一种涎液化糖链抗原KL-6的检测试剂及检测方法技术

本发明专利技术公开了一种涎液化糖链抗原KL

【技术实现步骤摘要】
一种涎液化糖链抗原KL
‑
6的检测试剂及检测方法


[0001]本专利技术属于生化检测的
，特别是涉及一种涎液化糖链抗原 KL
‑
6的检测试剂及检测方法。

技术介绍

[0002]KL
‑
6(涎液化糖链抗原)是日本人Kohno于1985年发现的一种跨膜高分 子量黏蛋白，含有分子量约为200KD的唾液酸化糖链，该糖链主要是由 20个氨基酸残基组成的串联重复序列，具有被特异性抗体识别的空间结构 表位。在正常肺组织中，主要表达于型肺泡细胞和支气管上皮细胞的细胞 质和胞膜，部分表达于细支气管基底细胞和Clara细胞的细胞质及支气管腺 体，胰腺、胃及乳腺等器官组织的上皮细胞亦有部分表达。在日本和国内 开展的多项对KL
‑
6的研究显示，其作为间质性肺疾病(ILD)的血清学指 标显示出积极的临床意义，可用于间质行肺炎包括药物引导的间质性肺炎、 及胶原蛋白失调诱导的间质性肺炎等的诊断和确定治疗策略，用于诊断具 有肺癌、胰腺癌等的患者。
[0003]科研上kl<br/>‑
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种涎液化糖链抗原KL
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6的检测试剂，其特征在于：包括R1缓冲液、R2试剂和不同浓度kl
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6抗原标准品，kl
‑
6抗原标准品浓度为0、250、500、1000、2500、5000U/mL；所述R1缓冲液配方如下：调节PH至7.0
±
0.05，定容至1L容量瓶，用0.22μm滤膜过滤，置于2
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8℃保存；所述R2试剂的配置方法，包括以下步骤：(1)胶乳颗粒清洗；量取固含为10％的苯乙烯胶乳颗粒0.5ml加至3.0ml的清洗缓冲液中，离心，20000转/分钟，30分钟，去上清，用3.0ml活化缓冲液对胶乳微粒沉淀物重悬超声；(2)苯乙烯胶乳颗粒活化：加入活化剂对到上述清洗好的胶乳微粒中，混匀，对胶乳微粒进行活化，37度活化0.5小时；(3)抗体标记偶联：将抗人KL
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6抗体加入到活化好的苯乙烯胶乳颗粒溶液中，37℃摇床混匀2
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4h；(4)封闭：标记结束后开始离心，20000转/分钟，30分钟，去上清，取5.0ml的封闭缓冲液对胶乳微粒沉淀物重悬超声，然后进行封闭，时间为1小时；(5)封闭结束后开始离心，20000转/分钟，30分钟,去上清，加入150ml胶乳保存液，超声重悬后得到乳白色溶液即为试剂R2。2.根据权利要求1所述一种涎液化糖链抗原KL
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6的检测试剂，其特征在于：步骤(5)中胶乳保存液的配方如下，。3.根据权利要求1所述一种涎液化糖链抗原KL
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6的检测试剂，其特征在于：kl
‑
6抗原标
准品的配置：用含有1％BSA，0.8ml/L Proclin 300，PH为6.5...

【专利技术属性】
技术研发人员：许小锋，沈杲，
申请(专利权)人：合肥诺为尔基因科技服务有限公司，
类型：发明
国别省市：