西拉菌素在制备治疗冠状病毒感染性疾病的药物的用途制造技术

本发明专利技术提供一种从穿山甲中分离的冠状病毒，命名为穿山甲冠状病毒xCoV，其与SARS

【技术实现步骤摘要】
西拉菌素在制备治疗冠状病毒感染性疾病的药物的用途
[0001]本申请为2021年02月08日提交的，专利技术名称为“穿山甲冠状病毒xCoV及其应用和药物抗冠状病毒感染的应用”的中国专利申请202110172158.7的分案申请。


[0002]本专利技术属于药物领域，具体涉及一种穿山甲冠状病毒xCoV及其用于抗SARS
‑
COV
‑
2病毒药物的筛选的用途，包含该穿山甲冠状病毒xCoV的药物筛选模型、药物筛选方法，还涉及基于该xCoV筛选出的活性化合物用于制备治疗SARS
‑
COV
‑
2病毒感染性疾病的药物的用途。

技术介绍

[0003]新型冠状病毒(被世界卫生组织命名为“SARS
‑
COV
‑
2”，先前命名为2019新型冠状病毒或2019nCoV)属于β属冠状病毒，有包膜，颗粒呈圆形或椭圆形，常为多形性，直径60
‑
140nm。其基因特征与SARS
‑
CoV和MERS
‑
CoV有明显区别。目前研究显示其与蝙蝠SARS样冠状病毒(bat
‑
SL
‑
CoVZC45)同源性达85％以上。SARS
‑
CoV
‑
2的防治迫切需要有效的疫苗和特异性治疗，如何快速筛选能够抑制该病毒复制的药物成为迫在眉睫的问题。同时，由于该病毒的传染性极强，如何安全地进行药物筛选等相关研究、保护研究人员不受感染也成为亟待解决的问题。

技术实现思路

[0004]本专利技术人从海关查获的死亡的穿山甲中分离并培养的一株新型冠状病毒xCoV，称为穿山甲冠状病毒xCoV(在本专利技术的上下文中也称为“穿山甲xCoV”或者“xCoV”)，其全基因组序列分析结果显示与SARS
‑
COV
‑
2的S蛋白同源性达92.5％，是迄今为止成功分离培养的与SARS
‑
COV
‑
2的S蛋白同源性最高的病毒。进一步实验显示穿山甲xCoV感染细胞的受体与SARS
‑
COV
‑
2一致，均为血管紧张素转化酶2(ACE2)。但是该病毒不感染人，因此，对人而言是非常安全的。
[0005]本专利技术提供一种冠状病毒(也称为“穿山甲冠状病毒xCoV”、“穿山甲xCoV”或者“xCoV”)，该冠状病毒毒株xCoV于2020年2月14日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，保藏编号为CGMCC No.19295。
[0006]根据本专利技术的穿山甲冠状病毒毒株xCoV，其全基因组核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示。
[0007]根据本专利技术的穿山甲冠状病毒毒株xCoV，其S基因的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:2所示。
[0008]根据本专利技术的穿山甲冠状病毒毒株xCoV，其S蛋白的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:3所示。
[0009]根据本专利技术的穿山甲冠状病毒毒株xCoV，其与SARS
‑
COV
‑
2的S蛋白同源性达
92.5％。其中，所述SARS
‑
COV
‑
2的S基因的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:4所示，其S蛋白的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:5所示。
[0010]其中，xCoV与SARS
‑
COV
‑
2的序列一致性结果在图1中示出。
[0011]本专利技术还提供所述穿山甲冠状病毒毒株xCoV的应用，其用于抗SARS
‑
COV
‑
2病毒的活性药物的筛选与评价，抗SARS
‑
COV
‑
2病毒的疫苗的筛选与评价，以及用于制备抗SARS
‑
COV
‑
2病毒的减毒疫苗或灭活疫苗，以及用于SARS
‑
COV
‑
2病毒感染的诊断和治疗性抗体的制备。其中所述疫苗中还包括药学上可接受的佐剂。
[0012]本专利技术还提供一种用于筛选和/或评价抗冠状病毒活性药物的药物筛选模型，其包括所述保藏编号为CGMCC No.19295的冠状病毒(也称为“穿山甲冠状病毒xCoV”、“冠状病毒xCoV”、“穿山甲xCoV”或者“xCoV”)。
[0013]根据本专利技术的药物筛选模型，其为采用所述穿山甲冠状病毒xCoV感染的哺乳动物细胞，优选Vero E6细胞(非洲绿猴肾细胞)。
[0014]根据本专利技术的药物筛选模型，其中所述模型优选用于筛选和/或评价有抗SARS
‑
CoV
‑
2病毒活性的药物。
[0015]本专利技术还提供一种筛选和/或评价抗冠状病毒活性药物的方法，其采用上述药物筛选模型进行；优选地，该方法用于筛选和/或评价有抗SARS
‑
CoV
‑
2活性的药物。
[0016]根据本专利技术的筛选和/或评价抗冠状病毒活性药物的方法，其包括步骤(1)：向所述药物筛选模型中加入待测试的药物并进行培养。
[0017]根据本专利技术的筛选和/或评价抗冠状病毒活性药物的方法，其在步骤(1)之后还任选地包括以下步骤(2a)或步骤(2b)，或同时包含步骤(2a)和步骤(2b)：
[0018]步骤(2a)：在显微镜下观察细胞病变；
[0019]步骤(2b)：测定细胞和上清中的病毒核酸。
[0020]根据本专利技术的筛选和/或评价抗冠状病毒活性药物的方法，步骤(1)中的培养时间可以为12
‑
90小时，如24
‑
72小时，48
‑
72小时，24小时，48小时或72小时等。
[0021]在步骤(2a)中，当观察到存在完整的细胞单层或细胞病变不明显时，表明待测试的药物具有抑制病毒复制的活性。
[0022]此外，本专利技术还提供以下化合物中的任一种、两种或三种用于制备治疗冠状病毒感染性疾病的药物的用途：千金藤素(千金藤碱)、西拉菌素、盐酸甲氟喹和甲氟喹。
[0023]根据本专利技术的用途，所述冠状病毒为SARS
‑
COV
‑
2病毒。
[0024]此外，本专利技术还通过Time
‑
of
‑
Addition试验发现了千金藤素、西拉菌素和盐酸甲氟喹对xCoV病毒生命周期的影响，并通过转录组学分析解释了千金藤素抑制xCoV病毒复制的机理。
[0025]有益效果
[0026]本专利技术的穿山甲冠状病毒xCoV与SARS
‑
COV
‑
2的S蛋白同源性高，xCoV感染细胞的受体与SARS
‑
COV
‑本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.西拉菌素用于制备治疗冠状病毒感染性疾病的药物的用途。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述冠...

【专利技术属性】
技术研发人员：童贻刚，范华昊，宋立华，安小平，王立钦，刘文丽，刘振东，
申请(专利权)人：北京化工大学，
类型：发明
国别省市：