一种草地早熟禾谷氨酰胺合成酶基因PpGS1.1启动子的克隆及其应用制造技术

一种草地早熟禾谷氨酰胺合成酶基因PpGS1.1启动子的克隆及其应用，它涉及基因工程领域，本发明专利技术为了填补现有资源中草地早熟禾PpGS1.1启动子序列研究上的空白，以期为改良草地早熟禾氮素吸收与利用能力和提高草地早熟禾的坪用品质奠定基础。本发明专利技术的引物，SP1：5'

【技术实现步骤摘要】
一种草地早熟禾谷氨酰胺合成酶基因PpGS1.1启动子的克隆及其应用


[0001]本专利技术属于生物技术育种领域，具体涉及一种草地早熟禾谷氨酰胺合成酶基因PpGS1.1启动子的克隆和应用。

技术介绍

[0002]草地早熟禾(学名：Poa pratensis L.，英文名：Ken tuckybluegrass)是属禾本科(Gramineae)早熟禾属(Poa L.)的多年生冷季型根茎
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疏丛型禾草，是寒温带地区优良的冷季型草坪草，具有良好的坪用性状和较高的观赏价值。充足的氮素营养是直接影响草坪植物品质的重要因素，作为我国三北区(包括东北、西北和华北)被广泛利用的草坪植物，为保持草地早熟禾草坪的观赏质量需施入大量的氮肥。提高草地早熟禾氮素营养利用效率不但有利于提高其品质和观赏价值，对节约能源、降低污染、保护生态环境也具有重要意义。
[0003]植物转录水平的基因表达调控主要是由启动子及其贡献的顺式作用调控元件(Cis
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Regulatory Elements,CREs)控制。启动子CREs功能的研究对于转基本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种克隆草地早熟禾谷氨酰胺合成酶PpGS1.1基因启动子片段的引物，其特征在于：所述的引物序列如下：SP1：5'
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GCGGCCATGACAAGAATAAGAAG
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3'；SP2：5'
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GCGATGATCTTCTCGGTGGTGT
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3'；SP3：5'
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AGATCGGTGAGGAGCGCCATAA
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3'；SP4：5'
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TCGAACCGATGTACCGTATATGG
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3'。2.采用权利要求1所述的引物获取得到的PpGS1.1基因启动子，其特征在于：所述的PpGS1.1基因启动子片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。3.包含权利要求1所述的引物的试剂盒。4.采用权利要求1所述的引物克隆早熟禾谷氨酰胺合成酶PpGS1.1基因启动子片段的方法，其特征在于：它是按照如下方式进行的：步骤一、提取草地早熟禾的基因组DNA；步骤二、以草地早熟禾的基因组DNA为模板，采用权利要求1所述的引物进行PCR扩增，通过琼脂糖凝胶电泳，回收PCR产物，即得所述的PpGS1.1基因启动子片段。5.根据权利要求4所述的克隆早熟禾谷氨酰胺合成酶PpGS1.1基因启动子片段的方法，其特征在于：所述的PCR扩增是分四轮PCR扩增完成的，具体为：第一轮PCR扩增：以草地早熟禾的基因组DNA为模板，采用简并引物以及SP1作为引物进行扩增；第二轮PCR扩增：取第一轮PCR扩增产物为模板，采用简并引物以及SP2作为引物进行扩增；第三轮PCR扩增：取稀释100倍第二轮PCR扩增产物为模板，采用简并引物以及SP3作为引物进行扩增；第四轮PCR扩增：取稀释100倍第三轮PCR扩增产物为模板，采用简并引物以及SP4作为引物进行扩增...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢福春，李勋，陈雅君，崔国文，秦立刚，胡国富，李冰，张攀，孙晓阳，
申请(专利权)人：东北农业大学，
类型：发明
国别省市：