ApoA5基因敲除仓鼠模型的构建方法技术

本发明专利技术适用于疾病动物模型构建领域，提供了ApoA5基因敲除仓鼠模型的构建方法，包括以下步骤：设计仓鼠ApoA5基因特异性打靶序列，制备cas9mRNA和sgRNA；收集和培养仓鼠受精卵；显微注射：将所述sgRNA和cas9mRNA共同注射至仓鼠受精卵的细胞质中；将显微注射后的受精卵植入代孕仓鼠体内，F0代仓鼠出生。本发明专利技术利用最新的CRISPR/Cas9基因编辑技术在拟人化仓鼠模型上敲除ApoA5基因，构建新型可模拟人类高甘油三酯血症的动物模型，探究ApoA5在高甘油三酯血症与动脉粥样硬化疾病中的作用。酯血症与动脉粥样硬化疾病中的作用。酯血症与动脉粥样硬化疾病中的作用。

Construction method of APOA5 gene knockout hamster model

【技术实现步骤摘要】
ApoA5基因敲除仓鼠模型的构建方法


[0001]本专利技术属于疾病动物模型构建领域，尤其涉及ApoA5基因敲除仓鼠模型的构建方法。

技术介绍

[0002]载脂蛋白A5(apolipoprotein A5，ApoA5)(gene ID：116519；OMIM accession number：606368)是2001年Rubin等人通过比对人和小鼠调控胆固醇和甘油三酯代谢的ApoA1/A5/A4基因簇编码序列时确认的一个载脂蛋白家族新成员，位于人类11号染色体长臂q23区域，ApoA4基因簇下游30kbp位置。该基因全长1889bp，包含4个外显子和3个内含子，其起始密码子在第2外显子上，可编码366个氨基酸残基。人ApoA5蛋白由343个氨基酸组成，分子量约为39kD，呈高疏水性，主要在肝脏合成，极少量来源于小肠。在血浆中，ApoA5存在于乳糜微粒(chylomicron，CM)、LDL和HDL中，但含量很低，约为0.1
‑
0.4mg/mL，仅为血浆ApoB蛋白含量的千分之一。
[0003]早在2001年美国研究人员本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.ApoA5基因敲除仓鼠模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、设计仓鼠ApoA5基因特异性打靶序列，制备cas9 mRNA和sgRNA；步骤二、收集和培养仓鼠受精卵；步骤三、显微注射：将所述sgRNA和cas9 mRNA共同注射至仓鼠受精卵的细胞质中；步骤四、将显微注射后的受精卵植入代孕仓鼠体内，F0代仓鼠出生。2.根据权利要求1所述的ApoA5基因敲除仓鼠模型的构建方法，其特征在于，在步骤一中，ApoA5基因特异性打靶序列为：GCAACCACTCAGGCGCGGAA。3.根据权利要求1或2所述的ApoA5基因敲除仓鼠模型的构建方法，其特征在于，在步骤二中，交配17
‑
20小时后取卵。4.根据权利要求3所述的ApoA5基因敲除仓鼠模型的构建方法，其特征在于，在步骤二中，使用M2培养基作为取卵...

【专利技术属性】
技术研发人员：冼勋德，王宇辉，黄薇，张玲，
申请(专利权)人：北京大学，
类型：发明
国别省市：