一种基因编辑系统及其应用技术方案

本发明专利技术提供了一种基因编辑系统及其应用。其中，基因编辑系统包括基因编辑元件和改造内含子，改造内含子为包含多顺反子tRNA

【技术实现步骤摘要】
一种基因编辑系统及其应用


[0001]本专利技术涉及植物基因编辑领域，具体而言，涉及一种基因编辑系统及其应用。

技术介绍

[0002]基因编辑技术是可以在基因组目的区域高效而且精确的进行修饰，对于农作物的遗传改良和功能基因研究具有重要应用价值。近年来，以CRISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR associated 9)为代表的基因组编辑系统已成功在多种动物、植物和细菌中得到应用。然而，在很多植物中，基因编辑效率仍然比较低，严重限制了其应用范围。
[0003]提高基因编辑元件表达量是一种重要的提高基因编辑效率的方法。CRISPR/Cas9由tracrRNA/crRNA异源RNA二聚体和Cas9蛋白组成，其中tracrRNA和crRNA可以工程化改造为单一的sgRNA，便于其应用(Jinek et al.，2012)。在双子叶植物中，通常使用烟草花叶病毒35S启动子表达Cas9基因，使用U6启动子表达sgRNA。通过改变Cas9本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基因编辑系统，其特征在于，所述基因编辑系统包括基因编辑元件和改造内含子，所述改造内含子为包含多顺反子tRNA
‑
gRNA的内含子；利用所述改造内含子，增强所述基因编辑元件的表达；所述基因编辑元件包括Cas效应蛋白和CRISPR重复序列；所述CRISPR重复序列由所述多顺反子tRNA
‑
gRNA加工而成。2.根据权利要求1所述的基因编辑系统，其特征在于，所述基因编辑系统还包括AtGRF5基因或AtGRF5表达盒；优选地，所述AtGRF5基因或AtGRF5表达盒，和所述改造内含子同时表达；优选地，所述AtGRF5基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示；优选地，所述AtGRF5表达盒包括以5
’
至3
’
端顺序排列的第一启动子、所述AtGRF5基因和第一终止子；优选地，所述第一启动子包括UBQ10；优选地，所述第一终止子包括Hsp；优选地，所述AtGRF5表达盒包括SEQ ID NO：11所示的核苷酸序列，或编码SEQ ID NO：48所示氨基酸序列的核苷酸序列。3.根据权利要求1或2所述的基因编辑系统，其特征在于，所述Cas效应蛋白包括Cas9、Cas12或Cas13；优选地，所述CRISPR重复序列包括crRNA、tracrRNA或者sgRNA。4.根据权利要求1所述的基因编辑系统，其特征在于，所述改造内含子中含有所述多顺反子结构，所述多顺反子结构由第一tRNA、sgRNA、第二tRNA从5'至3'端顺次连接组成；优选地，所述多顺反子结构中还包括酶切位点，所述酶切位点位于所述第一tRNA和所述sgRNA之间，或位于所述第...

【专利技术属性】
技术研发人员：张华伟，潘文波，
申请(专利权)人：北京大学现代农业研究院，
类型：发明
国别省市：