苹果新品种制造技术

本发明专利技术涉及农作物品种鉴定技术领域，具体涉及苹果新品种

【技术实现步骤摘要】
苹果新品种
‘
秦脆
’
和
‘
秦蜜
’
的分子身份证构建与品种鉴定方法


[0001]本专利技术涉及农作物品种鉴定
，具体涉及苹果新品种
‘
秦脆
’
和
‘
秦蜜
’
的分子身份证构建与品种鉴定方法。

技术介绍

[0002]苹果(Malus domestica Borkh.)是世界性果品，由于其生态适应性强、果品营养价值高、耐贮性好且供应周期长，许多国家都将其列为主要消费果品。2011
‑
2020年，我国苹果种植面积整体保持增长，产量稳定。目前我国苹果种植面积、总产量、人均占有量与出口量均居世界第一，已经成为世界上最大的苹果生产和消费国。然而我国苹果生产中，以
‘
富士
’
系苹果为主的主栽品种生产模式，导致苹果品种比例失调，品种结构组成单一化的问题日趋突出。长此以往，必将影响苹果产业抵御自然灾害的能力，严重影响苹果的产量和品质。同时这也与消费需求多元化趋势相悖。因此为了苹果产业的可持续发展，应将多元化、优化品种作为新品种选育的目标，增加早、中熟品种，满足市场对苹果的多样化消费需求，这也将对调整中国苹果产业构成产生深远的影响。
[0003]苹果新品种
‘
秦脆
’
是以
‘
长富2号
’
为母本，
‘
蜜脆
’
为父本杂交选育，并于2016年12月通过陕西省果树品种审定委员会审定的晚熟品种。
‘
秦蜜
’
与
‘
秦脆
’
同期审定，是在
‘
秦冠
’ב
蜜脆
’
中选育出的中晚熟苹果新品种。
‘
秦脆
’
果实质地脆、汁液多、口感风味俱佳，并且适应性、抗旱耐寒性以及对早期落叶病的抗性均优于母本
‘
长富2号
’
。而
‘
秦蜜
’
品种，克服了父本
‘
蜜脆
’
对肥水条件要求严格，采前落果的问题，且较母本
‘
秦冠
’
的果实质量大幅度提高，果面光洁着色鲜艳，可无套袋栽培。
‘
秦蜜
’
属于中熟品种，
‘
秦脆
’
属于晚熟品种，这在一定程度上可缓解苹果供应期高度集中的问题，起到调整品种结构的作用，另一方面，
‘
秦脆
’
的果实风味口感极佳，符合市场消费者的需求，
‘
秦蜜
’
无套袋栽培，可减少果农的劳动量，节约生产成本。因此，苹果新品种
‘
秦脆
’
和
‘
秦蜜
’
具有广阔的市场前景。然而，对于苹果新品种的准确鉴定是对新品种保护和利用的前提，更是知识产权保护的必要手段。
[0004]DNA分子标记因其可直接反应基因组DNA间的差异，成为种质资源保护、种质鉴别和优良品种选育等研究领域中的一类重要的遗传标记技术。其中，SSR(simple sequence repeat)即简单序列重复，又称为微卫星(microsatellite)，是一类长度在150bp左右，以1～4个核苷酸为基本单位的串联重复序列，是现今流行的分子标记技术之一。SSR标记中的串联重复单位数量的变化主要是由于DNA复制过程中的滑动导致，并且串联重复单位的重复次数在同一物种的不同品种或不同个体中存在较大的差异，从而构成丰富的多态性。SSR标记因具有分布广泛、数量丰富、稳定性好、多态性高、共显性、可实现自动化高通量基因分型检测的特点，目前成为苹果种质资源遗传多样性、基因型鉴定与品种保护、遗传图谱构建、基因定位以及辅助育种选择研究中的理想遗传标记技术。迄今为止，大约有300多个SSR标记从苹果基因组中被开发并发布于HiDRAS网站(http://www.hidras.unimi.it/)。随着基于SSR标记的指纹鉴定技术的日趋完善，构建苹果新品种的二维码分子身份证，对品种的
区别、鉴定和对比提供了技术支持。
‘
秦脆
’
和
‘
秦蜜
’
是2016年12月通过陕西省果树品种审定委员会审定的苹果新品种，为了规范市场并保护育种者的权益，需要对苹果新品种进行科学准确的鉴定。因此利用SSR分子标记通过构建
