一种基于嵌入特异性核酸酶DNA水凝胶的表面增强拉曼光谱传感器检测链霉素的方法技术

本发明专利技术公开了一种基于嵌入特异性核酸酶DNA水凝胶的表面增强拉曼光谱传感器检测链霉素的方法。传感器的制备方法为：将金纳米棒溶液与CTAB混合后滴涂到基材上得金纳米棒阵列拉曼基底；将DNA的A链和DNA的B链溶液与4

【技术实现步骤摘要】
一种基于嵌入特异性核酸酶DNA水凝胶的表面增强拉曼光谱传感器检测链霉素的方法


[0001]本专利技术涉及食品安全检测
，具体涉及一种基于嵌入特异性核酸酶DNA水凝胶的表面增强拉曼光谱传感器检测链霉素的方法。

技术介绍

[0002]链霉素是一种氨基糖苷类抗生素，通过抑制细菌蛋白质的合成达到治疗细菌感染的目的，广泛应用于畜牧业和农业。然而，过度使用的链霉素会残留在肉类、牛奶、蜂蜜等食品中，长期食用链霉素残留超标的食品可引起严重的耳神经受损与肾损伤。欧盟委员会规定，牛奶和羊奶中链霉素最大残留限量为200μg/L，中国农业部规定蜂蜜中链霉素的最大残留量为20μg/kg。因链霉素的广泛使用和较大的人体危害性，建立一种灵敏的策略来选择性地检测食品中链霉素对食品安全具有重要意义。
[0003]目前，常规的理化检测方法主要有仪器分析法(液相、液质联用、气相、气质联用等)和免疫分析法(酶联免疫检测法、免疫层析法、免疫荧光法以及放射免疫测定法等)。其中仪器分析在相对误差和信号再现性方面有局限性；而实际样品中的复杂基质造成的交叉反应会严重影响免疫分析的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于嵌入特异性核酸酶DNA水凝胶的表面增强拉曼光谱传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将使用种子介导法合成的金纳米棒溶液与CTAB混合后滴涂到预处理过的基材上，再置于培养皿中直至完全干燥，即得金纳米棒阵列拉曼基底；(2)将DNA的A链溶液和DNA的B链溶液与4
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MB溶液混合均匀，加热后缓慢冷却得到DNA水凝胶，将醋酸铅溶液与链霉素适配体混合浸入DNA水凝胶中，得到特异性核酸酶DNA水凝胶；(3)将步骤(2)制备的特异性核酸酶DNA水凝胶滴涂于步骤(1)制备的金纳米棒阵列拉曼基底上，得到基于嵌入特异性核酸酶DNA水凝胶的表面增强拉曼光谱传感器。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述金纳米棒溶液由以下方法制备：将HAuCl4溶液与CTAB溶液混合后加入NaBH4溶液，室温老化得到种子溶液；另取HAuCl4溶液与CTAB溶液混合后，加入硝酸银溶液、盐酸和抗坏血酸溶液，混合均匀后添加种子溶液，然后水浴过夜，离心分散到纯水中，即得金纳米棒溶液。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述预处理过的基材为亲水性硅片、疏水性硅片、镀金硅片和玻璃片；优选的，所述预处理过的基材为镀金硅片。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述DNA的A链溶液为使用HEPES缓冲液稀释DNA的A链底物单体后的溶液，所述DNA的B链溶液为使用HEPES缓冲液稀释DNA的B链底物单体后的溶液；优选的，所述DNA的A链底物单体的序列为5
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TCGAATCTGATATTTTTCATCTCTTCTCCGAGCCGGTCGAAATAGTGATTTTTCTGGTTACCGAC
‑3’
；所述DNA的B链底物单体的序列为5
’‑
TATCAGATTCGATTTTTTCACTATrAGGAAGAGATGTTTTTGTCGGTAACCAG
‑3’
，其中TCACTATrAGGAAGAGATG为核酸酶的序列。5...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐志祥，王汐沫，孙玉奉，陈晨，张瀛方，
申请(专利权)人：山东农业大学，
类型：发明
国别省市：