改善(Neuberger，M.S.&Milstein，C.Somatic hypermutation.Current opinion in immunology 7，248
‑
254(1995))。该过程涉及免疫球蛋白基因片段的几轮重组；可变(V)、多样性(D)和连接(J)以及导致抗体对抗原具有非常强的亲和力和高选择性的抗体的互补决定区(CDR)中突变集合的积累(Sun，S.B.等人，Mutational analysis of 48G7 reveals that somatic hypermutation affects 本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于优化包含可变重链(VH)和/或可变轻链(VL)的抗体的方法，所述方法包括：a)识别用于优化的抗体；b)识别所述抗体VH和/或VL中的一个或多个异常或低频残基；c)将所述抗体VH和/或VL序列与最接近的人或非人种系序列进行比对；d)识别所述抗体VH、VL或两者中的一个或多个体细胞超突变位点；e)识别通常在所述体细胞超突变位点中的位点处观察到的一个或多个种系残基；f)设计并工程化在所述体细胞超突变位点中的所述位点处含有所述种系残基的变体或变体库；g)评估所述变体或变体库的特性；以及h)选择一个或多个优化变体，其中所述一个或多个优化变体具有改善的生物物理特性、降低的免疫原性风险或两者。2.根据权利要求1所述的方法，其中异常或低频残基的所述识别由基于计算机的软件来完成。3.根据权利要求2所述的方法，其中所述基于计算机的软件是abYsis。4.根据权利要求1所述的方法，其中所述异常或低频残基处于所述抗体VH中。5.根据权利要求1所述的方法，其中所述异常或低频残基处于所述抗体VL中。6.根据权利要求1所述的方法，其中所述异常或低频残基处于所述抗体VH和VL中。7.根据权利要求1所述的方法，其中所述先导抗体在框架区(FR)和/或互补决定区(CDR)中的一个或多个区中含有体细胞超突变。8.根据权利要求1所述的方法，其中工程化变体在所述抗体的人框架区、CDR1、CDR2或CDR3中产生。9.根据权利要求1所述的方法，其中将所述抗体VH和/或VL序列与所述最接近的人种系序列进行比对。10.根据权利要求1所述的方法，其中所述方法还包括克隆并生产所述变体或变体库。11.根据权利要求1所述的方法，其中所述变体或变体库的所述评估是生物物理评估。12.根据权利要求11所述的方法，其中所述生物物理评估是分析超速离心、热稳定性、解折叠自由能、分析尺寸排阻、储存稳定性和/或非特异性结合。13.根据权利要求12所述的方法，其中分析超速离心评估还包括将所述工程化变体的分析超速离心沉降速度(AUC
‑
SV)与所述先导抗体的AUC
‑
SV进行比较。14.根据权利要求12所述的方法，其中热稳定性评估还包括将每个所述工程化变体的热解折叠曲线的Tm与所述先导抗体的...

【专利技术属性】
技术研发人员：S，
申请(专利权)人：詹森生物科技公司，
类型：发明
国别省市：