一种双靶向功能的LDL-MLN纳米药物及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种双靶向功能的LDL

【技术实现步骤摘要】
一种双靶向功能的LDL
‑
MLN纳米药物及其应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种双靶向功能的LDL
‑
MLN纳米药物及其应用。

技术介绍

[0002]原发性骨髓纤维化(PMF)是由异常造血细胞增生，过度分泌细胞因子导致造血组织胶原增生从而引起的骨髓增殖性肿瘤(MPN)。其中位生存期为5年，并且有20％转化为急性髓系白血病的可能。
[0003]研究表明，骨髓增殖性肿瘤(MPN)患者体内存在大量未成熟的巨核细胞，该类巨核细胞中蛋白激酶Aurora kinase A(AURKA)的活性升高，靶向AURKA的小分子抑制剂MLN8237能够有效抑制异常巨核细胞的增殖，诱导细胞的分化和凋亡。随后，小分子抑制剂MLN8237进入临床一期实验，单独MLN8237作用于骨髓增殖性肿瘤患者，但仅1/3患者在经历全程治疗后有较好的疾病负担减轻现象，其治疗效果仍有待于进一步提高。
[0004]低密度脂蛋白(low density lipoprotein，LDL)是一种体内存在的天然载脂蛋白，主要在血液循环中承担运输胆固醇的作用。LDL主体结构为外层磷脂单分子层，胆固醇则存在于疏水核心中。在LDL表面还有一个载脂蛋白ApoB
‑
100，这一蛋白能有效识别细胞膜上的LDL受体。LDL通过ApoB
‑
100与细胞表面LDL受体结合进入细胞，在胞内经过溶酶体的降解释放出疏水核心中胆固醇用于细胞的生命活动。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一种双靶向功能的LDL
‑
MLN纳米药物及其应用。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术首先提供了双靶向功能的LDL
‑
MLN纳米药物的新用途。
[0007]本专利技术提供了LDL
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MLN纳米药物在如下1)
‑
8)中任一种中的应用：
[0008]1)制备预防和/或治疗骨髓增殖性肿瘤的产品；
[0009]2)预防和/或治疗骨髓增殖性肿瘤；
[0010]3)制备预防和/或治疗原发性骨髓纤维化的产品；
[0011]4)预防和/或治疗原发性骨髓纤维化；
[0012]5)制备预防和/或治疗急性髓系白血病的产品；
[0013]6)预防和/或治疗急性髓系白血病；
[0014]7)制备抑制肿瘤细胞增殖和/或促进肿瘤细胞分化与凋亡的产品；
[0015]8)抑制肿瘤细胞增殖和/或促进肿瘤细胞分化与凋亡；
[0016]所述LDL
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MLN纳米药物是以LDL颗粒作为药物载体，将小分子抑制剂MLN8237进行包埋后得到的。
[0017]上述应用中，所述LDL颗粒和所述MLN8237的质量比可为1：(0.02
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0.03)，具体可为1：0.025。
[0018]进一步的，所述LDL
‑
MLN纳米药物的制备方法包括如下步骤：
[0019]1)将LDL颗粒与马铃薯淀粉混合，然后冷冻干燥，得到LDL
‑
淀粉混合物；
[0020]2)完成步骤1)后，用庚烷从所述LDL
‑
淀粉混合物中提取内源性脂质，得到提取后产物，然后将MLN溶液与所述提取后产物混合，孵育，得到LDL
‑
MLN混合物；
[0021]所述MLN溶液由甲苯、MLN8237、月桂酸和硬脂酸组成。
[0022]更进一步的，所述1)中，所述LDL颗粒与所述马铃薯淀粉的配比可为1:(10
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15)，具体可为1:12.5。
[0023]所述2)中，所述MLN溶液的溶剂为甲苯，溶质及其浓度分别为MLN8237 0.25mg/mL，月桂酸8mg/mL，硬脂酸2mg/mL。
[0024]用庚烷从所述LDL
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淀粉混合物中提取内源性脂质的次数至少为3次，优选3次。
[0025]所述孵育后还包括在冰浴、氩气条件下去除甲苯的步骤。
[0026]所述方法还包括纯化的步骤。所述纯化的方法可包括如下步骤：将所述LDL
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MLN混合物分散在缓冲液中，离心，收集上清液，然后将所述上清液进行过滤。具体可包括如下步骤：将所述LDL
‑
MLN混合物分散在tricine缓冲液(10mM，pH＝8.4)中，在4℃条件下放置18小时；然后2000rpm离心10分钟，收集初始清液；再将所述初始清液进行两轮10000rpm离心10分钟，收集上清液；最后将所述上清液通过0.22μm无菌过滤器进行过滤。
[0027]上述LDL
