一种细胞核单层涂片DNA染色试剂盒制造技术

本实用新型专利技术公开了一种细胞核单层涂片DNA染色试剂盒，包括盒体、水解液试剂瓶、DNA染色液试剂瓶、洗脱粉试剂瓶、洗脱A液试剂瓶和洗脱B液试剂瓶，以及具有五个卡位槽的固定部件，所述固定部件可拆卸或不可拆卸地设置于盒体内，前述五个试剂瓶分别被五个所述卡位槽所固定。其中水解液为酸性水解液，DNA染色液的主要成分包括品红，洗脱粉为焦亚硫酸钾或焦亚硫酸钠，洗脱A液为盐酸溶液，洗脱B液为蒸馏水。本实用新型专利技术结构简单、布局合理、取用方便，可用于数字病理扫描分析系统的DNA倍性和核质结构的检测分析。测分析。测分析。

【技术实现步骤摘要】
一种细胞核单层涂片DNA染色试剂盒


[0001]本技术涉及DNA染色试剂，尤其涉及一种细胞核单层涂片DNA染色试剂盒。

技术介绍

[0002]石蜡包埋组织样本是目前最常见的肿瘤病理组织样本，为了对肿瘤性质进行诊断，病理学家通常会从石蜡包埋组织样本中提取DNA或RNA进行分子生物学分析，如单核苷酸多态性分析、DNA倍性分析、RNA表达量分析等。现有研究显示DNA倍性与患者的预后有关联，现有的DNA倍性分析方法主要是通过流式细胞术进行，但是流式细胞术检测获得的DNA倍性定量只是一个数量上的结果，无法对动态的成因给出解释，也无法进一步解释同样的倍数危险程度却可能不同。而事实上细胞核染色质排列紊乱、方向发生改变、增粗、出现裂纹等等都是DNA倍性发生改变的原因，也都对肿瘤的预后有不小的影响。因此，在通过肿瘤细胞DNA变化来评估肿瘤预后时，仅仅关注DNA倍性是不够的，DNA形态结构的变化也应纳入考量范围。此外，用于流式细胞术分析的样本只需要提取DNA即可，而想要保留完整的DNA形态结构则还需要保留完整的细胞核结构并将其进行染色，染色后的细胞核图像应能清晰反映DNA状态，可供数字扫描分析系统识别，因此，在获得了细胞核单层涂片的基础上，还需要一种可快速、高效地对细胞核进行染色的方法及其试剂盒。

