用于磷酸化的化合物的固相萃取的螯合剂基洗脱液制造技术

本技术涉及一种用于提高磷酸化的化合物(例如，磷酸化的聚糖)的回收率的方法。特别地，本技术利用含某些螯合剂添加剂的溶液从固相萃取柱洗涤和洗脱磷酸化的化合物。萃取柱洗涤和洗脱磷酸化的化合物。萃取柱洗涤和洗脱磷酸化的化合物。

Chelator based eluent for solid phase extraction of phosphorylated compounds

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于磷酸化的化合物的固相萃取的螯合剂基洗脱液
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2019年12月5日提交的美国临时申请序列号62/944,153的权益，该申请的全部内容以引用方式并入本文。


[0003]本公开涉及螯合剂添加剂用于提高化合物，并且特别是磷酸化的聚糖的固相萃取回收率的用途。更具体地，本公开涉及螯合剂添加剂的用途，这些螯合剂添加剂既可溶于水溶液中又可溶于乙腈溶液中，并在洗脱步骤中使用以在固相萃取(SPE)期间获得高收率和无偏差回收率的磷酸化的化合物，包括各种聚糖物质。

技术介绍

[0004]从样品基质中萃取寡糖是许多不同类型分析中的重要步骤。在一个示例中，通过化学或酶法释放连接到蛋白质的寡糖，并且使用液相色谱法剖析所得的所谓的“聚糖”。然而，通常需要在分析之前衍生化所释放的聚糖，以便它们可以通过UV、荧光或质谱进行检测。
[0005]对于这种类型的分析，通常需要通过固相萃取(SPE)萃取寡糖以最大限度地减少对衍生化反应或色谱分离的干扰。使用GlycoWorks RapiFluor
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种执行固相萃取的方法，所述方法包括：将包含聚糖的样品进样到包含固定相的固相萃取柱中，其中所述聚糖被所述固定相保留；以及用浓度介于约1mM至约100mM之间的二价或更高价羧酸洗涤所述固相萃取柱以从所述固相萃取柱洗脱所述聚糖。2.一种执行固相萃取的方法，所述方法包括：将包含聚糖的样品进样到包含固定相的固相萃取柱中，其中所述聚糖被所述固定相保留；以及用浓度介于约1mM至约100mM之间的柠檬酸洗涤所述固相萃取柱以从所述固相萃取柱洗脱所述聚糖。3.根据权利要求2所述的方法，其中所述浓度介于约40mM和60mM之间，以从所述固相萃取柱洗脱所述聚糖。4.一种执行固相萃取的方法，所述方法包括：将包含聚糖的样品进样到包含固定相的固相萃取柱中，其中所述聚糖被所述固定相保留；以及用洗脱溶液洗涤所述固相萃取柱以从所述固相萃取柱洗脱所述聚糖，其中所述洗脱溶液包含(i)用以调节所述洗脱溶液的离子强度的盐和(ii)浓度介于约1mM至约100mM之间的二价或更高价羧酸。5.根据权利要求4所述的方法，其中所述盐选自由以下组成的组：甲酸铵、乙酸铵、甲酸钠、乙酸钠、氯化铵、氯化钠、氯化钾、三乙基乙酸铵和四甲基乙酸铵。6.根据权利要求5所述的方法，其中所述溶液用共溶剂制备，所述共溶剂选自由以下组成的组：乙腈、甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、四氢呋喃、异丙醇。7.一种执行固相萃取的方法，所述方法包括：将包含聚糖的样品进样到包含固定相的固相萃取柱中，其中所述聚糖被所述固定相保留；以及用洗脱溶液洗涤所述固相萃取柱以从所述固相萃取柱洗脱所述聚糖，其中所述洗脱溶液包含(i)用以调节所述洗脱溶液的离子强度的盐和(ii)浓度介于约1mM至约100mM之间的柠檬酸。8.根据权利要求7所述的方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘潇潇，M，
申请(专利权)人：沃特世科技公司，
类型：发明
国别省市：