一种同时检测BVDV和BEV的试剂盒及其应用制造技术

本申请提供一种能够同时检测BVDV和BEV的试剂盒，通过创造性的提出基于BVDV和BEV基因序列的特异性引物和探针，并集合特定的使用方法；试剂盒高灵敏度，可以对低丰度的目的基因进行检测，能够检测出现有技术中无法检测出的低丰度样本；能够直接定量，自动分析出结果，不依赖Ct值，不用建立标准曲线；快速高效、操作简便、重复性好。通过应本申请提供的检测试剂盒，为有效防控BVDV和BEV提供技术支持，能够促进犊牛腹泻病防治，对于养牛业具有巨大的潜在开发价值。发价值。

【技术实现步骤摘要】
一种同时检测BVDV和BEV的试剂盒及其应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种病毒检测试剂盒的
，更具体的涉及一种同时检测牛病毒性腹泻病毒和牛肠道病毒的试剂盒与应用的

技术背景
[0002]牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrheavirus，BVDV)，属于黄病毒科(Flaviviridae)、瘟病毒属(Pestivirus)，是一种有囊膜的单股正链RNA病毒，电镜下观察可见病毒颗粒呈球形，直径约25
‑
30nm。BVDV是1946年在美国最早被发现，后来在英国的牛场也出现了BVDV。我国学者李佑民于1980年从流产胎牛的脾脏中成功分离并鉴定出BVDV，随着我国养牛业快速发展，该病分布广泛，新疆、山东、内蒙古、北京、黑龙江等地均有该病发生的报道。该病毒主要通过持续感染导致肠细胞原发性损伤、易感动物共感染和在隐窝肠细胞中复制、病变两种方式引起犊牛腹泻。还可通过胎盘传播，引发胚胎死亡、流产、免疫耐受、出生缺陷、新生犊牛羸弱。牛病毒性腹泻病症传染性极强，感染该病的宿主范围也愈加本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种同时检测BVDV和BEV的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中含有特异性引物和探针组合，包括以下2对特异性引物和2条特异探针，其核苷酸序列分别为：BVDV上游引物：5
’‑
TCAGGTTAAGATGTGCTTTGGG
‑3’
，BVDV下游引物：5
’‑
CAGGGTAGTCGTCAGTGGTT
‑3’
，BVDV探针：5
’‑
FAM
‑
TGCCCTCGTCCACGTGGCAT
‑
BHQ1
‑3’
；BEV上游引物：5
’‑
CGCAATGGTCAAGCACTTCT
‑3’
，BEV下游引物：5
’‑
GGCCATACTAGGCTTCTCGT
‑3’
，BEV探针：5
’‑
HEX
‑
CGCCCAGCGTCGTTACCCGC
‑
BHQ1
‑3’
。2.如权利要求1中所述的一种用于同时检测BVDV和BEV的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中包括：(1)如权利要求1中所述的两套引物和探针；(2)2
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ddPCR SuperMix forProbes；(3)RNase
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Free ddH2O；(4)待检测样品的cDNA；(5)微滴生成油...

【专利技术属性】
技术研发人员：史慧君，付强，李丹，马雪连，姚刚，杨莉，权冉，葛丽娟，塞力克，
申请(专利权)人：新疆农业大学，
类型：发明
国别省市：