一种抗禽流行性感冒病毒转移因子的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种体外制备抗禽流行性感冒病毒特异性转移因子的制备方法。本发明专利技术以鸡脾脏或外周血为原料，制成淋巴细胞单层，然后用植物血凝素和禽流行性感冒病毒诱导培养淋巴细胞，体外生产抗禽流行性感冒病毒特异性转移因子。本发明专利技术所制备的特异性转移因子可以用于预防和治疗禽流行性感冒，同时可以提高鸡自身的免疫力。本发明专利技术具有特异性强、成本低、效果好等优点，是一种较为理想的抗禽流行性感冒病毒转移因子制备方法。转移因子制备方法。

【技术实现步骤摘要】
一种抗禽流行性感冒病毒转移因子的制备方法


[0001]本专利技术涉及兽药领域，更具体的说，是一种抗禽流行性感冒病毒转移因子的制备方法。

技术介绍

[0002]它是由甲型流感病毒的一种亚型（也称禽流感病毒）引起的一种急性传染病，也能感染人类，被国际兽疫局定为甲类传染病，又称真性鸡瘟或欧洲鸡瘟。人感染后的症状主要表现为高热、咳嗽、流涕、肌痛等，多数伴有严重的肺炎，严重者心、肾等多种脏器衰竭导致死亡，病死率很高，通常人感染禽流感死亡率约为33%。此病可通过消化道、呼吸道、皮肤损伤和眼结膜等多种途径传播，区域间的人员和车辆往来是传播本病的重要途径。近年来还出现新亚型流感病毒H7N9，目前国内外都没有针对H7N9禽流感病毒的疫苗，给社会公共安全造成极大的危害。因此，寻找一种治疗禽流感的特效药成为近年来的研究热点。转移因子(Transfer factor, TF)是T淋巴细胞释放的一种能够转移致敏信息的可透析小分子物质
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多肽核苷酸复合物，它能够特异地将供体的细胞免疫信息转移给受体正常的淋巴细胞，从而增强受体的免疫功能。可以抵抗真菌、病毒本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种体外制备抗禽流行性感冒病毒特异性转移因子的制备方法，其特征在于，按照以下步骤进行：（1）无菌环境下采取鸡脾脏，用外周血制备淋巴细胞单层，无菌静脉采取动物全血10
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30ml，加0.8%肝素溶液0.2m1抗凝，静置30
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60min，用带胶球吸管吸取红细胞层以上的所有血浆，特别是紧接红细胞层上的白细胞层要尽量吸取，分装于消毒离心管内，用PBS (pH为7.2)液反复洗涤2
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3次，离心速度1000
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1800转/分，然后用含30%犊牛血清水解乳蛋白40ml进行白细胞培养，混合均匀后分装于容量100ml细胞培养瓶中，塞紧瓶塞，置37℃细胞培养箱中，经2
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3天，白细胞均匀贴壁，即制成淋巴细胞单层；（2）对所制备的淋巴细胞单层进行传代培养，显微镜下观察（1）中所制备的淋巴细胞单层，确认其生长状态良好即可进行细胞的传代培养；（3）病毒的提纯：将禽流行性感冒病毒接种于7
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9日龄的鸡胚尿囊腔内，37℃培养24
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120h增值病毒，将收集的尿囊液反复冻融三次后，超声破碎处理，离心，取沉淀，根据病毒粒子的大小利用密度梯度高速离心，离心速度10000
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【专利技术属性】
技术研发人员：刘鼎阔，刘芳，李源，
申请(专利权)人：鼎正新兴生物技术天津有限公司，
类型：发明
国别省市：