具有4-氨基苯甲酸羟化活性的多肽及其用途制造技术

本发明专利技术提供具有优异的4

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】具有4
‑
氨基苯甲酸羟化活性的多肽及其用途


[0001]本专利技术涉及具有4
‑
氨基苯甲酸羟化活性的多肽及其用途。

技术介绍

[0002]聚苯并噁唑(PBO)已知能够作为耐热性和力学强度优异的工程塑料被用于纤维材料和半导体元件的绝缘膜等(非专利文献1)。
[0003]苯并噁唑骨架通过邻氨基苯酚骨架与羧酸的缩合而生成。因此，期待分子内具有这些官能团的4
‑
氨基
‑3‑
羟基苯甲酸(4,3
‑
AHBA)类作为PBO单体是有用的。实际上，研究了使用4,3
‑
AHBA的聚苯并噁唑的合成和物性评价(非专利文献2)。
[0004]近年来，面向减轻地球环境负荷等，以可再生能源为原料而利用微生物发酵的化合物制造方法备受瞩目。例如，进行了具有与4,3
‑
AHBA类似结构的3
‑
氨基
‑4‑
羟基苯甲酸(3,4
‑
AHBA)利用微生物的生产和聚合物化的研究(专利文献1)。
[0005]关于4,3
‑
AHBA的制造，迄今为止已知以化学方式将硝基芳香族还原而进行合成的方法等(专利文献2)。作为能够利用微生物法进行4,3
‑
AHBA发酵生产的策略，可以考虑将能够在微生物内进行生物合成的4
‑
氨基苯甲酸(4
‑
ABA)的3位羟化，但关于这种反应，仅报道了部分4
‑/>羟基苯甲酸羟化酶具有微弱的活性(非专利文献3、4)。
[0006]专利文献1：日本特许第5445453号公报
[0007]专利文献2：日本特许第3821350号公报
[0008]非专利文献1：村濑浩贵，SENI GAKKAISHI(纤维与工业)，Vol.66，No.6(2010)
[0009]非专利文献2：Lon J.Mathias et al.，Macromolecules，Vol.18，No.4，pp.616
‑
622(1985)
[0010]非专利文献3：Barrie Entsch et al.The Journal of Biological Chemistry，Vol.262，No.13，pp.6060
‑
6068(1987)
[0011]非专利文献4：Domenico L.Gatti et al.，Biochemistry，Vol.35，No.2，pp.567
‑
578(1996)