‘
秦脆
’
和
‘
秦蜜
’
的二维码分子身份证对其品种分子特异性进行鉴定具有良好的应用前景。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于开发一种苹果新品种
‘
秦脆
’
和
‘
秦蜜
’
的分子身份证构建与品种鉴定方法，以解决现有苹果品种难以有效鉴别区分的技术问题，可为苹果新品种
‘
秦脆
’
和
‘
秦蜜
’
的知识产权保护和标准化管理提供新途径。
[0006]本专利技术的第一个方面，提供苹果新品种
‘
秦脆
’
和
‘
秦蜜
’
的分子身份证构建方法，包括以下步骤：
[0007]S1、以
‘
秦脆
’
、
‘
秦蜜
’
的基因组DNA为模板，采用11对核心SSR引物分别进行PCR扩增，得到扩增产物，所述11对核心SSR引物的序列如SEQ ID NO.1
‑
22所示；
[0008]S2、对S1中的PCR产物测序并分析统计不同SSR位点的等位基因信息；
[0009]S3、对S1的11对核心SSR引物进行固定顺序排序；
[0010]S4、对S2中不同SSR位点的等位基因进行分类标识；
[0011]S5、按照S3中的SSR引物排序，对
‘
秦脆
’
、
‘
秦蜜
’
在11个SSR位点上的等位基因信息，按照S4中的等位基因分类标识进行编码和字符串转换，得到的字符串即
‘
秦脆
’
、
‘
秦蜜
’
的分子身份证。
[0012]进一步的，S1中PCR反应体系为：50ng/μL的DNA模板0.6μL，正反向SSR引物各0.8μL，2
×
SanTaq PCR Mix预混液10μL，超纯去离子无菌水补充至20μL；PCR扩增程序为：预变性：94℃
‑
3min；变性：94℃
‑
40s；退火：60本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.苹果新品种
‘
秦脆
’
和
‘
秦蜜
’
的分子身份证构建方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、以
‘
秦脆
’
、
‘
秦蜜
’
的基因组DNA为模板，采用11对核心SSR引物分别进行PCR扩增，得到扩增产物，所述11对核心SSR引物的序列如SEQ ID NO.1
‑
22所示；S2、对S1中的PCR产物测序并分析统计不同SSR位点的等位基因信息；S3、对S1的11对核心SSR引物进行固定顺序排序；S4、对S2中不同SSR位点的等位基因进行分类标识；S5、按照S3中的SSR引物排序，对
‘
秦脆
’
、
‘
秦蜜
’
在11个SSR位点上的等位基因信息，按照S4中的等位基因分类标识进行编码和字符串转换，得到的字符串即
‘
秦脆
’
、
‘
秦蜜
’
的分子身份证。2.根据权利要求1所述苹果新品种
‘
秦脆
’
和
‘
秦蜜
’
的分子身份证构建方法，其特征在于，S1中PCR反应体系为：50ng/μL的DNA模板0.6μL，正反向SSR引物各0.8μL，2
×
SanTaq PCR Mix预混液10μL，超纯去离子无菌水补充至20μL；PCR扩增程序为：预变性：94℃
‑
3min；变性：94℃
‑
40s；退火：60℃
‑
50s；延伸：72℃
‑
1min，从变性到延伸设置32个循环；总延伸：72℃
‑
10min，最后4℃保存。3.根据权利要求2所述苹果新品种
‘
秦脆
’
和
‘
秦蜜
’
的分子身份证构建方法，其特征在于，S2具体为采用毛细管电泳法测序和分析
‘
秦脆
’
、
‘
秦蜜
’...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁微，邹养军，刘玉，商月明，马锋旺，
申请(专利权)人：西北农林科技大学，
类型：发明
国别省市：