一种脱水式热暴露实验的建立方法技术

本发明专利技术提供了一种脱水式热暴露实验的建立方法，包括以下操作步骤：S1、选取研究对象；S2、将研究对象分组；S3、造模；S4、获取研究对象的生理指标；S5、取材和样本收集保存用于做相关实验研究；S6、样本和数据分析。本发明专利技术方法设计巧妙合理，能建立完整有效的脱水式热暴露动物模型，可为深入研究热环境对机体的损伤与影响提供动物模型，也为高温从业人员预防热损伤提供理论支撑。提供理论支撑。提供理论支撑。

【技术实现步骤摘要】
一种脱水式热暴露实验的建立方法


[0001]本专利技术涉及一种实验方法，具体涉及一种脱水式热暴露实验的建立方法。

技术介绍

[0002]随着全球气候变暖的到来，高温环境已成为对人类健康影响不可忽略的因素。高温引起的最常见的疾病就是中暑，中暑分三种类型，即热射病，热痉挛，热衰竭。长时间暴露于高温环境，能够引起机体核心温度上升，如头晕、头痛、胸闷、气短，易引发循环系统如心血管等方面的疾病，严重者引起中枢神经功能紊乱，甚至死亡。许多破坏性的热浪导致了重大的公共卫生后果。据2020年在对我国130个县进行分析时，热浪第一天和第二天至第三天的总死亡风险分别增加11.7％和17.0％。世界卫生组织评估，气候的变化会导致在2030年
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2050年中每年约25000人额外死亡。高温能够威胁机体健康，而在全球变暖的大环境下，与高温相关疾病的发生率与死亡率也越来越引起人们的重视。
[0003]据报道，全球近一半的人口和超过10亿的工人暴露在高温下，约三分之一的工人的身体健康会受到负面影响。长期暴露于高温环境下的工作人员以及高温下训练或作战的军人，热应激就是其中的危险之一，脱水和体温过高是人们在高温环境下经常经历的主要生理应激源。脱水式热暴露就是在热暴露的基础上没有及时给予水分的补充。但目前还没有针对脱水式热暴露进行动物模型的完善建立，则获取的热应激理论都缺乏科学试验佐证，因此急需设计一种如完整、有效、科学的脱水式热暴露动物模型。

