一种磁性双醛纤维素固定化细菌漆酶及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种磁性双醛纤维素固定化细菌漆酶及其制备方法和应用，属于固定化细菌漆酶技术领域。将纤维素第2，3位置的羟基氧化成醛基，制得磁性双醛纤维素MDAC；醛基直接与漆酶中的

【技术实现步骤摘要】
一种磁性双醛纤维素固定化细菌漆酶及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于固定化细菌漆酶
，具体涉及一种磁性双醛纤维素固定化细菌漆酶及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]酶产品可用于纺织、医药和化妆品行业废水的脱色等领域，无有害产物生成，是一种“绿色工具”。漆酶(EC 1.10.3.2)是属于蓝色多铜氧化酶家族的酶，可催化多种底物(例如酚和芳香族)的氧化，从而将分子氧还原为水。漆酶的生态高效氧化能力受到科学家的关注，但该酶的活性易受温度、金属离子、pH等外部环境因素的影响，而且水溶性漆酶很难从反应体系中分离出来，这对回收利用造成了障碍。因此，漆酶被固定在载体上，通过吸附、交联和共价结合来保持其活性，并实现良好的可重用性和对有毒环境的耐受性。酶可以通过物理吸附进行固定化，但酶泄漏时有发生。交联和共价方法都依赖于化学结合来固定酶。共价结合已被证明是酶固定化最稳定的方法。最常见的交联剂是戊二醛。交联剂的浓度和用量会影响固定化效率。浓度和剂量过低会导致漆酶的固定化水平降低；此外，戊二醛本身是有毒的，因此过高的剂量可能会由于其毒性而抑制漆本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种磁性双醛纤维素固定化细菌漆酶的制备方法，其特征在于，将纤维素第2，3位置的羟基氧化成醛基，制得磁性双醛纤维素MDAC；醛基直接与漆酶中的
‑
NH2进行胺醛缩合，制得MDAC
‑
漆酶复合物MDAC
‑
L。2.根据权利要求1所述磁性双醛纤维素固定化细菌漆酶的制备方法，其特征在于，磁性双醛纤维素的制备：(1)将纤维素粉与水搅拌溶解中，然后在氮气气氛中加热至80℃；将FeCl2·
4H2O和FeCl2·
6H2O的铁溶液缓慢地添加到纤维素粉末溶液中；再加入氨水进行反应，反应结束后磁力分离冷却产物，并用超纯水洗涤至pH为中性，然后在冷冻干燥机中干燥48h，获得黑色MC粉末；(2)将MC与水混合，在避光条件下加入高碘酸钠在30℃条件下反应，反应结束后加入乙二醇以消耗多余的高碘酸钠；然后，用超纯水洗涤，并在冷冻干燥器中真空干燥48h，获得干燥的MDAC粉末。3.根据权利要求2所述磁性双醛纤维素固定化细菌漆酶的制备方法，其特征在于，纤维素粉与水的用量比为1.5
‑
2.5g:100mL；FeCl2·
4H2O的浓度为8.0
‑
9.0g/L，FeCl3·
6H2O溶液的浓度为23.0
‑
24.0g/L。4.根据权利要求2所述磁性双醛纤维素固定化细菌漆酶的制备方法，其特征在于，所述MC与水的用量比为2.5
‑
3.0g:100mL；NaIO4与MC的摩尔比为4:1
‑
8:1；反应时间为5
‑
20h。5.根据权利要求2所述磁性双醛纤维素固定化细菌漆酶的制备方法，其特征在于，所述NaIO4与MC的摩尔比为8:1；反应时间为10h。6.根据权利要求1所述磁性双醛纤维素固定化细菌漆酶的制备方法，其特征在于，MDAC
‑
漆酶复合物的制备，包括以下步骤：(1)含有CotA漆酶基因的重组大肠杆菌B21在LB培养基中培养12h，在获得粗酶溶液之...

【专利技术属性】
技术研发人员：乔维川，张孜岩，付博，刘海，
申请(专利权)人：南京林业大学，
类型：发明
国别省市：