用于细胞层制备的网制造技术

描述了用于产生细胞或颗粒的单层阵列的方法和装置，其可用于高通量细胞分选和分析或其他颗粒分选应用。描述了一种细胞装载系统，该系统包括具有多个开口的多孔网，该多个开口以随机或重复图案跨表面布置。该多孔网用于制备在网上或网内以二维构型分布且间隔开的靶颗粒(例如，细胞)层。该网中的多个开口中的每个被配置为当含有靶颗粒的流体被分配到网的表面上时接收并允许靶颗粒穿过。表面上时接收并允许靶颗粒穿过。表面上时接收并允许靶颗粒穿过。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于细胞层制备的网
交叉引用
[0001]本申请要求于2019年9月10日提交的美国临时专利申请号62/898,357的权益，该申请通过引用整体并入本文。

技术介绍

[0002]例如美国专利申请公开号2018/0353960 A1中所述的颗粒分选装置可以包括多个微通道，用于当包含细胞或颗粒悬浮液的流体被分配到装置上时在其中接收多个细胞或颗粒。流体可以以平面构型在装置上流动。在将细胞转移到微通道中期间，一些细胞可能无法定位到微通道内的所需位置。例如，细胞可能被定位和固定在微通道的近端而不是远端。在一些情况下，微通道可能混杂有两个或更多个细胞，这可能会影响随后从微通道中释放细胞。在其他情况下，由于细胞聚集在微通道的开口处，微通道可能不含有任何细胞。因此，需要一种方法和装置，其能够生成所分布细胞或颗粒的单层阵列以便与细胞分选装置一起使用，该方法和装置可以提高通量细胞分选和分析或其他颗粒分选应用的产量和可靠性。

