禽呼肠孤病毒微滴数字PCR检测引物组合物及其检测方法技术

技术编号:34039056 阅读:49 留言:0更新日期:2022-07-06 13:01
本发明专利技术公开了禽呼肠孤病毒微滴数字PCR检测引物组合物及其检测方法,属于微生物的测定或检验方法技术领域。本发明专利技术提供检测或辅助检测禽呼肠孤病毒的引物及探针组合物,所述引物及探针组合物包括禽呼肠孤病毒引物探针,所述禽呼肠孤病毒引物探针由特异扩增含有核苷酸序列是SEQ ID No.1的DNA片段在内的禽呼肠孤病毒基因组DNA片段的引物和与核苷酸序列是SEQ ID No.1的DNA片段特异结合的探针组成。本发明专利技术提供的用于检测禽呼肠孤病毒的引物及探针组合物具有高度的灵敏性,检测线可为10copies

Primer composition and detection method for avian reovirus micro drop digital PCR detection

【技术实现步骤摘要】
禽呼肠孤病毒微滴数字PCR检测引物组合物及其检测方法


[0001]本专利技术属于微生物的测定或检验方法
,具体涉及禽呼肠孤病毒微滴数字PCR检测引物组合物及其检测方法。

技术介绍

[0002]禽呼肠孤病毒(Avian reovirus,ARV)是呼肠孤病毒科(Reoviridae),正呼肠孤病毒属(Orthoreovirus)的双链RNA病毒,能够引起禽类病毒性关节炎、腱鞘炎、免疫抑制等疾病。ARV在商品禽类中极其常见,其大部分毒株无致病性,但和其他病原微生物混合感染将会造成严重的后果,在病死鸡中一般都能分离出ARV。因此对于ARV的防控检测尤为重要。
[0003]微滴数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)具有灵敏度强、准确度高、可绝对定量且快速等优点。目前ddPCR已广泛应用在基因突变、病原微生物、转基因食品、肿瘤相关基因检测等多方面,尚未见该技术应用在检测ARV病毒的报道。

技术实现思路

[0004]本专利技术要解决的技术问题是如何快速、准确的检测样品是否感染禽呼肠孤病毒。
[本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.检测或辅助检测禽呼肠孤病毒的数字PCR试剂或试剂盒,所述数字PCR试剂或试剂盒包括禽呼肠孤病毒引物探针,所述禽呼肠孤病毒引物探针由特异扩增含有核苷酸序列是SEQ ID No.1第472

551位的DNA片段在内的禽呼肠孤病毒基因组DNA片段的引物和与核苷酸序列是SEQ ID No.1第472

551位的DNA片段特异结合的探针组成。2.如权利要求1所述的数字PCR试剂或试剂盒,其特征在于:所述禽呼肠孤病毒引物探针包括引物ARV

F和引物ARV

R、探针ARV

Probe,所述引物ARV

F为核苷酸序列是序列表中SEQ ID No.2的单链DNA或其衍生物;所述引物ARV

R为核苷酸序列是序列表中SEQ ID No.3的单链DNA或其衍生物;所述探针ARV

Probe的核苷酸序列是序列表中SEQ ID No.4。3.如权利要求1或2所述的数字PCR试剂或试剂盒,其特征在于:所述ARV

F、ARV

R、ARV

Probe的物质的量比值为4:4:1。4.如权利要求1

3中任一项所述的数字PCR试剂或试剂盒,其特征在于:所述数字PCR试剂或试剂盒还包括阳性标准品质粒。5.如权利要求4所述的数字PCR试剂或试剂盒,其特征在于:所述阳性标准品质粒包括核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的DNA分子。6.检测或辅助检测禽呼肠孤病毒的组合物,所述组合物包括禽呼肠孤病毒引物探针,所述禽呼肠孤病毒引物探针由特异扩增含有核苷酸序列是SEQ ID No.1第472

551位的DNA片段在内的...

【专利技术属性】
技术研发人员:谢芝勋万丽军王盛任红玉谢丽基谢志勤邓显文范晴罗思思张艳芳黄娇玲曾婷婷张民秀
申请(专利权)人:广西壮族自治区兽医研究所
类型:发明
国别省市:

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