技术实现思路

[0003]为实现上述目的，本技术提供了一种细胞核单层涂片DNA染色试剂盒，包括盒体、水解液试剂瓶、DNA染色液试剂瓶、洗脱粉试剂瓶、洗脱A液试剂瓶和洗脱B液试剂瓶，以及具有五个卡位槽的固定部件，所述固定部件可拆卸或不可拆卸地设置于盒体内，前述五个试剂瓶分别被五个所述卡位槽所固定。
[0004]进一步，所述水解液为酸性水解液，优选为盐酸溶液，其浓度为3~7 M。
[0005]进一步，所述DNA染色液的主要成分包括品红，优选为雪芙（Schiff）试剂，该试剂需要2~8℃避光保存，DNA染色液试剂瓶优选为棕色玻璃瓶。
[0006]进一步，所述洗脱粉为焦亚硫酸钾或焦亚硫酸钠。
[0007]进一步，所述洗脱A液为盐酸溶液，所述洗脱B液为蒸馏水。
[0008]优选地，所述试剂瓶为广口瓶，即试剂瓶去掉瓶盖后，开口处的直径不小于瓶体直径的80%，以便于试剂的倾倒。
[0009]优选地，所述固定部件由轻质的抗震材料制成，用于防撞、防移位且方便拿取，其材料可选自泡沫塑料、空心纸板、海绵等。
[0010]在一些实施方式中，固定部件由脆性抗震材料（如泡沫塑料）制成，固定部件可拆卸，其横截面外轮廓与盒体横截面内轮廓的形状大小相同或比其略小（缝隙小于1 mm），略小的轮廓使固定部件容易放入盒体，但不易发生位移；五个所述卡位槽的直径分别与其对应试剂瓶的直径相同或略大（缝隙小于1 mm），略大的直径使试剂瓶易放入卡位槽，但不易发生位移。
[0011]在一些实施方式中，固定部件由柔性的可变形材料（如海绵）制成，固定部件的横截面外轮廓与盒体横截面内轮廓的形状大小相同或比其略大（可变形材料完全抵住盒体，但不发生肉眼可见的形变），五个所述卡位槽的直径分别与其对应试剂瓶的直径相同或略小（可变形材料完全抵住试剂瓶，但不发生肉眼可见的形变），使盒体与固定部件之间、固定部件与试剂瓶之间可通过挤压力、摩擦力来达到相对固定的目的。
[0012]在一些实施方式中，所述固定部件的高度不超过最高的试剂瓶高度的三分之一或四分之一，这样便于试剂瓶的拿取。在另一些实施方式中，所述固定部件的高度超过最矮的试剂瓶高度的四分之三，这样使试剂瓶不易脱出卡位槽，同时便于在固定部件中增设一些耗材的嵌槽。
[0013]可选地，所述卡位槽为通孔或凹槽。
[0014]优选地，所述固定部件的高度为2~5 cm。
[0015]优选地，所述试剂盒内的底面还设置有抗震底垫，该抗震底垫的材料可与固定部件相同或不同。
[0016]优选地，所述固定部件为双层结构。
[0017]在一些实施方式中，所述固定部件为双层结构，设置于盒体内的底部，且上层和下层都具有五个相互对应的作为卡位槽的通孔，这种设计可方便地分别取出五种试剂瓶，双层结构较单层结构（包括厚度与双层结构相同的单层结构）在运输过程中不易脱出卡位槽。
[0018]在另一些实施方式中，所述固定部件为双层结构，上层具有五个作为卡位槽的通孔，下层具有五个对应的作为卡位槽的凹槽，下层可作为底垫使用，同时也起到固定试剂瓶的作用。
[0019]本技术将洗脱液分为洗脱粉、洗脱A液和洗脱B液三种试剂；这三种试剂都为易保存的试剂，但是配制成溶液后则易变质。优选地，洗脱粉为焦亚硫酸钠或焦亚硫酸钾，洗脱A液为1~3 M浓度的盐酸溶液，洗脱B液为蒸馏水，试剂盒在使用时先将焦亚硫酸钠或焦亚硫酸钾溶于蒸馏水中，然后加入稀盐酸溶液调节酸性，该溶液久置于空气中会被氧化生成硫酸钠或硫酸钾。
[0020]由于洗脱B液的使用量最大，因此在一些实施方式中，所述洗脱B液试剂瓶的卡位槽单独设置一行一列，其余四个试剂瓶的卡位槽呈两行两列设置；其余四个试剂瓶可设置在洗脱B液试剂瓶的一边或其周围；所述洗脱B液试剂瓶的直径优选为4~7 cm，高度优选为8~18 cm；优选地，所述洗脱A液试剂瓶的卡位槽和所述洗脱粉试剂瓶的卡位槽同一行或同一列设置，并靠近所述洗脱B液试剂瓶的卡位槽，使三种试剂可方便地一起使用。
[0021]在一些实施方式中，所述DNA染色液试剂瓶的卡位槽设置于中间列，方便操作人员一拿到试剂盒便取出试剂瓶置于2~8℃保存。
[0022]优选地，本技术所述试剂盒除了DNA染色液以外的试剂的保存温度为10~30℃。
[0023]由于医院需要做细胞核分析诊断的病理切片数量较大，因此本试剂盒在设计包装规格时既要考虑拿取方便，又要考虑尽可能地满足样本数量，病理科浸泡玻片的染缸一般可同时浸泡5片涂片，需要50 mL的试剂，即每份涂片样本平均需要10 mL试剂，所以试剂盒中的试剂量可采用5片病理切片为一个计量单位进行包装，对应1份、2份、3份、4份、5份和6份计量单位的水解液和DNA染色液的试剂储量优选为50~100 mL、100~150 mL、150~200 mL、
200~250 mL、250~300 mL和300~350 mL，由于洗脱的步骤需要重复二至三次，因此由洗脱粉、洗脱A液和洗脱B液配制而成的洗脱液的量优选为100~300 mL、200~450 mL、300~600 mL、400~750 mL、500~900 mL和600~1050 mL，可根据洗脱液的配方储备三种试剂。
[0024]进一步，各试剂瓶的尺寸按照试剂储量按比例调整，优选地，其中洗脱B液试剂瓶容量最大，DNA染色液和水解液都是用于浸泡涂片，所以它们试剂瓶的容量相等，洗脱粉或洗脱A液的试剂瓶最小。
[0025]进一步，本技术提供的细胞核单层涂片DNA染色试剂盒还包括盖玻片，所述固定部件内设置若干嵌槽，所述盖玻片采用多片组合包装，放置在所述嵌槽内。所述盖玻片的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种细胞核单层涂片DNA染色试剂盒，其特征在于，包括盒体、水解液试剂瓶、DNA染色液试剂瓶、洗脱粉试剂瓶、洗脱A液试剂瓶和洗脱B液试剂瓶，以及具有五个卡位槽的固定部件，所述固定部件可拆卸或不可拆卸地设置于所述盒体内，前述五个试剂瓶分别被五个所述卡位槽所固定；其中所述DNA染色液试剂瓶为棕色玻璃瓶，所述洗脱B液试剂瓶容量最大，所述洗脱粉试剂瓶或所述洗脱A液试剂瓶容量最小，所述洗脱B液试剂瓶的卡位槽单独设置一行一列，其余四个试剂瓶的卡位槽呈两行两列设置。2.如权利要求1所述的细胞核单层涂片DNA染色试剂盒，其特征在于，所述固定部件由轻质的抗震材料制成。3.如权利要求1所述的细胞核单层涂片DNA染色试剂盒，其特征在于，所述卡位槽为通孔或凹槽。4.如权利要求3所述的细胞核单层涂片DNA染色试剂盒，其特征在于，所述固定部件为双层结构，设...

【专利技术属性】
技术研发人员：童艳铮，董跃进，孙延红，李霖，陆佳益，
申请(专利权)人：梅傲科技广州有限公司，
类型：新型
国别省市：