一种以酪氨酸为底物合成柚皮素的方法技术

本发明专利技术公开了一种以酪氨酸为底物合成柚皮素的方法。利用引入C.glutamicum 13032(DE3)的酪氨酸解氨酶基因TAL、4

【技术实现步骤摘要】
一种以酪氨酸为底物合成柚皮素的方法


[0001]本专利技术属于代谢工程及发酵工程领域，涉及一种对引入了柚皮素合成途径的谷氨酸棒杆菌重组菌株进行发酵方法。

技术介绍

[0002]柚皮素属于天然的二氢黄酮类化合物，具有抗炎、抗氧化、抗癌、抗肿瘤、抗动脉粥样硬化等药理作用，在医药领域具有广阔的应用前景。柚皮素的传统生产方法为植物提取法和化学合成法。工业上主要采用的植物提取法对植物组织原料的需求较大且植物组织中柚皮素的含量较低，使得植物提取法的效率低。此外，提取过程中会产生废水、废渣等大量污染物。而化学合成法由于需在高温高压的苛刻反应条件，且反应产物的纯度和质量会受到副反应的影响，限制了其在工业中的应用。
[0003]相比于传统的柚皮素生产方法，利用微生物合成柚皮素的方法(简称生物合成)由于不依赖于植物组织原料、环境污染小，因而受到更多的关注。在柚皮素的生物合成途径中，一分子柚皮素的合成需要消耗三分子的丙二酰辅酶A，且细胞内丙二酰辅酶A常常维持在较低水平。当前有两种方法可提高丙二酰辅酶A的细胞内含量，一种是利用乙酰辅酶A在乙酰辅酶A羧化酶(AC本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种合成柚皮素的方法，其特征在于：该合成柚皮素的方法包括以下步骤：以酪氨酸和丙二酸钠为底物，并利用在棒状细菌中表达的柚皮素合成关键酶系，由该棒状细菌在发酵过程中对柚皮素进行生物合成；所述关键酶系由酪氨酸解氨酶、4
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香豆酸:辅酶A连接酶、查尔酮合成酶、查尔酮异构酶、丙二酸转运酶和丙二酰辅酶A合成酶组成。2.根据权利要求1所述的合成柚皮素的方法，其特征在于：所述棒状细菌选自含有用于表达酪氨酸解氨酶基因TAL、4
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香豆酸:辅酶A连接酶基因4CL、查尔酮合成酶基因CHS及查尔酮异构酶基因CHI的第一共表达载体和用于表达丙二酸转运酶基因MatC及丙二酰辅酶A合成酶基因MatB的第二共表达载体的棒杆菌属或短杆菌属基因工程菌。3.根据权利要求2所述的合成柚皮素的方法，其特征在于：所述4
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香豆酸:辅酶A连接酶基因4CL来源于欧芹，查尔酮合成酶基因CHS来源于矮牵牛花，查尔酮异构酶基因CHI来源于苜蓿，酪氨酸解氨酶基因TAL来源于深红酵母；丙二酸转运酶基因MatC和丙二酰辅酶A合成酶基因MatB来源于三叶草根瘤菌。4.根据权利要求2所述的合成柚皮素的方法，其特征在于：所述第一共表达载体采用T7启动子，第二共表达载体采用Ptac启动子。5.根据权利要求2所述的合成柚皮素的方法，其特征在于：所述棒状细菌的构建包括以下步骤：将所述第一共表达载体和第二共表达载体转入谷氨酸棒杆菌出发菌株，然后进行抗性筛选，得到可以表达外源酪氨酸解氨酶基因T...

【专利技术属性】
技术研发人员：查健，刘丹，刘婧怡，吴瑕，姚来君，
申请(专利权)人：陕西科技大学，
类型：发明
国别省市：