里氏木霉纤维素酶转录抑制因子70351的应用及提高纤维素酶表达量和酶活的方法技术

本发明专利技术涉及农业生物技术领域，具体涉及里氏木霉纤维素酶转录抑制因子70351的应用及提高纤维素酶表达量和酶活的方法。本发明专利技术提供的这种纤维素酶表达相关的转录抑制因子70351对于纤维素酶活性表达具有调节作用，通过构建该基因的敲除质粒，并用其转化宿主菌，在宿主菌中敲除转录抑制因子70351的表达可提高宿主菌的蛋白表达量和纤维素酶酶活。本发明专利技术丰富了里氏木霉纤维素酶的转录调控网络，为提高纤维素酶产量，降低纤维素酶成本，实现纤维素有效利用提高了新途径。用提高了新途径。用提高了新途径。

【技术实现步骤摘要】
里氏木霉纤维素酶转录抑制因子70351的应用及提高纤维素酶表达量和酶活的方法


[0001]本专利技术涉及农业生物
，具体涉及里氏木霉纤维素酶转录抑制因子70351的应用及提高纤维素酶表达量和酶活的方法。

技术介绍

[0002]丝状真菌里氏木霉具有强大的分泌纤维素酶的能力，其混合发酵液中，纤维二糖水解酶的表达占胞外总分泌蛋白的50%以上。然而，纤维素酶的高成本仍然是纤维素生物炼制的主要瓶颈之一，因此需要继续开发新的方法，以提高纤维素酶的表达，降低应用成本。
[0003]在里氏木霉中，纤维素酶的表达受多个调控途径的影响。其中，调控主要发生在转录水平，包括主要激活因子Xyr1、ACE2、ACE3、Vib1和Hap2/3/5，抑制因子Cre1、ACE1、Rce1和Rce2等多个转录因子的协同调控。目前，已经有几篇关于对转录抑制因子敲除提高纤维素酶表达的研究。例如，转录因子cre1是里氏木霉的碳代谢阻遏转录抑制因子，科研学者通过同源重组的方法敲除了里氏木霉EU7
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22的转录抑制因子cre1，在诱导或者抑制性碳源培养条件下本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提高里氏木霉纤维素酶的表达量和酶活的方法，其特征在于，所述方法包括敲除里氏木霉转录抑制因子70351的步骤，所述里氏木霉转录抑制因子70351编码氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示的蛋白质。2.根据权利要求1所述的提高里氏木霉纤维素酶的表达量和酶活的方法，其特征在于，所述里氏木霉转录抑制因子70351的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。3.根据权利要求1所述的提高里氏木霉纤维素酶的表达量和酶活的方法，其特征在于，通过构建里氏木霉转录抑制因子70351的敲除质粒并将其导入里氏木霉中，实现敲除里氏木霉转录抑制因子70351。4.根据权利要求3所述的提高里氏木霉纤维素酶的表达量和酶活的方法，其特征在于，所述里氏木霉转录抑制因子70351的敲除质粒为转录抑制因子70351的donor质粒和转录抑制因子70351的sgRNA质粒。5.根据权利要求4所述的提高里氏木霉纤维素酶的表达量和酶活的方法，其特征在于，所述转录抑制因子70351的donor质粒...

【专利技术属性】
技术研发人员：苏小运，孙先花，姚斌，罗会颖，王晓璐，秦星，王苑，涂涛，柏映国，于会民，黄火清，张红莲，王亚茹，
申请(专利权)人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：