技术实现思路

[0003]本文所述的装置和方法可以至少解决上述需求。本文公开了一种颗粒装载系统，包括：具有多个开口的多孔网，所述多个开口以重复图案跨所述网的表面布置，其中所述表面包括第一表面和与所述第一表面相对的第二表面，其中所述网用于制备在所述网上以二维构型分布且间隔开的靶颗粒的层，以及其中所述网的所述多个开口中的每个被配置为当含有靶颗粒的流体被分配到所述网的所述第一表面上时接收并允许所述靶颗粒穿过。
[0004]在一些实施方案中，所述重复图案包括交叉影线(cross
‑
hatch)图案。在一些实施方案中，所述多个开口中的每个被配置为在给定情况下接收并允许不超过一个靶颗粒从所述网的所述第一表面穿过到所述第二表面。在一些实施方案中，所述靶颗粒的层通过所述流体与所述多个开口之间的表面张力保持在一起。在一些实施方案中，所述靶颗粒的层包括在所述网上以所述二维构型分布且间隔开的一个或多个细胞单层。在一些实施方案中，所述系统还包括：流体分布设备，所述流体分布设备被配置为与所述网的所述第二表面接触，其中所述接触将所述流体分布在所述多个开口的远端以帮助制备所述靶颗粒的层。在一些实施方案中，所述流体分布设备被配置为使所述靶颗粒的层在所述流体的层中保持在一起。在一些实施方案中，所述流体分布设备被配置为跨所述网的所述第二表面从所述网的一端平移到所述网的相对端。在一些实施方案中，所述网的所述第二表面被配置为沿着所述流体分布设备从所述网的一端平移到所述网的相对端。在一些实施方案中，所述流体分布设备与所述网的所述第二表面之间的接触力在约0.01N至约0.03N的范围内。在一些实施方案中，所述流体分布设备包括选自半圆柱形辊、圆柱形辊和刮刀的散布元件。在一些实施方案中，所述网由柔性材料制成。在一些实施方案中，当含有所述靶颗粒的所述流体被分配到所述网的所述第一表面上时，所述网由支撑框架保持张力。在一些实施方案中，取决于(1)分配到所述网的所述第一表面上的所述流体的体积和(2)由所述支撑框架提供的所述
网内的所述张力，所述网能够弯曲不同的量。在一些实施方案中，所述系统还包括：一个或多个分配端口，所述一个或多个分配端口耦合至所述支撑框架并被配置为在所述网的一个或多个边缘处分配含有所述靶颗粒的所述流体。在一些实施方案中，所述一个或多个分配端口被配置为在所述网的选定边缘处分配含有所述靶颗粒的所述流体。在一些实施方案中，所述网被配置为当含有所述靶颗粒的所述流体被分配到所述网上时以倾斜角倾斜。在一些实施方案中，所述网以所述倾斜角倾斜，以使含有所述靶颗粒的所述流体通过毛细作用克服重力跨所述网移动。在一些实施方案中，所述流体通过所述毛细作用跨所述网的所述移动帮助减少所述靶颗粒的所述层内的气泡。在一些实施方案中，所述倾斜角限定在所述网的所述选定边缘与水平面之间，并且在约2度至约10度的范围内。在一些实施方案中，所述多个开口中的每个具有约30μm的直径。在一些实施方案中，所述多个开口中的所述开口以约0.01mm至1mm的边到边距离间隔开。在一些实施方案中，所述网被配置为放置在用于检测和分选所述靶颗粒的盒附近。在一些实施方案中，所述网的所述第二表面被配置为与所述盒对准。在一些实施方案中，所述系统还包括：转移设备，所述转移设备被配置为将所述靶颗粒的层从所述网转移到所述盒内的多个微通道。在一些实施方案中，所述转移设备包括真空抽吸元件。
[0005]本文还公开了一种颗粒装载方法，包括：提供具有多个开口的多孔网，所述多个开口以重复图案跨所述网的表面布置，其中所述表面包括第一表面和与所述第一表面相对的第二表面；以及将含有多个靶颗粒的流体分配到所述网的所述第一表面上，从而使含有所述靶颗粒的所述流体跨所述网流动以在所述网上形成以二维构型分布并间隔开的靶颗粒的层，其中所述网的所述多个开口中的每个被配置为接收并允许靶颗粒穿过。在一些实施方案中，所述靶颗粒是细胞。援引并入
[0006]本说明书中提及的所有出版物、专利和专利申请均通过引用以其整体并入本文，其程度如同每个单独的出版物、专利或专利申请被具体和单独地指出通过引用以其整体并入。如果本文中的术语与并入参考文献中的术语发生冲突，则以本文中的术语为准。
附图说明
[0007]在所附权利要求中具体阐述了本专利技术的新颖特征。通过参考阐述了说明性实施方案的以下详细描述和附图将获得对本专利技术的特征和优点的更好理解，在所述说明性实施方案中利用了本专利技术的原理，在附图中：
[0008]图1示出了本公开内容的多孔网装置的示意性截面图。
[0009]图2A示出了包含支撑框架的原型网装置的照片。
[0010]图2B示出了多孔网装置中孔的不同示例性图案。
[0011]图3图示了如美国专利申请公开号2018/0353960 A1中所述的用于分选细胞或颗粒的微通道板装置的组件。
[0012]图4图示了使用本公开内容的多孔网装置将细胞分离成单层，然后可以将其转移到微通道板装置。
[0013]图5图示了悬浮在微通道内的流体中的单个细胞。
[0014]图6图示了使用本公开内容的多孔网装置来分离细胞。
[0015]图7表示本公开内容的多孔网装置的性能。
具体实施方式
[0016]本文描述了用于制备单独的细胞或其他颗粒的层的基于网的装置及其使用方法和系统。在一些情况下，该装置可以包括具有多个孔或开口的多孔的、基本上呈平面的网(或膜)，该多个孔或开口以随机或重复图案跨网(或膜)的表面布置，其中该孔跨越网的厚度并且与网的顶(或第一)表面和底(或第二)表面流体连通。通过将流体跨网的顶表面分配和/或散布并允许毛细作用填充孔，可以将包含细胞悬浮液或其他颗粒悬浮液的流体装载到网上。在一些情况下，可以调整孔的尺寸使得仅单个细胞或颗粒可以通过孔。由于细胞或颗粒悬浮液因毛细作用吸入到网装置的多个孔中，以分布方式在网的底表面上或内形成分离的、间隔开的、单独的细胞或颗粒的二维层。在一些情况下，所形成的分离的、间隔开的、单独的细胞或颗粒的层可以包括分离的、间隔开的单个细胞或颗粒的二维本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种颗粒装载系统，包括：具有多个开口的多孔网，所述多个开口以重复图案跨所述网的表面布置，其中所述表面包括第一表面和与所述第一表面相对的第二表面，其中所述网用于制备在所述网上以二维构型分布且间隔开的靶颗粒的层，并且其中所述网的所述多个开口中的每个开口被配置为：当含有所述靶颗粒的流体被分配到所述网的所述第一表面上时，接收并允许所述靶颗粒穿过。2.根据权利要求1所述的系统，其中所述重复图案包括交叉影线图案。3.根据权利要求1所述的系统，其中所述多个开口中的每个开口被配置为：在给定情况下接收并允许不超过一个靶颗粒从所述网的所述第一表面穿过到所述第二表面。4.根据权利要求1所述的系统，其中所述靶颗粒的层通过所述流体与所述多个开口之间的表面张力保持在一起。5.根据权利要求1所述的系统，其中所述靶颗粒的层包括在所述网上以所述二维构型分布且间隔开的一个或多个细胞单层。6.根据权利要求1所述的系统，还包括：流体分布设备，所述流体分布设备被配置为与所述网的所述第二表面接触，其中所述接触将所述流体分布在所述多个开口的远端以帮助制备所述靶颗粒的层。7.根据权利要求6所述的系统，其中所述流体分布设备被配置为使所述靶颗粒的层在所述流体的层中保持在一起。8.根据权利要求6所述的系统，其中所述流体分布设备被配置为跨所述网的所述第二表面从所述网的一端平移到所述网的相对端。9.根据权利要求6所述的系统，其中所述网的所述第二表面被配置为沿着所述流体分布设备从所述网的一端平移到所述网的相对端。10.根据权利要求6所述的系统，其中所述流体分布设备与所述网的所述第二表面之间的接触力在约0.01N至约0.03N的范围内。11.根据权利要求6所述的系统，其中所述流体分布设备包括选自半圆柱形辊、圆柱形辊和刮刀的散布元件。12.根据权利要求1所述的系统，其中所述网由柔性材料制成。13.根据权利要求12所述的系统，其中当含有所述靶颗粒的所述流体被分配到所述网的所述第一表面上时，所述网由支撑框架保持张力。14.根据权利要求13所述的系统，其中取决于(1)分配到所述网的所述第一表面上的所述流体的体积和(2)由所述支撑框架提供的所述网内的所述张力，所述网能够弯曲不同的量。15...

【专利技术属性】
技术研发人员：潘琼，赛义德，
申请(专利权)人：浩康生物系统公司，
类型：发明
国别省市：