【技术实现步骤摘要】
一种催化葡萄糖合成D
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阿洛酮糖的融合蛋白及其构建方法
[0001]本专利技术属于生物化工领域,具体涉及一种催化葡萄糖合成D
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阿洛酮糖的融合蛋白及其构建方法。
技术介绍
[0002]D
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阿洛酮糖(D
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Psicose或D
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Allulose)是自然界中含量非常低的六碳糖,是D
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果糖C
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3位点的差向异构体。D
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阿洛酮糖很难被消化吸收,几乎不为生命活动提供能量,因此是一种非常有用的低卡路里的甜味剂。在医药健康领域,D
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阿洛酮糖可以抑制脂肪肝酶和肠道α
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糖苷酶,从而降低体内脂肪的积累和抑制血糖浓度的上升。在食品应用领域,D
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阿洛酮糖具有甜度高、溶解性好、低卡路里和低血糖反应等优点,被认为是最理想的蔗糖替代品之一。目前D
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阿洛酮糖已被美国食品药品监督管理局(FDA)认证安全。因此,无论是在医疗保健领域还 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种催化葡萄糖合成D
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阿洛酮糖的融合蛋白及其构建,其特征在于,以葡萄糖为底物,利用融合蛋白(GP,SEQ ID NO:1、GS1P,SEQ ID NO:2、GS2P,SEQ ID NO:3、GS3P,SEQ ID NO:4、GE1P,SEQ ID NO:5、GE2P,SEQ ID NO:6和GE3P,SEQ ID NO:7)将葡萄糖直接转化为D
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阿洛酮糖(反应过程如图1所示)。2.根据权利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白编码基因(GP,SEQ ID NO:8、GS1P,SEQ ID NO:9、GS2P,SEQ ID NO:10、GS3P,SEQ ID NO:11、GE1P,SEQ ID NO:12、GE2P,SEQ ID NO:13和GE3P,SEQ ID NO:14)是将葡萄糖异构酶编码基因(AcceGI,SEQ ID NO:15)、D
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阿洛酮糖3
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差向异构酶编码基因(CcDPEase,SEQ ID NO:16)和连接肽编码基因融合而成。3.根据权利要求1和权利要求2所述的融合蛋白的构建方法,其特征在于,所述的S为柔性连接肽(GGGGS),E为刚性α螺旋连接肽(EAAAK),其中数字表示所使用连接肽的串联拷贝数,例如,GS2P表示经过两次拷贝的柔性连接肽将葡萄糖异构酶编码基因和D
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阿洛酮糖3
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差向异构酶编码基因连接融合。所述的葡萄糖异构酶编码基因来源于Acidothermus cellulolyticus 11B。所述的D
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阿洛酮糖3
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差向异构酶编码基因来源于Clostridium cellulolyticum H10。4.根据权利要求1所述的D
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阿洛酮糖合成方法,其特征在于,以质粒pET28a(PB)N(序列如SEQ ID NO:17)为上述转化途径的表达载体,构建出含有所有途径基因的重组质粒pET28a(PB)N
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GP、pET28a(PB)N
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GS1P、pET28a(PB)N<...
【专利技术属性】
技术研发人员:许敬亮,吕永坤,贾箐,朱丽娟,张辉,赵安琪,熊文龙,阿拉牧,屈凌波,应汉杰,王诗元,
申请(专利权)人:郑州大学,
类型:发明
国别省市:
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