一种检测重组蛋白电荷变异体的方法及应用技术

本发明专利技术提供了一种检测可特异性结合GPC3和CD3蛋白电荷变异体的方法及应用。该方法通过高效液相

【技术实现步骤摘要】
一种检测重组蛋白电荷变异体的方法及应用


[0001]本专利技术属于重组蛋白检测
，涉及一种检测可特异性结合GPC3和CD3蛋白同源二聚体杂质和电荷变异体的方法及应用。

技术介绍

[0002]由真核系统表达的重组双特异性抗体药物由两条不同的重链组成，这些重链随机组合包含同源二聚体的杂质和电荷异质性目标产物。同源二聚体杂质是重组双特异性抗体药物的关键质量属性，对重组双特异性抗体药物的稳定性、溶解性、免疫原性、体内外生物学活性、药物动力学功能发挥等都具有重要的影响。分析重组双特异性抗体药物的同源二聚体可以了解药物中杂质情况，是重组双特异性抗体药物质量控制必不可少的项目之一。
[0003]目前用于双特异性抗体药物电荷异质性和同源二聚体杂质的检测方法主要有三种，即平板胶等电聚焦电泳、离子交换色谱、毛细管等电聚焦电泳技术(药物生物技术，2018，25(5)：461
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466)。平板胶等电聚焦电泳法可快速直观地进行等电点区带显示，普及型较广，但其操作繁琐，分辨率低，准确定量困难。毛细管等电聚焦电泳法在分辨率及准确定量方面得到了本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测可特异性结合GPC3和CD3蛋白同源二聚体杂质和电荷变异体的含量的方法，其包括如下步骤：(1)通过高效液相色谱法
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离子交换色谱法对待测蛋白进行分析获得色谱图，基于所述色谱图，确定所述待测可特异性结合GPC3和CD3蛋白同源二聚体杂质和电荷变异体的含量；(2)所述高效液相色谱法
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离子交换色谱法所采用的流动相包括磷酸盐的混合溶液；通过不同混合比例构成流动相A和流动相B。2.根据权利要求1所述的方法，其中，流动相A选用磷酸氢二钠溶液，流动相B选用磷酸二氢钠溶液。3.根据权利要求2所述的方法，其中，所述的磷酸氢二钠溶液为40mM，所述的磷酸二氢钠溶液为40mM。4.根据权利要求1所述的方法，其中，所述高效液相色谱法
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离子交换色谱法采用的色谱柱包括阳离子交换色谱柱；优选地，所述色谱柱包括强阳离子交换色谱柱SCX。5.根据权利要求1所述的方法，其中，所述高效液相色谱法
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离子交换色谱法的洗脱时间为20～70min，优选为55min。6.根据权利要求1所述的方法，其中，所述高效液相色谱法
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离子交换色谱法的上样量为10
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50μL，流速0.5
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1.5m...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘娅梅，武慧敏，金柳函，高超，马昀，慎伟强，
申请(专利权)人：盛禾中国生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：