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MLN纳米药物也属于本专利技术的保护范围。
[0028]为了实现上述目的，本专利技术还提供了一种产品；所述产品的功能为如下A
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D中任一种：
[0029]A、预防和/或治疗骨髓增殖性肿瘤；
[0030]B、预防和/或治疗原发性骨髓纤维化；
[0031]C、预防和/或治疗急性髓系白血病；
[0032]D、抑制肿瘤细胞增殖和/或促进肿瘤细胞分化与凋亡。
[0033]本专利技术提供的产品的活性成分为上述LDL
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MLN纳米药物。
[0034]上述任一所述应用或产品中，所述肿瘤细胞可为巨核细胞异常导致的肿瘤细胞。
[0035]进一步的，所述巨核细胞异常导致的肿瘤细胞可为骨髓增殖性肿瘤细胞或急性髓系白血病细胞。
[0036]更进一步的，所述骨髓增殖性肿瘤细胞具体可为MPN原代细胞，所述急性髓系白血病细胞具体可为HEL细胞。
[0037]LDL颗粒或LDL蛋白在作为针对异常巨核细胞的药物运输载体中的应用也属于本专利技术的保护范围。
[0038]本专利技术为了提高小分子抑制剂MLN8237的治疗效果，将LDL蛋白作为小分子抑制剂MLN8237的药物载体，设计了一种新型双靶向功能的LDL包埋MLN8237的纳米药物LDL
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MLN，以进一步提高对于异常巨核细胞的靶向性。进一步的，通过将LDL
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MLN纳米药物分别应用于体外和体内实验，检测了LDL
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MLN纳米药物处理后异常巨核细胞的增殖、分化和凋亡水平的变化。结果表明：LDL
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MLN纳米药物可有效抑制HEL细胞和MPN原代细胞增殖、促进HEL细胞和MPN原代细胞分化和凋亡、减少PMF小鼠的疾病负担，且具有很好的安全性。本专利技术通过实验证明了LDL是良好的针对异常巨核细胞的药物运输载体，本专利技术制备的LDL
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MLN纳米药物具有良好的应用前景。
附图说明
[0039]图1为LDL
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MLN/MLN在HEL细胞中的IC50的测定。
[0040]图2为LDL
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MLN/MLN给药处理72小时后HEL细本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.LDL
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MLN纳米药物在如下1)
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8)中任一种中的应用：1)制备预防和/或治疗骨髓增殖性肿瘤的产品；2)预防和/或治疗骨髓增殖性肿瘤；3)制备预防和/或治疗原发性骨髓纤维化的产品；4)预防和/或治疗原发性骨髓纤维化；5)制备预防和/或治疗急性髓系白血病的产品；6)预防和/或治疗急性髓系白血病；7)制备抑制肿瘤细胞增殖和/或促进肿瘤细胞分化与凋亡的产品；8)抑制肿瘤细胞增殖和/或促进肿瘤细胞分化与凋亡；所述LDL
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MLN纳米药物是以LDL颗粒作为药物载体，将小分子抑制剂MLN8237进行包埋后得到的。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述LDL颗粒和所述MLN8237的质量比为1：(0.02
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0.03)。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述LDL
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MLN纳米药物的制备方法包括如下步骤：1)将LDL颗粒与马铃薯淀粉混合，然后冷冻干燥，得到LDL
‑
淀粉混合物；2)完成步骤1)后，用庚烷从所述LDL
‑
淀粉混合物中提取内源性脂质，得到提取后产物，然后将MLN溶液与所述提取后产物混合，孵育，得到LDL
‑
MLN混合物；所述MLN溶液由甲苯、MLN8237、月桂酸和硬脂酸组成。...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨琼，何冰虹，
申请(专利权)人：北京师范大学，
类型：发明
国别省市：