葡萄糖传感器、葡萄糖脱氢酶及其制备方法技术

本发明专利技术公开了葡萄糖传感器、葡萄糖脱氢酶及其制备方法，该制备方法包括如下步骤：A）、葡萄糖脱氢酶的去辅基化和修饰；B）、葡萄糖脱氢酶的重组。本申请通过对葡萄糖脱氢酶进行精确的修饰，从葡萄糖脱氢酶的活性中心到其表面构建了一条电子传递通道，实现了葡萄糖脱氢酶的直接电化学，进而从根本上消除了氧气对葡萄糖检测的制约，提高了葡萄糖动态检测的准确性。提高了葡萄糖动态检测的准确性。提高了葡萄糖动态检测的准确性。

【技术实现步骤摘要】
葡萄糖传感器、葡萄糖脱氢酶及其制备方法


[0001]本专利技术涉及葡萄糖传感器、葡萄糖脱氢酶及其制备方法。

技术介绍

[0002]糖尿病是威胁人类健康和生命的三大顽症之一，其典型临床症状是患者体内血糖过高，长期的高血糖会引起各种并发症，甚至威胁到患者生命。虽然目前尚无根治糖尿病的方法，但是尽可能地把血糖控制在正常范围以内，可以非常有效地减少和延缓糖尿病并发症的出现。因此，对于糖尿病患者而言，血糖的监测和调控就成了生活的一部分。近年来出现的植入式葡萄糖持续监测系统为成千上万的糖尿病患者提供了一个全方位调控血糖的工具。
[0003]现有的植入式葡萄糖持续监测系统的工作原理均是利用葡萄糖氧化酶的高选择性和高效催化性能，通过电化学方法对葡萄糖进行监测。它们或者存在“氧匮乏”的问题，例如依赖组织液的氧气来实现对葡萄糖的监测（如美敦力的Guardian和德康的Dexcom G5和6）；或者有潜在的氧气干扰问题（如雅培的Libre和libre 2）。因为氧气作为葡萄糖氧化酶催化氧化葡萄糖的自然媒介体，不可避免地参与葡萄糖的催化氧化。为了最大限度地消除本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.葡萄糖脱氢酶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：A）、葡萄糖脱氢酶的去辅基化和修饰：A1）、将葡萄糖脱氢酶溶于含有溴化钾的缓冲溶液中，并将缓冲溶液倒入透析袋中透析；A2）、然后，在磷酸缓冲溶液中再次透析，得到去辅基化的葡萄糖脱氢酶；A3）、对步骤A2）得到的去辅基化的葡萄糖脱氢酶进行化学修饰，得到经化学修饰后的葡萄糖脱氢酶；B）、葡萄糖脱氢酶的重组：B1）、将带有羧基的氧化石墨烯、N6
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氨基己基）黄素腺嘌呤二核苷酸、碳化二亚胺以及N
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羟基琥珀酰亚胺进行混合反应；B2）、反应结束后，对步骤B1）得到的反应液进行离心分离，离心结束后，进行清洗纯化，得到带有N6
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氨基己基）黄素腺嘌呤二核苷酸的氧化石墨烯；B3）、将所述经化学修饰后的葡萄糖脱氢酶、所述带有N6
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氨基己基）黄素腺嘌呤二核苷酸的氧化石墨烯和氯化钙进行混合反应；B4）、反应结束后，加入硼氢化钠，继续反应；B5）、反应结束后，进行离心分离，并对得到的葡萄糖脱氢酶进行清洗和分离，得到重组后的葡萄糖脱氢酶。2.权利要求1所述的葡萄糖脱氢酶的制备方法，其特征在于，在步骤A1）中，所述溴化钾的浓度为1~4.5mol/L。3.权利要求2所述的葡萄糖脱氢酶的制备方法，其特征在于，在步骤B1）中，所述带有羧基的氧化石墨烯、所述N6
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氨基己基）黄素腺嘌呤二核苷酸、所述碳化二亚胺以及所述N
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羟基琥珀酰亚胺的重量比为（0.5~5）：（0.06~0.15）：（0.02~0.12）：（0.012~0.03...

【专利技术属性】
技术研发人员：高志强，
申请(专利权)人：苏州中星医疗技术有限公司，
类型：发明
国别省市：