技术实现思路

[0012]本专利技术涉及以下的1)～7)。
[0013]1)一种以下A)～C)所示的具有4
‑
氨基苯甲酸羟化活性的多肽。
[0014]A)其是在序列号2所示的氨基酸序列或与其具有至少47％的同一性的氨基酸序列中序列号2所示的氨基酸序列的47位或与其对应的位置的氨基酸残基为亮氨酸的具有4
‑
氨基苯甲酸羟化活性的多肽。
[0015]B)其是在序列号2所示的氨基酸序列或与其具有至少51％的同一性的氨基酸序列中序列号2所示的氨基酸序列的201位或222位、或者与201位或222位对应的位置的氨基酸残基为苯丙氨酸的具有4
‑
氨基苯甲酸羟化活性的多肽。
[0016]C)其是在序列号2所示的氨基酸序列或与其具有至少90％的同一性的氨基酸序列
中序列号2所示的氨基酸序列的47位、72位、210位、294位或385位、或者与47位、72位、210位、294位或385位对应的位置的氨基酸残基为下列氨基酸的具有4
‑
氨基苯甲酸羟化活性的多肽。
[0017](a)47位或与其对应的位置：异亮氨酸、丝氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、谷氨酰胺，
[0018](b)72位或与其对应的位置：丙氨酸、蛋氨酸，
[0019](c)210位或与其对应的位置：蛋氨酸，
[0020](d)294位或与其对应的位置：丙氨酸、甘氨酸、半胱氨酸、丝氨酸，
[0021](e)385位或与其对应的位置：缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、蛋氨酸。
[0022]2)一种具有4
‑
氨基苯甲酸羟化活性的突变多肽的制造方法，其包括以下A
′
)～C
′
)所示的氨基酸残基的取代。
[0023]A
′
)在由序列号2所示的氨基酸序列或与其具有至少47％的同一性的氨基酸序列构成、且具有4
‑
氨基苯甲酸羟化活性的多肽中，将序列号2所示的氨基酸序列的47位或与其对应的位置的氨基酸残基取代为亮氨酸。
[0024]B
′
)在由序列号2所示的氨基酸序列或与其具有至少51％的同一性的氨基酸序列构成、且具有4
‑
氨基苯甲酸羟化活性的多肽中，将序列号2所示的氨基酸序列的201位或222位、或者与201位或222位对应的位置的氨基酸残基取代为苯丙氨酸。
[0025]C
′
)在由序列号2所示的氨基酸序列或与其具有至少90％的同一性的氨基酸序列构成、且具有4
‑
氨基苯甲酸羟化活性的多肽中，将序列号2所示的氨基酸序列的47位、72位、210位、294位或385位、或者与47位、72位、210位、294位或385位对应的位置的氨基酸残基取代为下列氨基酸。
[0026](a)47位或与其对应的位置：异亮氨酸、丝氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、谷氨酰胺，
[0027](b)72位或与其对应的位置：丙氨酸、蛋氨酸，
[0028](c)210位或与其对应的位置：蛋氨酸，
[0029](d)294位或与其对应的位置：丙氨酸、甘氨酸、半胱氨酸、丝氨酸，
[0030](e)385位或与其对应的位置：缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、蛋氨酸。
[0031]3)一种提升4
‑
氨基苯甲酸羟化活性的方法，其包括以下A
′
)～C
′
)所示的氨基酸残基的取代。
[0032]A
′
)在由序列号2所示的氨基酸序列或与其具有至少47％的同一性的氨基酸序列构成、且具有4
‑
氨基苯甲酸羟化活性的多肽中，将序列号2所示的氨基酸序列的47位或与其对应的位置的氨基酸残基取代为亮氨酸。
[0033]B
′
)在由序列号2所示的氨基酸序列或与其具有至少51％的同一性的氨基酸序列构成、且具有4
‑
氨基苯甲酸羟化活性的多肽中，将序列号2所示的氨基酸序列的201位或222位、或者与201位或222位对应的位置的氨基酸残基取代为苯丙氨酸。
[0034]C
′
)在由序列号2所示的氨基酸序列或与其具有至少90％的同一性的氨基酸序列构成、且本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种具有4
‑
氨基苯甲酸羟化活性的多肽，其由以下A)～C)表示：A)其是在序列号2所示的氨基酸序列或与其具有至少47％的同一性的氨基酸序列中序列号2所示的氨基酸序列的47位或与其对应的位置的氨基酸残基为亮氨酸的具有4
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氨基苯甲酸羟化活性的多肽；B)其是在序列号2所示的氨基酸序列或与其具有至少51％的同一性的氨基酸序列中序列号2所示的氨基酸序列的201位或222位、或者与201位或222位对应的位置的氨基酸残基为苯丙氨酸的具有4
‑
氨基苯甲酸羟化活性的多肽；C)其是在序列号2所示的氨基酸序列或与其具有至少90％的同一性的氨基酸序列中序列号2所示的氨基酸序列的47位、72位、210位、294位或385位、或者与47位、72位、210位、294位或385位对应的位置的氨基酸残基为下列氨基酸的具有4
‑
氨基苯甲酸羟化活性的多肽，(a)47位或与其对应的位置：异亮氨酸、丝氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、谷氨酰胺，(b)72位或与其对应的位置：丙氨酸、蛋氨酸，(c)210位或与其对应的位置：蛋氨酸，(d)294位或与其对应的位置：丙氨酸、甘氨酸、半胱氨酸、丝氨酸，(e)385位或与其对应的位置：缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、蛋氨酸。2.一种具有4
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氨基苯甲酸羟化活性的突变多肽的制造方法，其包括以下A
′
)～C
′
)所示的氨基酸残基的取代：A
′
)在由序列号2所示的氨基酸序列或与其具有至少47％的同一性的氨基酸序列构成、且具有4
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氨基苯甲酸羟化活性的多肽中，将序列号2所示的氨基酸序列的47位或与其对应的位置的氨基酸残基取代为亮氨酸；B
′
)在由序列号2所示的氨基酸序列或与其具有至少51％的同一性的氨基酸序列构成、且具有4
‑
氨基苯甲酸羟化活性的多肽中，将序列号2所示的氨基酸序列的201位或222位、或者与201位或222位对应的位置的氨基酸残基取代为苯丙氨酸；C
′
)在由序列号2所示的氨基酸序列或与其具有至少90％的同一性的氨基酸序列构成、且具有4
‑
氨基苯甲酸羟化活性的多肽中，将序列号2所示的氨基酸序列的47位、72位、210位、294位或385位、或者与47位、72位、210位、294位或385位对应的位置的氨基酸残基取代为下列氨基酸，(a)47位或与其对应的位置：异亮氨酸、丝氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、谷氨酰胺，(b)72位或与其对应的位置：丙氨酸、蛋氨酸，(c)210位或与其对应的位置：蛋氨酸，(d)294位或与其对应的位置：丙氨酸、甘氨酸、半胱氨酸、丝氨酸，(e)385位或与其对应的位置：缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、蛋氨酸。3.一种提升4
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氨基苯甲酸羟化活性的方法，其包括以下A
′
)～C
′
)所示的氨基酸残基的取代：A
′
)在由序列号2所示的氨基酸序列或与其具有至少47％的同一性的氨基酸序列构成、且具有4
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【专利技术属性】
技术研发人员：野中镜士朗，高桥史员，
申请(专利权)人：花王株式会社，
类型：发明
国别省市：