基于微流体聚集的鱼肉鲜度检测纸基芯片的制作及应用制造技术

本发明专利技术提供了一种基于微流体聚集鱼肉鲜度检测纸基芯片的制作和检测方法,该利用不同分子量的多糖逐层修饰于硝酸纤维素膜，修饰后的硝酸纤维素膜具备膜多孔结构

【技术实现步骤摘要】
基于微流体聚集的鱼肉鲜度检测纸基芯片的制作及应用


[0001]本专利技术涉及纸基检测
，具体而言，特别涉及一种基于微流体聚集的鱼肉鲜度检测纸基芯片的制作及应用。

技术介绍

[0002]鱼肉是所有肉类中最容易消化的，消化继而被人体吸收的转化率能够达到90％。鱼肉中蛋白质的含量较高，且容易被人体所消化吸收。鱼肉还含有人体所需的不同种类氨基酸，其中亮氨酸和赖氨酸是人体需求最多鱼中含有量也丰富的两大氨基酸。鱼肉中的脂肪含量相对较低，含量只在1％
‑
10％，大大低于牲畜肉。鱼肉中的脂肪也是很容易被人们消化吸收的，它呈中性，人们的消化率接近百分之百。鱼肉中的无机盐含量和种类均比较丰富，含量比畜肉多十到五十倍之间，种类也高达十种以上。此外鱼肉中还含有大量的人体必不可少的微量元素。因此，鱼肉的营养价值非常高。
[0003]鱼类新鲜度的检测关系到鱼制品的安全卫生和营养程度等各个方面，在鱼制品的加工生产流通消费过程中均非常重要。合适的标志物选择对水产品质量评价具有重要的意义。次黄嘌呤作为一种重要的生物碱，是三磷酸腺苷（ATP）的主要本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于微流体聚集鱼肉鲜度检测纸基芯片的制作方法，其特征在于,具体包括以下步骤：S1、配制纸基芯片的所需要的修饰液M：S11、显色液配制：称取0.096 g 3,3
’
,5,5
’‑
四甲基联苯胺（TMB）粉末，溶于1 mL的DMSO溶解，配制成浓度为400 mM的TMB母液，稀释为60
‑
100mM备用；S12、辣根过氧化物酶（HRP）母液配制：将HRP溶于磷酸盐缓冲液（PBS，20 mM，pH=7.4），配制5000 U/mL的母液，继续稀释为20
‑
100 U/mL备用；S13、修饰液M配制：将壳聚糖寡糖乳酸（COL）溶液、显色液和25 U/mL HRP溶液按照N：1：1（体积比，N=3
‑
8）的比例混合均匀；S2、配制纸基芯片的所需要的修饰液N：S21、黄嘌呤氧化酶（XOD）溶液配制：将XOD溶于磷酸盐缓冲液（PBS，20 mM，pH=7.4），配制100
‑
500 U/mL的酶液；S22、修饰液N配制：将300 U/mL的XOD溶液与1wt%壳聚糖溶液按照等体积比例混合均匀；S3、纸基裁剪：将纸基材料裁剪成1.5 cm * 1.5 cm的正方形作为芯片的纸基；S4、第一步修饰：吸取0.7 μL修饰液M滴加于NC膜上，室温下干燥2 min；S5、第二步修饰：干燥后再取1 μL修饰液N滴加于刚刚修饰的位点上，室温下干燥1.5 min，即可完成修饰；S6、按照同样S3
‑
S4的方法，单个纸基上至多可以修饰4个检测位点；S7、纸基芯片的预包装：将制作完成的纸基芯片5个一组装进6 cm*10 cm的铝箔真空包装袋中，用抽真空机进行抽真空处理和热塑封；S8、储存：将包装好的纸基芯片放置于4 ℃的冰箱中储存备用。2.根据权利要求1所述的一种基于微流体聚集鱼肉鲜度检测纸基芯片的制作方法,其特征在于,所述步骤S13中的壳聚糖寡糖乳酸（COL）溶液的配制为称取0.2
‑
0.3 g 的COL粉末（5
‑
10 kDa），加入9.8 mL水和0.2 mL 乙酸，50 ℃下搅拌加热10 min，至壳聚糖寡糖乳酸溶解。3.根据权利要求1所述的一种基于微流体聚集鱼肉鲜度检测纸基芯片的制作方法,其特征在于,所述步骤S22中的1wt%壳聚糖溶液的配制为称取0.05
‑
0.1 g壳聚糖溶液粉末（100
‑
300 kDa），加入9.8 m...

【专利技术属性】
技术研发人员：王秀丹，郭琛，魏曼曼，王依琳，张潇匀，
申请(专利权)人：青岛科技大学，
类型：发明
国别省市：