技术实现思路

[0004]本专利技术所要解决的技术问题在于针对上述现有技术的不足，提供一种脱水式热暴露实验的建立方法，该方法科学合理，操作简便，可为深入研究热环境对机体的损伤与影响提供动物模型，也为高温从业人员预防热损伤提供理论支撑。
[0005]为解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案是：一种脱水式热暴露实验的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：
[0006]S1、选取研究对象：选用5
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6周龄、体重为180
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220g的SPF级的雄性SD大鼠为研究对象；
[0007]S2、将研究对象分组：将S1中选取的研究对象随机分为空白对照组、热暴露组和脱水式热暴露组三个大组，每个大组均分为三个亚组；
[0008]S3、造模；
[0009]S4、获取三大组研究对象的生理指标：检测获取研究对象的食物消耗量、饮水消耗量、体重增加量、血压、心率、学习记忆能力和海马体和尼氏体神经元形态，确定对研究对象影响变化最大的时间点即脱水式热暴露最佳时间点；
[0010]优选地，所述S2中空白对照组、热暴露组和脱水式热暴露组三个大组分别按1d、4d和7d分为三个亚组，每个亚组十只大鼠。S4中通过水迷宫检测大鼠的学习记忆能力，通过H&E染色和Nissl染色检测大鼠的海马体和尼氏体神经元形态。
[0011]S3中造模的具体操作为：
[0012]将作为研究对象的所有大鼠进行5d的适应性喂养，对大鼠进行分笼饲养，每笼饲养大鼠不超过5只，保持笼内垫料清洁干净，保证所有大鼠均可自由饮食饮水，饲养环境温度为24
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0.1℃，用12h的明亮光照条件和 12h的黑暗光照条件模拟白天和黑夜；
[0013]空白对照组的大鼠均不做任何处理，且该组大鼠可自由饮食饮水，温度为24℃；
[0014]热暴露组的大鼠每天在人工气候舱中暴露8h，具体为8:00
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16:00，期间可自由饮食饮水，保持人工气候舱中温度为32℃；
[0015]脱水式热暴露组的大鼠每天在人工气候舱中暴露8h，具体为 8:00
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16:00，期间禁止饮食饮水，保持人工气候舱中温度为32℃。
[0016]优选地，所述S4中测量饮水消耗量的具体方式为：每天早上热应激前计算前一天大鼠的饮水消耗量，直至造模结束，得到最终各组每只大鼠的饮水消耗量，每次测量均重复三次，以平均数作为每只大鼠饮水消耗量的记录值；测量所述食物消耗量的具体方式为：每天早上热应激前计算前一天大鼠的食物消耗量，直至造模结束，得到最终各组每只大鼠的食物消耗量，每次测量均重复三次，以平均数作为每只大鼠食物消耗量的记录值；测量所述体重增长量的具体方式为：在造模前称取每只大鼠的体重，相应时间点造模结束后再称取大鼠最终体重，重复测量三次，计算每组平均每只大鼠的体重增长量；测量血压和心率的具体方式为：打开计算机内血压和心率数据测量软件，设置相应参数如组别，编号；连接好大鼠无创血压仪的外部装置，调好血压仪的温度，使大鼠处于干净舒适的环境中，开始测量前保持环境安静，适应环境约30min；将大鼠的前半身置于合适大小的大鼠套头网中，并包裹固定大鼠的后半身于泡沫板上，待大鼠状态平稳后鼠尾穿过尾动脉检测孔，开始测量大鼠的收缩压、平均动脉压、舒张压和心率；每只大鼠重复测量三次，取平均值记录为最终测量值，在整个测量过程中，保持环境安静。
[0017]优选地，使用水迷宫检测大鼠的学习记忆能力的具体操作：
[0018]S4001、仪器准备：水迷宫包括圆形不透明水池、素色遮光窗帘、红外摄像和图像采集数据分析系统Smart3.0，其中圆形不透明水池直径为120cm、高度为50cm，水池外带有恒温加热设备，令水池水温保持在18
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22 ℃，红外摄像头位于水池的正上方；
[0019]S4002、将圆形水池划分为4个象限，分别在水池的周围贴上圆形、方形、三角形、菱形来标记，同时在对应三角形的第三象限的中间位置放置一直径为10cm的圆柱形平台，在水池中倒入墨水；
[0020]S4003、打开计算机Smart3.0图像分析系统，设置好圆形水池的区域，并调节亮度和对比度，当大鼠放进入水池中时，排出环境内除大鼠外其他任何噪点产生，设置预放鼠时间为3秒，开始记录时间为1min，当大鼠在圆柱形上平台停留3秒，则停止计时；
[0021]S4004、适应性训练：将大鼠放入行为学实验室，提前适应环境30分钟，将每只大鼠依次放入圆形水池，观察是否能自由游泳，排除有无游泳障碍；
[0022]S4005、定位航行实验：进行定位航行实验的第一天使圆柱形平台顶面高出水面1
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2厘米，大鼠提前适应环境30min，所有大鼠均从第一象限入水，记录其到圆柱形平台的时间，若大鼠一分钟内无法到达圆柱形平台，帮助其引导至圆柱形平台并停留5秒，第一象限入水后再依次从第二象限、第三象限、第四象限入水；第二天至第五天，将圆形平台顶面隐于水下1
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2 厘米，将所有大鼠依次从四个象限入水，记录每只大鼠四个象限到达平台的平
均时间作为逃避潜伏期；
[0023]S4006、空间探索实验：进行定位巡航实验后撤去平台，记录1min内每只大鼠在平台所在象限的停留时间和穿过平台次数。
[0024]本专利技术与现有技术相比具有以下优点：
[0025]1、本专利技术的实验科学合理，操作简便，成本低廉，可为深入研究热环境对机体本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种脱水式热暴露实验的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、选取研究对象：选用5
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6周龄、体重为180
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220g的SPF级的雄性SD大鼠为研究对象；S2、将研究对象分组：将S1中选取的研究对象随机分为空白对照组、热暴露组和脱水式热暴露组三个大组，每个大组均分为三个亚组；S3、造模；S4、获取三大组研究对象的生理指标：检测获取研究对象的食物消耗量、饮水消耗量、体重增加量、血压、心率、学习记忆能力、海马体和尼氏体神经元形态，确定对研究对象影响变化最大的时间点即脱水式热暴露最佳时间点。2.根据权利要求1所述的一种脱水式热暴露实验的建立方法，其特征在于，S2中所述空白对照组、热暴露组和脱水式热暴露组三个大组分别按1d、4d和7d分为三个亚组，每个亚组十只大鼠。3.根据权利要求1所述的一种脱水式热暴露实验的建立方法，其特征在于，S4中通过水迷宫检测研究对象的学习记忆能力，通过H&E染色和Nissl染色检测研究对象的海马体和尼氏体神经元形态。4.根据权利要求1所述的一种脱水式热暴露实验的建立方法，其特征在于，S3中所述造模之前，将作为研究对象的所有大鼠进行5d的适应性喂养，对大鼠进行分笼饲养，每笼饲养大鼠不超过5只，保持笼内垫料清洁干净，保证所有大鼠均可自由饮食饮水，饲养环境温度为24
±
0.1℃，用12h的明亮光照条件和12h的黑暗光照条件模拟白天和黑夜；所述造模的具体过程为：空白对照组的大鼠均不做任何处理，且该组大鼠可自由饮食饮水，饲养环境的温度为24℃；热暴露组的大鼠每天在人工气候舱中暴露8h，具体为8:00
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16:00，期间可自由饮食饮水，保持人工气候舱中温度为32℃；脱水式热暴露组的大鼠每天在人工气候舱中暴露8h，具体为8:00
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16:00，期间禁止饮食饮水，保持人工气候舱中温度为32℃。5.根据权利要求1所述的一种脱水式热暴露实验的建立方法，其特征在于，S4中测量饮水消耗量的具体记录方式为：每天早上热应激前计算前一天大鼠的饮水消耗量，直至造模结束，得到最终各组每只大鼠的饮水消耗量，每次测量均重复三次，以平均数作为每只大鼠饮水消耗量的记录值；测量所述食物消耗量的具体记录方式为：每天早上热应激前计算前一天大鼠的食物消耗量，直至造模结束，得到最终各组每只...

【专利技术属性】
技术研发人员：薛姝婧，徐涛，侯玲，朱玲勤，李光华，
申请(专利权)人：宁夏医科大学，
类型：发明
国别省市：