风车草对于人工湿地基质微生物的多样性影响的检测方法及应用技术

本发明专利技术提供了一种风车草对于人工湿地基质微生物的多样性影响的检测方法和应用，其包括如下步骤：(1)样品的制备及采集；(2)样品DNA的提取并检测DNA的浓度和纯度，然后检测DNA样品的完整性；(3)PCR扩增；(4)高通量测序；(5)进行质控，过滤、拼接和去除嵌合体；对OTU代表序列进行分类学分析，然后根据OTU数据计算α多样性获得相关指数；本发明专利技术通过对比有无种植风车草情况下砾石表面基质生物膜的群落构成差异，运用高通量测序技术对细菌16S rDNA基因进行扩增并测序，比对不同人工湿地环境下微生物的多样性，可以研究出它们的菌群结构和优势菌种，为最终设计出更科学的人工湿地方案提供帮助。助。助。

【技术实现步骤摘要】
风车草对于人工湿地基质微生物的多样性影响的检测方法及应用


[0001]本专利技术涉及一种植物对人工湿地基质微生物影响的检测方法，特别涉及一种风车草对于人工湿地基质微生物的多样性影响的检测方法及应用。

技术介绍

[0002]湿地是一种过渡性地带，处于陆生生态和水生生态两种系统之间。而人工湿地则是指通过人为手段建造的、可以调节的工程化湿地系统,因其具有调节生态，效果可靠，环境友好等优点，被广泛应用于水质净化领域。
[0003]人工湿地根据运行中不同的水力方式，分为表面流人工湿地、垂直潜流人工湿地和水平潜流人工湿地。表面流人工湿地存在占地面积大、水力负荷小、处理能力弱、夏季易滋生蚊虫等缺点。垂直潜流人工湿地的水质净化能力在这三种类型的人工湿地中是最强的，但是污水的水力流程较短，反硝化作用较弱，且建造成本高、运行管理复杂。水平潜流人工湿地则拥有水力和污染物负荷大，处理效果好，造价及管理难度适中等优点。
[0004]湿地里的植物主要起固定基质表面、提供良好过滤条件、防止湿地堵塞和为微生物提供良好根部环境等功能。在我国南方地区,湿地植物选择本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.风车草对于人工湿地基质微生物的多样性影响的检测方法，其特征是其包括如下步骤：(1)样品的制备及采集；(2)样品DNA的提取并检测DNA的浓度和纯度，然后检测DNA样品的完整性；(3)PCR扩增；(4)高通量测序；(5)进行质控，过滤、拼接和去除嵌合体；对OTU代表序列进行分类学分析，然后根据OTU数据计算α多样性获得相关指数；(6)数据分析。2.如权利要求1所述的检测方法，其特征是所述步骤(1)具体包括如下步骤：由PVC板搭建成人工水平潜流湿地，内部填充有直径4～6mm的砾石构成填料基质，在设备侧面安装有穿孔管，采集样品为砾石表面基质；风车草的种植密度为25株每平方米，水体流向为从左至右；选择不同区域做为采样位点，同时依据是否种植风车草分别建组。3.如权利要求1所述的检测方法，其特征是所述步骤(2)具体包括如下步骤：取1g样品，采用DNA提取试剂盒根据使用说明进行DNA提取，同时利用微型荧光计结合DNA检测试剂盒检测提取DNA的浓度和纯度；然后根据浓度检测结果，采用0.8％琼脂糖凝胶电泳检测DNA样品的完整性。4.如权利要求1所述的检测方法，其特征是所述步骤(3)具体包括如下步骤：选用16SrRNAV4可变区的通用引物进行扩增，引物分别为563F(5
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AYTGGGYDTAAAGNG
‑3’
)和引物802R(5
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【专利技术属性】
技术研发人员：葛利云，邓欢欢，周俊威，蔡贤雷，
申请(专利权)人：温州医科大学，
类型：发明
国别省市：